右旋糖酐铁注射液中右旋糖酐铁峰位相对分子质量的测定

中国新药与临床杂志 ( Ch in J N ew Drugs C lin Rem ) , 2005年 6月,第 24卷 第 6期 E-m a i:l xyy lc@ shyyxx. com h ttp: / / xyy.l ch inajourna.l net. cn http: / / zgxyy lczz. period ica ls. com. cn [文章编号 ] 1007-7669( 2005) 06-0438-03 右旋糖酐铁注射液中右旋糖酐铁峰位相对分子质量的测定 翟晨氵昊,陈东英,郜 尽 (中国科学院上海生命科学研究院上海药物研究所 药物质量分析研究室,上海 201203) [收稿日期 ] 2004-12-27 [接受日期 ] 2005-04-16 [作者简介 ] 翟晨氵昊 ( 1980-) , 男, 山东淄博人, 硕士 研究生,主要从事药物分析及新药质量研究;陈 东英 ( 1968-), 女,浙江衢州人,博士,副研究员,主要 从事药物分析及新药质量标准研究。 [联系人 ] 陈东英。 Phn: 86-21-5080-6600。 E-m a i:l dychen @ ma i.l shcnc. ac. cn [关键词 ] 铁右旋糖酐复合物; 相对分子质量; 色 谱法, 凝胶; 色谱法,高压液相; 质量控制 [摘要 ] 目的:建立测定右旋糖酐铁注射液中右旋 糖酐铁峰位相对分子质量 (M p)的方法,以评价 2种 注射液的质量差异。方法:色谱柱为 TSK G4000SW 凝胶柱 ( 7. 5 mm @ 30. 0 cm ), 保护柱为 TSKge l SW guard co lumn( 7. 5 mm @ 7. 5 cm ); 流动相为 0. 1% 叠氮化钠水溶液,流速为 1. 0mL# m in- 1;柱温和检 测器温度为 30 e 。以已知 Mp的右旋糖酐为标样, 拟合计算右旋糖酐的 Mp工作曲线,并经已知 Mp的 右旋糖酐铁对照品校正, 进一步拟合计算右旋糖酐 铁的 Mp。结果: 注射液 A右旋糖酐铁 Mp较小,平 均为 1. 53 @ 105; 注射液 B右旋糖酐铁 Mp较大,平 均为 4. 26 @ 105。结论: 建立了右旋糖酐铁的峰位 M p的测定方法, 2种注射液中右旋糖酐铁的 Mp相 差较大,反映了注射液的质量差异。 [中图分类号 ] R917; R973. 3 [文献标识码 ] A 右旋糖酐铁注射液在临床上可用于需要通过静 脉铁剂以维持铁储备的血液透析病人 [ 1]。国内外 药典均规定了起始原料 ) ) ) 右旋糖酐的相对分子质 量 [ 2, 3] ,范慧红等 [ 4]建立了右旋糖酐的相对分子质 量的测定方法。由于各个生产企业工艺控制的差 异,仅仅通过控制起始原料的相对分子质量,应不能 完全控制最终产品右旋糖酐铁的相对分子质量的范 围。有关测定右旋糖酐铁的相对分子质量的研究, 作者未见报道。本研究选择上市的 2种右旋糖酐铁 注射液,建立测定右旋糖酐铁的峰位相对分子质量 (M p)的方法,据此比较产品相对分子质量的差异, 希望为临床安全用药提供一定的质量依据。 材料与方法 仪器 美国W aters高效液相色谱系统, 包括 600型 泵, 2414示差折光检测器,柱温箱, M illenium色谱工 作站和 GPC应用软件, 20 LL手动进样系统; Sartor-i usA 120S电子分析天平。微孔滤膜为上海半岛实 业有限公司产品,直径 0. 5 Lm。 材料与试剂 右旋糖酐对照品: Dex tran-50 ( M p = 43 500), Dex tran-80 ( M p = 66 700 ) , Dextran-150 (M p= 123 600) , Dextran-270 (M p= 196 300 ), Dex- tran-410( M p = 276 500 )。右旋糖酐铁对照品: JDXS5-11 ( M p = 165 000 ) , JDXS5-22 ( M p = 180 000 ? 5% )和 JDXS5-33(M p= 157 500 ? 5% )。 以上均为 PHARMACOSMOS产品。叠氮化钠 (浙江 振兴助剂厂, 分析纯 ) , 葡萄糖 (中国医药集团上海 化学试剂公司,分析纯 ) ;水为色谱用水。 右旋糖酐铁注射液 A: 批号为 01436322-2, 0206396-5, 0226339-2; 规格为 2 mL B100 mg (以铁 计 ) ;生产商为 PHARMACOSMOS A /S, 丹麦; 注册证 号为 H20020537。