胸腺肽调整氢化可的松对免疫功能的副作用

胸腺肽调整氢化可的松对免疫功能的副作用 ( ) ( ) 摘要 目的 :分析胸腺肽 TP对长期使用氢化可的松 HC并致敏的小鼠免疫器官与免疫功能的影响 。方法 : 16 只 CBL 小 57 ( 鼠随机分 TP 组 、HC 组与正常组 。TP 组与 HC 组小鼠肌肉注射 HC 0 . 5 mg/ d 2 周 ,用 Hep22 细胞致敏 。TP 组腹腔注射 腹 ) μ注TP 10 g/ d , HC 组腹注 N S ,共 6 d 。取胸腺和脾组织行光镜 、电镜观察 ,测淋巴细胞毒试验 、溶肿瘤细胞反应等指标 。结 果 : TP 能促 HC 致萎缩的胸腺 、脾淋巴细胞增生 ,提高免疫活性细胞的细胞免疫及体液免疫功能 。结论 : TP 能调整 HC 的免 疫抑制作用 ,提高淋巴细胞免疫功能 。 关键词 胸腺素 氢化可的松 胸腺 免疫 中国图书资料分类法分类号 Q 574 R 977 . 11 Thymic pept ides modulat ing side2eff ect of hydrocort isone on immune f unct ion Pan J iahua ,Lo u Wanling ,Chen L anju ,Ding Zho uzhi ,Li Huamin ( )De p a rt m en t of Pedi at rics , A f f i l i ated Hos pi t al of B en gbu M edical Col lege , A n h ui 233004 ( ) Abstract Object ive :To analyse t he effect of t hymic pep tides TPo n immune o rgans and immune f unctio n of ( ) mice sensitized and under lo ng2ter m hydroco rtiso ne HCadminist ratio n . Methods :16 CBL mice were divided 57 into 3 gro up s : TP , HC and co nt rol gro up . TP and HC gro up s were injected int ramusculary wit h 0 . 5 mg/ d HC fo r μt wo weeks and sensitized wit h Hep22 cell . There , TP 10 g/ d was injected to TP gro up and N S to HC gro up int raperito neally fo r six days. Thymus and spleen were taken fo r examinatio n wit h light and elect ro n micro scope , cytoto xicit y of lymp hocyte and humo ral immune respo nse et al . Results :TP augmented lymp hocytes p roliferatio n of at rop hic t hymus and spleen , increased humo ral and cellular immune respo nse of immune co mpetent cells. Concl usions : TP can adjust immuno supp ressio n due to HC administ ratio n and imp rove immune f unctio n of lymp hocyte . Key words t hymo sin ; hydroco rtiso ne ;t hymus ;immunit y ( ) ( 天 , TP 组与 HC 组小鼠腹腔注射 腹注Hep22 细胞 上海儿 自身免疫性疾病患者长期大剂量使用糖皮质激 6 ) 科研究所悬液 5 ×10/ ml 0 . 