Basigin基因在大鼠子宫、卵巢和羊床前胚胎中的表

Basigin基因在大鼠子宫、卵巢和羊床前胚胎中的 Basigin基因在大鼠子宫、卵巢和羊床前胚胎中的表 Basigin基因在大鼠子宫、卵巢和羊床前胚胎中的表 Basigin为免疫球蛋白超家族成员，是一个高度糖基化的跨膜蛋白，已证实在小鼠精子发生及胚胎着床等过程中具有重要作用。本实验以大鼠为材料，利用原位杂交和免疫组化方法检测了basigin基因在大鼠早期妊娠、发情周期子宫中的表达;并利用假孕、延迟着床、人工蜕膜化及卵巢切除等模型研究basigin基因在大鼠子宫中的表达与调节。我们还利用RT-PCR方法检测了着床前胚胎中basigin基因的表达。另外，我们研究了大鼠性成熟过程中basigin基因在卵巢各级卵母细胞中的表达，以及basigin基因在黄体形成及退化过程中的表达。 Basigin mRNA在早期妊娠第1-9天子宫腔上皮及第3-6天腺上皮上均表达，而basigin蛋白则在第1-3天的腔上皮及第2-5天的腺上皮上表达。妊娠第6-9天子宫蜕膜都表达basigin。成熟卵母细胞及着床前各期胚胎中均可检测到basigin基因表达，自受精卵后随着胚胎发育的进程表达逐渐增强。着床后胚胎中随着胚胎发育basigin表达逐步增强。Basigin mRNA在假孕大鼠子宫第1-8天腔上皮及第2-6天腺上皮持续表达，而basigin蛋白质则在假孕第1-2天的腔上皮及第2-6天腺上皮表达。延迟着床子宫中basigin表达不明显，但在延迟着床激活的胚胎以及围绕胚胎的基质中basigin基因表达明显增强。未蜕膜化的子宫中basigin只在腔上皮中表达，而在人工诱导蜕膜化的子宫中蜕膜组织表达很强。Basigin基因在发情前期、发情期及发情后期子宫中表达较发情间期强。切除卵巢的大鼠子宫中几乎不表达basigin，但注射雌激素或雌激素与孕酮共同处理后表达显著增强，表明雌激素对其表达有明显诱导作用。Basigin mRNA在未成熟大鼠卵巢的各级卵泡颗粒细胞及卵泡膜细胞中都有表达，basigin蛋白在发育中的膜细胞中强表达，提示它可能在卵母细胞发育及成熟中起作用。排卵后正在形成中的黄体内basigin基因开始表达，此后表达逐渐增强，basigin mRNA第5天达到高峰，basigin蛋白质第7天达到高峰，表明basigin基因可能参与黄体形成。 这些结果表明，basigin基因的表达与胚胎着床及蜕膜化过程紧密相关，并可能参与卵泡发育及黄体形成过程。雌激素对basigin基因的表达 具有明显的上调作用。 中文摘要5-6英文摘要6-8 1( Basigin及其与哺乳动物生殖的关系8-14 1(1 Basigin可能的作用机理8-9 1(2 Basigin在雄性生殖系统中的作用9-10 1(3 Basigin在雌性生殖系统中的作用10-14 1(3(1 Basigin在卵巢中的作用10-11 1(3(2 Basigin与胚胎着床11-142( Basigin基因的克隆及核苷酸序列14-202(1 材料与方法14-182(2 实验结果18-203( Basigin在大鼠子宫及着床前胚胎中的表达20-353(1 实验材料20-223( 1(1 早期妊娠203( 1(2 发情周期20-213( 1(3 激素调节213( 1(4 延迟着床213( 1(5 假孕213( 1(6 人工诱导蜕膜化子宫21-223( 1(7 成熟卵母细胞和着床前胚胎的收集223(2 实验方法22-263(2(1 原位杂交22-243(2(2 免疫组化243(2(3 RT-PCR24-263(3 实验结果26-313(3(1 Basigin在早期妊娠子宫中的表达26-273(3(2 Basigin在假孕子宫中的表达27-283(3(3 Basigin在发情周期子宫中的表达28-293(3(4 Basigin在人工蜕膜化条件下子宫中的表达29-303(3(5 Basigin在延迟着床及激活子宫中的表达303(3(6 类固醇激素处理对Basigin mRNA在子宫中表达的影响30-313(3(7 Basigin在着床前胚胎中的表达313(4 结果讨论31-353( 4(1 Basigin与胚胎着床31-323( 4(2 Basigin与蜕膜化32-333( 4(3 类固醇激素对basigin基因在子宫中表达的调节33-343( 4(4 Basigin在大鼠着床前胚胎中的表达34-35 4( Basigin在大鼠卵巢中的表达35-43 4(1 材料与方法35-36 4(2 实验结果36-40 4(2(1 Basigin在卵巢卵母细胞发育过程中的表达36-38 4(2(2 Basigin在黄体退化模型卵巢中的表达38-40 4(3 结果讨论40-43 4(3(1 Basigin与卵母细胞发育40-41 4(3(2 Basigin与黄体形成及退化41-42 4(3(3 Basigin可能的作用机制42-43 5( 结论43-44 参考文献 44-52图版及图版说明52-64致谢64-65作者简介65