右旋糖酐铁注射液 B: 批号为 0100718, 021014, 020626;规格为每支 2mL含 50mg 元素铁;生产商为浙江瑞安市制药厂, 中国; 批准文 号为浙江药准字 ( 1996)第 110701号。 色谱条件 色谱柱为 TSK G4000SW 凝胶柱 ( 7. 5 mm @ 30 cm ) ,保护柱为 TSKgel SW guard co-l umn ( 7. 5 mm @ 7. 5 cm ) , 柱温 30 e ; 流动相为 0. 1%叠氮化钠水溶液,流速为 1. 0 mL# m in- 1, 在 线脱气速度为 5 mL # m in- 1; 示差检测器温度为 30 e ;进样体积:每次 20 LL。 供试液制备 精密称取右旋糖酐对照品,右旋糖酐 铁对照品 JDXR5-11, JDXS5-22, JDXS5-33, 分别加流 动相溶解,制成 2 g# L- 1溶液, 摇匀, 待用。精密称 取葡萄糖 0. 164 3 g, 用流动相溶解并稀释, 制成 100 mL溶液,摇匀, 待用。分别取 2种注射液适量, 分别用流动相稀释,定容, 制成含右旋糖酐铁 4 g# #438# 中国新药与临床杂志 ( Ch in J N ew Drugs C lin Rem ) , 2005年 6月,第 24卷 第 6期 E-m a i:l xyy lc@ shyyxx. com h ttp: / / xyy.l ch inajourna.l net. cn http: / / zgxyy lczz. period ica ls. com. cn L - 1溶液,摇匀,待用。各样品进样前过滤。进样次 序依次为: 葡萄糖溶液, 右旋糖酐对照品溶液, JDXR5-11溶液, JDXS5-22溶液, JDXS5-33溶液以及 供试品试液。记录各色谱图,见图 1。 A B C 图 1 峰位相对分子质量测定图谱 F ig 1 Chrom ato- gram for de term ination peakm olecu lar we ight A:右旋 糖酐铁对照溶液 ( Batch No: JDXR5-11 ); B:注射液 A; C:注射液 B 结 果 标准方程 经 GPC专用软件进行处理,以右旋糖酐 的 Mp的对数值 ( LgM p)为纵坐标,以相应色谱峰的 保留时间 ( t )为横坐标进行线性拟合, 得方程 ( 1) : LgM p= - 0. 262 t+ 7. 29 ( r= 0. 996, n = 7)。在保 持斜率不变的前提下, 根据 JDXR5-11对照溶液测 得的第 1个峰保留时间 ( t= 7. 919 m in)和已知的 M p(M p= 165 000),对方程 ( 1)进行平行移动, 得计 算右旋糖酐铁 Mp校正方程 ( 2) : LgM p= - 0. 262 t+ 7. 29。可见方程 ( 2)与方程 ( 1)基本一致。为了检验 方程 ( 2 )的有效性, 分别将 JDXR5-22和 JDXR5-33 的对照溶液相应测得的第 1个峰保留时间代入,计 算得 Mp分别为 179 473和 157 761, 均落入相应的 相对分子质量范围 (M p ? 5% )中。故认为方程 ( 2) 可以用于检验注射液中的右旋糖酐铁的相对分子质 量。 分子质量 据此, 记录注射液 A和 B的各自 3个批 号的样品第 1个色谱峰的保留时间, 分别代入方程 ( 2), 注射液 A中 3批样品的 Mp分别为 147 231, 156 314, 149 623;注射液 B中的 3批样品的色谱峰 出峰时间已经超出线性的上限, 只能外推计算 Mp, 结果分别为 422 961, 423 471, 415 625。 讨 论 高效凝胶渗透色谱法是一种操作简便的测定高 分子相对分子质量的方法, 其中 Mp是高分子中相 对分子质量的一种达方法。在无法获得系列已知 相对分子质量的右旋糖酐铁的情况下,本研究以已 知 Mp的系列右旋糖酐对照品测得拟合工作曲线 后, 经已知 Mp的右旋糖酐铁线性校正, 应用于注射 液中右旋糖酐铁的 Mp的测定, 为右旋糖酐铁的相 对分子质量的测定和控制提供了一种新思路。 示差折光检测器由于无选择性, 可以较客观地 反映供试品中各组分的存在。从以上 2种注射液的 色谱图中可以看出, 两者的组成分布和 Mp存在较 大的差别, B产品的 Mp接近 A产品的 3倍, 一定程 度上反映了生产工艺上的差别。