药学论文-芪蚣汤对免疫性肝纤维化的治疗作用

药学论文-芪蚣汤对免疫性肝纤维化的治疗作用 作者:庞学书, 卢广萍, 薄爱华, 李庆芬, 闫爱春, 朱 建平 【摘要】 目的探讨中药复方对免疫性肝损伤的治疗作用。方法采用猪血清注射 法复制大鼠肝纤维化动物模型,利用大、小剂量芪蚣汤灌胃治疗6周,检测血清 学指标。结果模型组较正常组对照PT延长,ALT,LN,HA增高,A/G下降,经芪 蚣汤治疗后,大剂量组PT,ALT,LN,HA和A/G均接近正常。小剂量组PT,LN 和HA虽较模型组下降,但仍明显高于正常组。结论芪蚣汤对免疫性肝纤维化有 治疗作用,并有量-效关系。 【关键词】 免疫性肝纤维化; 谷丙转氨酶; 层黏蛋白; 透明质酸 The Curative Effects of Qigongtang on Immune Liver Fibrosis in Rats Abstract:ObjectiveTo study the effect of Qinongtang on immune liver fibrosis.Methods40 rats were administrated intra-abdominally swine serum for 8 weeks to induce immune liver fibroses model.After 6 weeks treatment group were poured into gastra with Qinongtang and the serum were examined in rats.ResultsThe ALT,HA and LN increased and A/Gwas decrresed in model group.After Qinongtang treatment, they were significantly descended in large dose treatment group,and they were closed to normal group. In little dose treatment group,PT,LN,HA,andA/T were higher than normal group.ConclusionThe Qinongtang has effect on imnune liver fibroses shows dose-dependent manner. Key words:Immune; Liver fibrosis; ALT; Lininin; Haluronic acid 目前病毒性乙型肝炎:HBV:和丙型肝炎:HCV:导致肝纤维化或肝硬化的病例比较多见,据报道,1,乙肝慢性感染者大约25%最终死于肝硬化和肝癌。乙肝发展为肝纤维化的机制与自身免疫系统损伤:或紊乱:有关,2,,因此西药治疗效果不尽人意。近年来求助于中药治疗已有报道,3,4,,但是药物作用机制明确、效果好、价廉、无毒性的方剂尚属罕见。为了探讨治疗和预防肝纤维化的高效方剂,我们根据祖国医学对肝病的认识理论,设计了黄芪、蜈蚣、山慈姑、三七、白术等7味中草药组成的复方煎剂。经动物实验,观察了它们对凝血酶原时间、肝功能及肝基质中层黏蛋白:LN:和透明质酸:HA:的影响,并分析其机制,为治疗病毒性肝炎和预防肝纤维化、肝硬化开辟了新途径。 1 材料和方法 1.1 动物分组及模型复制成年Wistar大鼠40只,体重200,250 g,雄雌兼用。随机分成对照组、模型组、治疗1组:小剂量:和治疗2组:大剂量:。除对照组外,每周腹腔注射猪血清0.5 ml/周/次,连续8周,然后治疗1组用芪蚣汤灌胃,按100 g体重给1 ml煎剂:含生药1 g/ml,次/d:;治疗2组用芪蚣汤浓缩液每100 g体重给予1 ml:2 g/ml,1次/d:,灌胃,连续治疗6 周。此间对照组和模型组1 ml/d生理盐水灌胃。第7周戊巴比妥钠麻醉,心脏取血及取肝脏。进行血清学检测:肝组织形态学变化另文报告:。 1.2 芪蚣汤煎剂处方黄芪、蜈蚣、山慈姑、三七、白术、郁金和枳实。采用现代煎剂工艺,制成浓缩剂1 g/ml及2 g/ml两种浓度和煎剂。 肝功及凝血酶原时间测定凝血酶原时间:PT:测定采用Quick法:一 1.3 步法:。