天麻素注射液对急性脑梗死的神经保护作用

天麻素注射液对急性脑梗死的神经保护作用 天麻素注射液对急性脑梗死的神经保护作 用 天津医药2011年3月第39卷第3期 doi:lO.3969~.issn.0253—9896.2011.03.005 天麻素注射液对急性脑梗死的神经保护作用 王彤宇 2 摘要目的:评价天麻素注射液对于急性脑梗死患者的治疗效果及神经保护作用.方法:采用单中心病例随机 对照研究,按人组顺序将146例患者随机分为治疗组及对照组,分别应用天麻素注射液及低分子右旋糖酐治疗.分别 在治疗前,治疗后第7天检测血清一氧化氮(NO),一氧化氮合酶(NOS),超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)水平, 同时评价患者神经功能.结果:2组在治疗前血清NO,NOS,SOD,MDA比较差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后 第7天2组血清N0,NOS,SOD水平明显高于治疗前(尸<0.01),MDA水平及NIHSS评分明显低于治疗前(P<0.O1);治 疗后第7天治疗组NO,NOS,SOD水平明显高于对照组(P<0.01),MDA水平及NIHSS评分明显低于对照组(P< 0.01).结论:天麻素可改变血清氧化,还原物质的比值,从而达到保护神经细胞的作用,同时明显改善患者临床神经 功能. 关键词脑梗死急性病天麻甙神经保护药一氧化氮一氧化氮合酶超氧化物歧化酶丙二醛 NeurologicalProtectionofGastrodinInjectiononAcuteCerebralInfarction WANGTongyu DepartmentofNeurology,GeneralHospitalofCNOOC,Tianjin300452,China AbstractObjective:Toevaluatetheeffectofthegastrodininjectiononpatientswithacutecerebralinfarction.Meth? ods:Onehundredandforty— sixcasesofcerebralinfarctionweredividedintothetrialgroupandcontrolgroup.Thelevelsof nitricoxide(NO),NO-synthase(NOS),serumsuperoxide(SOD)andmalondialdehy(MDA)weredetected,andtheneurologic functionswerealsoassessedinpatientsbeforetreatmentand7daysaftertreatment.Results:Therewerenosignificantdiffer. encesinthelevelsofNO,NOS,SODandMDAbeforetreatmentintwogroups(P>0.05).ThelevelsofNOS,NOandSOD weresignificantlyhigher7daysaftertreatmentthanthosebeforetreatmentintwogroups<o.o1).ButthelevelofMDAwas significantlylowerintrialgroupthanthatofcontrolgroup<0.01).ThelevelsofNO,NOSandSODweresignificantlyhigh? erintrialgroupthanthoseofcontrolgroup<0.01).Theneurologicfunctionwasbetterinpatientsoftrialgroupthanthatof controlgroup7daysaftertreatment.Conclusion:Gastrodininjectionplaystheroleofprotectiononnervecellsandcaname? lioratethenervefunction. Keywordsbraininfarctionacutediseasegastrodinneuroprotectiveagentsnitricoxidenitricoxidesyn— thasesuperoxidedismutasemal0ndi8ldehyde 急性缺血性脑血管病所要处理的首要问题是 供血中断所继发的神经元损伤,治疗的首要目标是 恢复血供,保护神经细胞和恢复神经功能.