2 ml 致敏 ,3 d 后再次用 Hep22素控制症状 ,往往随着病程进展 、免疫功能低下等日 6 细胞悬液 5 ×10 / ml 0 . 2 ml 腹注加强致敏 。实验第 7 天前 ( ) 渐明显 ,常死于感染等并发症 。胸腺肽 TP作为免 μ 后各3 d , TP 组腹注 TP 10 g/ d , HC 组腹注 0 . 1 ml N S ,共疫促进剂 ,能提高机体抗肿瘤 、抗感染等防御能力 。 6 d 。第 15 天 ,全部小鼠离断颈椎 ,无菌取血清 、脾等 。将脾 ( ) 本文通过形态学和免疫学方法 ,对氢化可的松 HC6 () 制成细胞悬液 3 ×10/ ml,用于淋巴细胞毒试验 。用 2 . 5 % 免疫抑制后小鼠 TP 的改善作用进行探讨 。 戊二醛 PBS 液固定 1/ 2 胸腺 ,半薄切片定位淋巴组织 ,上海 医科大学透射电镜检查 ;另 1/ 2 胸腺 、脾用 4 %多聚甲醛 PBS1 材料与方法 液固定 ,石蜡包埋 , HE 染色 。„1? (()1 . 4 淋巴细胞毒试验 形态学检查法用 4 %小牛血清 1 . 1 实验动物 CBL 小鼠 上海西普尔2必凯实验动物有 57 3 () R PM I21640 液制备 Hep22 细胞悬液 2 ×10/ ml,96 孔板内 , ) 限公司雄性 ,2 月龄 ,16 . 8,18 g ,共 16 只 。随机分 : TP 组 6 μ每孔加入100 l ,静置片刻 ,37 ?,5 % CO,培养 20 h ,使细胞 2 只 , HC 组 6 只和对照组 4 只 。6 ( μ) 贴壁 ,每孔加入小鼠脾细胞悬液 3 ×10/ ml100 l , 每例 3 ( ) 1 . 2 药 品HC : 上 海 产 品 批 号 : 9604012 , 浓 度 为 () 100 mg/ 20 ml ; TP :长春生物制品研究所 批号 :951018。 个重 复 孔 , 阴 性 对 照 孔 不 加 入 脾 细 胞 , 设 有 正 常 对 照 孔 。 1 . 3 实验步骤 实验第 1 天起 ,每天上午 8,9 时 , TP 组与37 ?,5 % CO,40 h ,甩去培养液 ,0 . 2 %甲醛固定 , Giemsa 染 2 HC 组小鼠股肌注射 HC 0 . 5 mg/ d ,连续 14 d 。于实验第 7 色 ,计数剩余的 Hep22 细胞 。 „2?1 . 5 溶 肿 瘤 细 胞 反 应 采 用 改 良 的 补 体 结 合 试 验, 用 R PM I21640 液稀释血清 , 96 孔板内每孔加入稀 释 血 清 100 3 安徽省教育委员会资助课题 7 ( μ(μ( ) 作者单位 :233004 蚌埠医学院附属医院儿科 潘家华 ,陈兰举 ,丁周 l , Hep22 细胞 1 ×10/ ml50 l , 1 ?5 稀释的兔补体 已用 5 7 ) ( )志; 蚌埠医学院组织胚胎学教研室 楼皖玲 ,李华民 ) μ ×10Hep22 细胞/ ml 吸收50 l ,37 ?,2 h 。台盼蓝染色 ,血 „3?2 . 1 光镜检查TP 组与 HC 组胸腺明显萎缩 ,被 持免疫耐受性,从而控制患者症状 。本文中胸腺 TP 组残余胸腺实质略多 ,胸腺细胞脂肪组织替代 。 肽不能逆转氢化可的松引起的 胸 腺 萎 缩 与 脾 脏 萎 较密集 。HC 组残留胸腺实质很少 , 胸腺 细 胞 十 分 缩 。但在外来抗原致敏条件下 ,胸腺肽能增加残余 „4?稀疏 。两组脾脏也发生明显萎缩 , 但 TP 组脾白髓 胸腺实质内淋巴细胞数 ,与陈紫榕等观察结果一 淋巴细胞较密集 ,呈增生状 ,红髓淋巴细胞稀疏 ,表 致 。由于胸腺细胞增生不显著 ,并伴细胞凋亡 ,表明 明红髓大量淋巴细胞迁移 。HC 组脾内淋巴细胞疏 胸腺肽不会过度促进胸腺细胞增生 ,也不影响胸腺 松分布 ,红 、白髓之间分界不太清楚 。 细胞增生分化过程中部分细胞凋亡的正常过程 。胸 腺肽可能促脾淋巴细胞增生并 大 量 迁 移 入 炎 症 部 2 . 2 胸腺的电镜检查 TP 组皮质内胸腺细胞较密 位 ,显著增加细胞免疫反应与体液免疫反应能力 ,促 (集 ,大 、中淋巴细胞较多 ,有少量凋亡的胸腺细胞 见 „5?