可见,为了保证药 品质量,提高临床用药的安全性, 建议将右旋糖酐铁 的相对分子质量测定订入质量标准中。 [参考文献 ] [ 1] 章 斌,梁馨苓,梁永正,等. 慢性炎症状态对血液透析病人补 铁治疗的影响 [ J ] . 中国新药与临床杂志, 2005, 24 ( 4) : 284- 287. [ 2] 中华人民共和国卫生部药典委员会. 中国药典;二部. 2000年版 [M ] . 北京:化学工业出版社. 117-118. [ 3] B ritish Ph arm acopoeia Comm iss ion. Brit ish Pharm acopoeia; V olum e Ⅱ. 2000 [M ] . London: the Stationery O ffice. 2040-2041. [ 4] 范慧红,刘金秀,徐康森.高效凝胶渗透色谱法在右旋糖酐铁质 控中的应用 [ J] .药物分析杂志, 2000, 20 ( 4) : 254-257. Iron dextran peak molecular weight comparison determ ination in iron dex- tran injections ZHA I Chen-hao, CHEN D ong-y ing, GAO Jin (D epartm ent of Pharmaceu tical Analy sis, Shanghai In- stitute of M ateriaM edica, Shanghai Institutes for B io- #439# 中国新药与临床杂志 ( Ch in J N ew Drugs C lin Rem ) , 2005年 6月,第 24卷 第 6期 E-m a i:l xyy lc@ shyyxx. com h ttp: / / xyy.l ch inajourna.l net. cn http: / / zgxyy lczz. period ica ls. com. cn logical Sciences, Chinese A cademy of Sciences, SHANG- HAI 201203, China ) [KEYWORDS] iron-dextran complex; molecular w e igh;t chrom atography, ge;l chromatog raphy, h igh pressure liqu id; quality contro l [ABSTRACT] A IM: To establish amethod for iron dex tran peakmo lecularwe ight determ inat ion in o rder to eva luate the quality o f the two iron dextran in ject ions. METHODS: H igh performance ge l permeation chro- matography (HPGPC ) w as used to determ ine the peak mo lecu lar w e igh t in the two in jections. The TSK G4000SW ge l co lumn ( 7. 5 mm @ 30. 0 cm ) and TSK- ge l SW guard column ( 7. 5 mm @ 7. 5 cm ) w ere ut-i lized w ith 0. 1% N aN 3 as mob ile phase taking known peak mo lecu lar w e ights of dextrans as the calibrat ion standards and known peak mo lecu lar w e ights o f iron dex trans as corrected standards. The flow rate w as 1. 0mL# m in- 1 w ith 30 e as the temperature for the co lumn and the reflective index detector. RE- SULTS: A method for peak mo lecular w eight determ-i nation of iron dextran w as estab lished. The peak mo- lecularw e ight for injection A w as determ ined as 1. 