恢复血 供主要是溶栓及取栓治疗,而针对神经细胞保护作 用的药物研究结论尚存在争议u1.对4一羟基苯 甲一B—D一吡喃葡萄糖苷(天麻素)是天麻的主要有效 成分,中医认为其具有熄风定惊,镇静安眠之功 效.近年来的研究证实,天麻素可通过调节神经细 胞中氧化/还原物质的水平,减少凋亡细胞的数量来 达到神经保护的作用.本文旨在探讨天麻素对急 性脑梗死的神经保护作用. 1对象与方法 1.1研究对象选取2007年1O月—2009年2月本院神经 内科住院患者146例,按照入院顺序随机分为2组.治疗组 70例,男56例,女14例,年龄60—79岁,平均(68.2~7.9)岁;对 照组76例,男54例,女22例,年龄59—8l岁,平均(69.5~8.4) 岁.所有患者均经神经影像学检查证实为急性脑梗死,诊断 依据1995年中华神经科学会和中华神经外科学会制订的《各 类脑血管疾病诊断要点》,所有患者无房颤及血管炎史,无心 脏结构异常,无严重肝肾功能不良.2组患者年龄(f=O.96), 性别构成(=1.61)比较差异无统计学意义(P>0.05). 1.2主要仪器与试剂紫外分光光度计(岛津uv一240型), 作者单位:300452天津,海洋石油总医院神经科学研究所神经 内科 206 试剂盒购于南京建成生物工程研究所;天麻素注射液(昆明 制药集团有限公司),阿司匹林肠溶片,尼莫地平片(拜耳制 药有限公司),低分子右旋糖酐氨基酸注射液(上海长征富民 金山制药有限公司). 1.3方法治疗组以天麻素注射液600mg加入5%葡萄糖 注射液(或0.9%氯化钠注射液)250mL中静脉滴注,1次,d,7 d为1个疗程,连用2个疗程,同时辅以I:1服阿司匹林肠溶片, 尼莫地平片治疗;对照组给予低分子右旋糖酐氨基酸注射液 250mL静脉滴注,1次,d,14d为1个疗程,使用1个疗程,同 时辅以口服阿司匹林肠溶片,尼莫地平片治疗. 1.4观察指标2组患者分别于治疗前,治疗后第7天取晨 间空腹静脉血5mL,提取血清,一8O?冰箱冷冻保存,1个月 内检测.采用硝酸还原酶法测定一氧化氮(NO),一氧化氮 合酶(NOS)含量,黄嘌呤氧化酶化学比色法测定超氧化物歧 化酶(SOD)含量,硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量. 用紫外分光光度计测定,样本制备,保存及测定均按试剂盒 操作说明书进行.应用美国国立卫生研究院的卒中评分量 表(NIHSS)在治疗前及治疗后第7天分别评定神经功能缺损 程度. 1.5统计学处理采用SPSS11.0软件进行统计学.计 量资料用?s表示,治疗前后比较采用配对f检验,2组间比 较采用成组t检验,以P<0.05为差异有统计学意义. 2结果 2.12组治疗前后NO,NOS,SOD及MDA比较2 组间在治疗前血清NO,NOS,SOD及MDA比较差异 无统计学意义(P>0.05);治疗后2组组内各NO, NOS及SOD水平明显高于治疗前,MDA水平均明显 低于治疗前,差异均有统计学意义(P<0.01);治疗 后治疗组NO,NOS及SOD水平明显高于对照组, MDA水平明显低于对照组,差异均有统计学意义 (P<0.01),见表1. 