QBT 2409-1998 化妆品中氨基酸含量的测定

QB/T 2409一1998 前 言 本是按GB/T 1. 1-1993《标准化工作导则 第1单元:标准的起草与述规则 第1部分:标 准编写的基本规定》进行编写。 本标准是根据氨基酸在一定pH条件下，与苟三酮反应生成蓝紫色化合物进行比色定量原理而制 定的。 本标准由国家轻工业局行业管理司提出。 本标准由全国化妆品标准化中心归口。 本标准起草单位:上海市日用化学工业研究所。 本标准主要起草人:甘平平、孔佳华、潘海燕、汤智凌 中华人民共和国轻工行业标准 QB/T 2409一1998 化妆品中氨基酸含量的测定 1 范围 本标准规定了化妆品中氨基酸含量的苟三酮比色测定法。 本标准适用于化妆品中蛋白质及其水解液、氨基酸含量的测定。 本方法最小检测浓度为0.01环。 2 引用标准 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均 为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。 GB/T 8170-1987 数值修约规则 3 原理 蛋白质物质经水解成氨基酸，而氨基酸在一定的pH条件下，与苟三酮反应生成蓝紫色化合物，对 其进行比色定量测定，从而计算出相应的氨基酸含量。 4 试剂 分析中应使用分析纯(AR)试剂，试验用水应为蒸馏水或纯度相当的水。 4.1 20o苟三酮溶液 称取苟三酮(HG 3-984 )1. Og，溶于一定量热水中，待冷却后定容至50ml。该溶液每隔(2-3)天需 重新配制。 4.2 磷酸盐缓冲溶液(pH=8.04) 4.2.1 1/15mol/L磷酸二氢钾溶液 称取磷酸二氢钾(GB/T 1274)9.070g,溶于水中后定容至1L, 4. 2.2 1/15mol/L磷酸氢二钠溶液 称取磷酸氢二钠(GB/T 1263)23.876g,溶于水中后定容至1L. 4.2.3 取4.2.1溶液5. OmL于 100mL容量瓶中，用4.2.2溶液稀释至刻度，摇匀。 4.3 盐酸(GB/T 622)6mol/L溶液 4.4 氨基酸标准溶液(200pg/mL) 准确称取白氨酸(L-Leucine含量不小于98%) 0. 2000g，用水溶解并定容至100mL,摇匀后再吸取 l OmL于l00ml容量瓶中加水稀释至刻度。 4.5 蜡块 蜂蜡与石蜡之比为1:9。 5 仪器 5.1 分光光度计:波长范围400nm-700nm. 国家轻工业局1998一11一25批准 1999一06一01实施 109 Qs/T 2409一1998 酸度计:分度值。.02. 电磁搅拌器。 容量瓶:100,1000ml。 移液管:1,2,5,1OmL. 水浴锅。 试管:30mm X 200mm, 分析天平:分度值。. OOOlg, 刻度试管:25,100mLo 烧杯:I OOmL, ?? ， ? ?? ? ? ??? ，? ?? ?? ? ?? ? ?? ???????? ? ? ? ? ? ??? ?? ?? 6 侧定步班 61 标准曲线的绘制 准确移取氨基酸标准溶液0.0,0. 2,0. 4,0. 6,0. 8,1.OmL(相当于氨基酸0,40,80,120,160,200pg) 分别里于25mL刻度试管中，加水补充至4mL，然后各加人2肠市三酮溶液和礴酸盐缓冲溶液各1mL, 摇匀。置沸水浴中加热15min，取出冷却至室温，加水至刻度，摇匀。静2 15min，用分光光度计在570nm 波长下以水作参比，用lcm比色皿侧定试液的吸光度，绘制吸光度对氮基酸含# (pg)的标准曲线。 6.2 样品前处理 准确称取样品约5g(准确至0. OOlg)于试管，加人6mol/L盐酸溶液约l OmL-20mL于沸水浴中水 解约6h(对乳化体可先将试样里于沸水浴中破乳lh-2h)。加人约lg-2g蜡块约30min后，取出试管 冷却。去除蜡块，将溶液移至100mL烧杯中，在酸度计上用俄液调节pH至7.5-8.0，再将溶液移人 100MI容量瓶中并加水稀释至刻度，摇匀待用。 6.3 测定 移取试液(6. 2) l ml.-4mL置于25mL刻度试管中，以下按6.1侧定步吸进行。侧得吸光度，通过标 准曲线计算氨基酸的含量，同时做一空白样。 7 结果衰示 样品中氨基酸含a(以白氨酸计)按式((1)进行计算: 氮基酸含t(%)=(C,-Co) X 100/V加Xlo, X 100“···⋯⋯。⋯”。二。。“二。”。(1) 式中:C,— 从标准曲线上查得样品的氛基酸的jt,pg; Co— 从标准曲线上查得空白样的数值，P9, V— 移取样品溶液的f ,mL: m— 样品量，9。 所得结果按GB/T 8170修约用两位小数表示。 8 精密度 两次平行测定结果之差应不大于其平均值的10%.