肝功能测定采用常规分析法:722分光光度计:检测ALT:谷丙转氨酶:、血清总蛋白:TD:、血清白蛋白:ALB,A:,计算A/G值:G球蛋白:,试剂盒购自南京建成试剂公司。采用放免分析法检测肝纤维化相关指标:即层黏蛋白:LN:和透明质酸:HA:,试剂盒购自上海海军医院。 1.4 统计学处理组间均数比较采用t检验;P，0.05为差异有显著性。 2 结果 经检测肝功能及凝血酶原时间,分别计算均数及标准差:?s:,并进行组间比较。 表1 各组血清学检测结果:略: 模型组PT明显增高于治疗2组和正常组,组间比较差异显著P，0.05。模型组ALT明显高于其它组,治疗1,2组明显降低,与模型组比较显著差异(P<0.05),与正常组接近,差异不显著(P，0.05)。LN及治疗1组HA与模型组差异不明显(P，0.05),治疗2组则下降,与模型组比较差异有显著差异(P<0.05)。 3 讨论 采用猪血清注射法模拟病毒性肝炎的病理过程,其变化为:猪血清注射为异体蛋白质反复进入机体,导致机体产生抗原-抗体复合物,从而激活补体,这些复合物与肝细胞表面FC受体结合,使大量免疫复合物沉积在肝细胞或肝基质中导致肝微循环受阻,肝细胞代谢异常。激活贮脂细胞:HSC:和枯氏细胞:KC:,从而产生很多细胞因子,刺激肝细胞及成纤维细胞合成胶原纤维、层黏蛋白及透明质酸,进一步导致肝纤维化,甚至肝硬化,5,。 祖国医学认为肝纤维化:或硬化:的本质或者基本病机为“肝郁脾肾气血虚、肝郁气滞导致血淤,经髓阻塞,血不养肝”或者“肝络阻塞,血淤气滞”;在治疗方面应采用“治肝补脾、益气健脾、理血软肝”的原则,因此多年来中医药治疗肝炎、肝纤维化多采用“化淤通络”的处方,如“桃红饮”:桃仁、红花、川芎、当归等:;扶正化淤方、强肝软坚汤、复方鳖甲软肝片等复方制剂,5,6,。本实验中采用芪蚣汤也是遵循祖国医学“因——机——证——治”相结合的原则,本方剂中黄芪具有益气健脾作用;蜈蚣能够解毒软坚;白术可以调节免疫机制,增强特异性和非特异性免疫功能,同时具有抗凝血及保护肝细胞作用;郁金含有姜黄素,能够抑制有害因子激活贮脂细胞及对肝细胞损伤,7,;山慈姑含有秋水仙素,能够促进肝细胞生长,减少肝细胞变性坏死;三七能改善微循环、缩短凝血时间和凝血酶原时间;枳实可以增加冠脉血流量,减少血管阻力,改善肝循环的作用。 通过本实验表明芪蚣汤对免疫性肝损伤造成的凝血酶原时间延长,肝细胞破坏导致的ALT增高,A/G比值下降和肝基质中LN和HA增多有逆转作用,其作用效果有明显的量-效关系。芪蚣汤保护肝脏的可能途径:?改善肝脏微循环缩短有害因子在肝血窦滞留时间,减少对肝细胞的毒性;?调节免疫系统,减少有害因子对HSC和KC的激活作用,间接抑制胶原纤维形成;?增强解毒功能减少机体代谢产生的内毒素对肝细胞的损伤。 总之,本实验提示芪蚣汤能够明显改善肝功能、缩短PT时间、减少肝基质中LN和HA含量,表现了“益气健脾、理血软肝”的功效,大剂量组效果高于小剂量组。此方在我院肝病门诊中已有上百例患者应用,并取得一定疗效,其作用机制的研究正在向纵深进行。此方剂对肝亚细胞结构的影响,将另文报道。 【参考文献】 ,1, 王兆荃,张 健,徐 敏,等.慢性乙型肝炎抗病毒治疗及相关问题探讨,J,.临床肝胆病杂志,2006,22:5::324. ,2, 付春生,查 岩.慢性乙型肝炎细胞因子变化与T细胞亚群的关系,J,.医学综述,2006,12:2::82. ,3, 郭顺根,江 涛,张玮等.中药复方保肝作用的组织化学免疫组织化学研究,J,.中国组织化学与细胞化学杂志,2004,13:3::269. ,4, 梁 萍,薄爱华,薛贵平,等.苦参碱抗免疫性损伤机制研究,J,.世界华人消化杂志,1999,7:2::104. ,5, 刘成海.肝纤维化的基础研究进展,J,.中国中西医结合杂志,2006,26:1::11. ,6, 占国清,邓文钦,李金科,等.肝康II号治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的临床观察,J,.临床肝胆病杂志,2006,22:5::328. ,7, 何雅军,舒建昌,吕 霞,等.姜黄素预防肝纤维化作用与肝星状细胞的关系,J,.中华肝病杂志,2006,14:5::337.