进 T细胞分泌 IL22, 因而可改善 HC 免疫抑制 H ) 图 1。HC 组胸腺细胞稀疏 ,皮髓交界区巨噬细胞 后机体防御功能降低 。临床试验中 ,胸腺激素治疗 () 较多 见图 2。随机观察 10 个放大4 000倍视野中 , 2 自身免疫性疾病 ,可使患者的临床症状改善或完全 μ 胸腺细胞/ 64 m: TP 组 4 . 55 ?1 . 99 , HC 组 3 . 00„6?控制 ,自身抗体检查结果由阳性转为阴性。提示 ( ) ?1 . 90 t = 1 . 78 ,单侧 P < 0 . 05。 胸腺肽主要提高机体对外来抗原的免疫力 ,适用于 ( ) 2 . 3 免疫学测定指标1淋巴细胞毒试验 : 小鼠 配合糖皮质激素进行辅助治疗 。被 Hep22 细胞致敏后 , TP 组脾细胞杀肿瘤细胞能力 () 本文图 1 、2 见封二( ( ) ) 较 HC 组显著增强 P < 0 . 001。2溶肿瘤细胞反 参 考 文 献( 应 : TP 组存活的肿瘤细胞 台盼蓝未着色的 Hep22 1 沈玉清. 免疫学与免疫检验学. 北京 : 中国医药科学技术出版社 , ) ( ) 细胞百分率低于 HC 组 P < 0 . 05。提示胸腺肽 1989 . 273,275 () 能促进体内浆细胞分泌抗体 ,杀伤肿瘤细胞 。3腹 2 Chang YH , J agels M , Abraham E. Haemo rr hage p ro duces dep ressio ns in alloantigen2specific immune respo nses in t he mo use 腔渗出淋巴细胞数 : 腹腔冲洗液中 TP 组淋巴细胞 t hro ugh activatio n of supp resso r T cells. Clin Exp Immunol , 1990 , ( ) () 数显著高于 HC 组 P < 0 . 001见表 1。提示胸腺 ( ) 80 3?478 肽能促淋巴细胞向炎症部位迁移 。 3 Mo rris R G , Hargreaves AD , Duvall E , et al . Ho r mo ne2induced cell deat h : Surface changes in t hymocytes undergoing apopto sis. Am J ( )表 1 胸腺肽治疗后小鼠免疫学指标 x ?s ( ) Pat hol ,1984 ,115 3?426 腹腔渗出 溶肿瘤 淋巴细胞毒试验 4 陈紫榕 ,刘小朋 ,张国安 , 等. 口服胸腺因子 D 的免疫调节作用. 淋巴细胞数细胞反应组别 n ( ) 剩余 Hep22 细胞数6( ) 中华微生物学与免疫学杂志 ,1996 ,16 2?124( )×10 / ml ( )% 5 张惠华 ,陈慰峰. 胸腺肽对 Co n A 诱导的小鼠脾细胞及考的松耐6 TP 组 ?11 . 4 ?15 . 6 12 . 00 ?2 . 90 32 . 0 52 . 7 ( ) 受胸腺细胞产生 IL22 的调整作用. 上海免疫学杂志 ,1985 ,5 4? HC 组 93 . 3 ?29 . 3 71 . 3 ? 4 . 4 4 . 67 ?1 . 97 6 211 ?2 . 81 4 . 78 5 . 12 t 6 ( ) 张天民 ,张晓云. 胸腺素及其临床应用. 新药与临床 ,1985 ,4 3? P < 0 . 001 < 0 . 05 < 0 . 001 161 „收稿日期 1998202227? ?为 t′检验值 蚌 埠 医 学 院 学 报“国 际 老 年 人 年 ”征 稿 启 事 联合国将 1999 年定为“国际老年人年”。为此 ,本学报征集涉及老年医学的基础 、临床 、预防方面的论著 、病例分析 、综述 () 等文稿 。本学报将于 1999 年某期以专栏形式 ,择优集中刊用 。格式请参阅本学报 1999 年第 1 期《稿约》第 70 页。 () 截稿日期为 1999 年 3 月 5 日 此后来稿 ,则可按本学报正常投稿处理。