表12组患者治疗前后血清NO,NOS,SOD及 MDA水平比较(?s) 组别nNO(p~mol/L)NOS(U/mL) 治疗前治疗后t治疗前治疗后t 治疗组70335.9~17.2558.9~23.66.57"19.03~2.61233.51?4.17324.63" 对照组76337.3+17.3451.5~19.84.7018.75~2.2225.95~3.7214.49 t0.49522.0560.700l1.576 组别nQ旦!旦垒!! 治疗前治疗后t治疗前治疗后t 治疗组7079.50~13.19106.52~18.8410.25"6.80~2.492.06~0.7415.27 对照组7681.64~14.2293.45+15.574.89"6.14~2.363.85~1.387.30" t0.9404.583"1.6459.644 2.22组患者治疗前后NIHSS平均分值比较治疗 后2组NIHSS评分均显着低于治疗前;治疗组NIHSS 评分在治疗后显着低于对照组,差异均有统计学意 义(P<0.01),见表2. 表22组患者治疗前后NIHSS平均分值比较(分,4-s) 3讨论 天麻(gastrodiae|ataB1)属兰科植物,从天麻中 提炼出的化学成份有天麻素(gastrodin),天麻苷元, 香荚兰醇,香荚兰醛,天麻醚苷,对羟基苯甲醛,柠 檬酸及琥珀酸等.其中活性成分含量最高的有效 单体是天麻素,又称天麻苷p.天麻素有镇静催眠, 镇痛及抗惊厥作用,对脑细胞损伤的保护作用,抑 制炎症早期的渗出和阻止血栓形成的作用及增强 免疫,抗衰老和抗遗忘作用等,其中对神经细胞损 伤的保护作用主要是通过拮抗兴奋性氨基酸的神 经毒性和抑制氧自由基诱导的神经细胞损伤来实 现的.Zeng等研究发现天麻素可以显着减小短暂 大脑中动脉闭塞的大鼠的脑梗死体积和水肿体积, 改善神经学功能;显着抑制缺氧缺糖和谷氨酸引起 的神经细胞死亡,降低缺氧缺糖后的胞外谷氨酸水 平,并显着抑制缺氧缺糖引起的Ca和NO增加.通 过大鼠海马区的脑缺血再灌注模型发现,天麻素显 着抑制缺血期的谷氨酸(G1u)水平升高,加速再灌注 期的胞外氨基丁酸(GABA)增加,从而降低缺血再 灌注期间的Glu/GABA.薛柳华等嘲对缺血再灌注 损伤星形胶质细胞的研究显示,天麻素可使胶原纤 维酸性蛋白(GFAP)表达减轻,乳酸脱氢酶(LOft)漏 出下降,NOS活性减弱.用谷氨酸和HO造成PC12 细胞损伤模型,10,,10及10mol/L天麻素可明显 地提高谷氨酸诱导的PC12细胞还原能力,抑制LDH 的释放,明显抑制细胞内Ca冰平的升高,减轻HO:引 起的PC12细胞损伤,降低PC12细胞内过氧化氢的水 平,剂量相关性地降低PC12细胞的凋亡百分率用.以 上研究均提示天麻素有抑制氧自由基诱导的神经 细胞损伤的作用. 本研究表明在治疗开始后,反映神经细胞凋亡 的敏感指标一NOs水平在2组均开始升高,提示随 着脑动脉内皮氧化物质的增多,泡沫细胞形成及粥 样硬化斑块的扩大,催化NOS活性水平升高,从而 天津医药2011年3月第39卷第3期 导致一氧化氮水平升高,反过来会加剧脂质氧化反 应,考虑原因可能是缺血缺氧这一病理刺激引起的 应激反应,可起到一定保护作用,但损伤过重或时 间较长会使内皮细胞产生损伤;NOS的水平的升高 亦提示内源性NO分泌的增加.而治疗后,I临床症 状明显改观的同时,NOS活性水平也升高,且在天麻 素治疗组明显高于对照组,表明天麻素介导了内皮 NO分泌的增加,加强了NO对内皮的舒张效应,从 而改善了血管痉挛. MDA是脂质过氧化物分解产物,其水平的升高 表明体内脂质过氧化产物增多,氧自由基损伤加 重.SOD是特异性自由基清除剂,可以歧化0一为 H:0z,后者再由过氧化氢酶作用变为HO,消除部分 自由基.本研究结果显示,天麻素治疗组SOD活性 随治疗时间的延长逐渐升高,同时MDA的水平下降 更加明显,表明脑梗死患者脂质过氧化反应增强,氧 自由基损伤加重,造成神经细胞的损伤,提示天麻素 可促进SOD的释放,降低MDA的产生,从而抑制脂质 过氧化反应,减轻氧自由基诱导的神经细胞损伤. 