5 @ 10 5 and for injection B as 4. 2 @ 105. CONCLU- SION: A method for determ inat ion o f iron dex tran peak molecular w e ight w as established and the values o f peak mo lecu lar w eight w ere varied greatly betw een the two in ject ions suggest ing different quality betw een them. [REFERENCES] [ 1] ZHANG B, LIANG XL, L IANG YZ, e t al. In flu ence of ch ron ic in- flammatory state on hem od ialysis pat ien ts receiving intravenous iron [ J]. Ch in JN ew DrugsC lin Rem ( in Ch inese) , 2005, 24 ( 4) : 284- 287. [ 2] The Pharm acopoeia Comm iss ion of PRC. Pharm acopoeia of the Peo- p le s' Republ ic ofCh ina; Volum eⅡ. 2000 [M ] . Beij ing: Chem ical Industry Press ( in C h inese). 117-118. [ 3] S ee above [ 4] FAN HH, L IU JX, XU KS. H igh perform ance gel perm eat ion ch ro- m atography for the quality con trol of iron dextran[ J] . PharAn al( in Ch in ese) , 2000, 20 ( 4 ) : 254-257. [文章编号 ] 1007-7669( 2005) 06-0440-04 辛伐他汀与贝那普利单用或联用治疗糖尿病肾病 向 群 1,姚 强 1,丁 晔 2,阮 力 1 ( 1. 怀化铁路总公司医院、怀化医学高等专科学校附属铁路医院 肾科, 湖南 怀化 418000; 2. 怀化铁路总公司医院、怀化医学高等专科学校附属铁路医院 内分泌科, 湖南 怀化 418000) [收稿日期 ] 2004-06-29 [接受日期 ] 2005-02-16 [作者简介 ] 向 群 ( 1964-), 男, 湖南衡东人, 副主任医 师,学士, 铁道医学会肾病专业组委员, 广州铁路集团公司有 突出贡献的中青年专家, 主要从事肾小球疾病研究。 [联系人 ] 向 群。Phn: 86-745-218-5067 [关键词 ] 糖尿病肾病; 药物疗法;辛伐他汀; 贝那 普利 [摘要 ] 目的: 研究辛伐他汀、贝那普利联用或单 用对糖尿病肾病的肾保护作用。方法: 97例糖尿病 肾病病人随机分为 3组。辛伐他汀组 34例,予辛伐 他汀 20 mg, po, qd; 贝那普利组 31例, 予贝那普利 10 mg, po, qd;联合用药组 32例, 予辛伐他汀与贝那 普利口服,用法同前 2组。疗程均为 24 wk, 观察 3 组治疗前后的尿清蛋白排泄率 ( UAER )、内生肌酐 清除率 ( Ccr)、血脂、血压等指标。结果: 治疗后, 3 组 UAER与尿蛋白均降低, 血清蛋白升高 (P < 0. 01)。联合用药组 UAER降低 ( 103 ? s 47) mg# 24 h - 1 ,降低幅度大于辛伐他汀组与贝那普利组 [ ( 35 ? 29), ( 53 ? 41) mg# 24 h- 1, P < 0. 01] ,尿蛋 白降低与血清蛋白增长幅度联合用药组大于其他 2 组 (P < 0. 01, P < 0. 05)。 3组 Ccr与空腹血糖均下 降, 差异无显著意义 (P > 0. 05)。 3组血脂和血压降 低均有所改善 ( P < 0. 01), 联合用药组血脂改变程 #440#