207 参考文献 【l】KhajaAM.Acuteischemicstrokemanagement:administrationof thrombolytics,neuroprotectants,andgeneralprinciplesofmedical management[J].NeurolClin,2008,26(4):943—961. [2】张乐多,龚晓健,胡苗苗,等.天麻素抗血管性痴呆作用及其机理 【J].中国天然药物,2008,6(2):130—134. [3】HaoXY,TanNH,ZhouJ.Anewdi-(p-hydroxybenzy1)hydroxy1. aminefromGastrodiaelataB1[J].ChineseChemicalLetters,1999, 1O(6):467-471. [4]ZengXH,ZhangSM,ZhangL,eta1.Astudyoftheneuroprotective effectofthephenolicglucosidegastrodinduringcerebralischemia invivoandinvitro[J].PlantaMed,2006,72(15):1359—1365. 【5】ZengXH,ZhangY,ZhangSM,eta1.Amicrodialysisstudyofeffects ofgastrodinonneurochemicalchangesintheischemie/reperfused ratcerebralhippocampus[J].BidPharmBull,2007,30(4): 801-804. 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(2010—06—06收稿2010—09—06修回) (本文编辑陆荣展) 国内外研究快讯 三氟拉嗪对过氧化氢诱导的PC12细胞凋亡的保护作用 许多研究表明,氧化应激诱导的细胞损伤与生理老化过 程和许多神经退行性疾病如阿尔茨海默病和帕金森病等有 关.既往研究认为,氧化代谢和抗氧化剂不足引起的过氧化 氢(H:0:)清除率过低,从而导致H0:和活性氧物质(ROS)水 平的增高,而这也是发生氧化应激及之后引起细胞死亡的主 要原因.相比其他器官,大脑具有高代谢率和较差的细胞再 生能力的特点,因此被认为最易受氧化应激损伤. 三氟拉嗪(trifluoperazine,TFP)是钙调蛋白的抑制物,通 过和ca竞争特异性蛋白质结合位点发挥抑制作用.有报道 认为,TFP能通过降低细胞和线粒体的ca超载,减少短暂局 灶性脑缺血梗死体积.TFP也可与线粒体内膜相互作用,对 细胞凋亡过程中的O一积聚,脂质类过氧化反应及通透性转 运过程产生抗氧化性,同时也影响细胞色素C的释放.本研 究旨在探索TFP对HO:处理的PC12细胞的潜在保护作用及 其机制. 研究采用H:0:处理的PC12细胞为细胞模型,通过MTT 法检测TFP对细胞存活率影响,同时利用流式细胞术检测细 胞凋亡情况及TFP对PC12细胞的ROS积累水平的影响.最 后,通过检测细胞线粒体膜电位的变化及胞内Ca的改变情 况,进一步探讨TFP对PC12细胞保护作用的机制.结果表 明,利用TFP预处理PC12细胞,可以抑制H0对PC12细胞 的损伤作用,提高细胞存活率.流式细胞术检测结果表明 TFP可以明显抑制胞内ROS的积聚,同时也抑制细胞凋亡, 降低胞内ROS水平和细胞凋亡率.TFP预处理PC12细胞后, 线粒体膜电位水平明显下降,表明TFP预处理部分阻断了 HO:诱导的线粒体膜电位(MMP)损耗.同时,本研究利用膜 片钳技术进一步检测了H:O引起PC12细胞损伤时胞内外 Cd水平的改变情况,结果显示H0可以引起细胞膜钙通道 电流明显增大,表明H0:促进ca通过钙离子通道流人胞内, 增加细胞内钙离子浓度. 本研究发现,H2()通过氧化应激途径引起细胞损伤,TFP 可以通过抑制胞内的ROS积聚及改善线粒体功能降低H0 对PC12细胞的凋亡作用,同时,其保护效应可能与抑制胞内 钙超载进程有关. (李州摘杨卓审校译自BrainResBull,2011,84:183—188)