亚致死剂量铜对蚯蚓P450酶和抗氧化酶活性的长期影响

亚致死剂量铜对蚯蚓P450酶和抗氧化酶活性的长期影响 Vol, 32，No, 332 3 环境科学学报第 卷第 期 2012 Mar, ，2012 3 年 月 Acta Scientiae Circumstantiae 杨晓霞，张薇，曹秀凤，等, 2012, 亚致死剂量铜对蚯蚓 P450 酶和抗氧化酶活性的长期影响,J,, 环境科学学报，32( 3) :74 5-750Yang X X，Zhang W，Cao X F，et al, 2012, Long-term effect of coppwither sublethal dose on cytochromPe450 and antioxidant enzyme activities of earthworms,J,, Acta Scientiae Circumstantiae，32( 3) :74 5-750 P450 亚致死剂量铜对蚯蚓酶和抗氧化酶活性的长期 影响 1，2 3 1 1，2 1，2 1，*，，，，，杨晓霞张薇曹秀凤刘杨吉普辉宋玉芳 1, ,110016中国科学院沈阳应用生态研究所沈阳 2, ,100039中国科学院研究生院北京 3, ,110161沈阳农业大学土地与环境学院沈阳 :2011-04-28:2011-05-29:2011-06-09收稿日期修回日期录用日期 :( Eisenia fetida ) Cu ( 100、200、300、400，，摘要以赤子爱胜蚓 为 供 试 生 物通过人工污染草甸棕壤的研究了暴露于 含有亚致死剂量 ) 1 mgkg ) P450 、( GST) 、( SOD) ( CAT) ?8 的土壤中 周时间内蚯蚓体内细胞色素 含量谷胱甘肽转移酶超氧化物歧化酶及过氧化氢酶活性的变 ) 1 , ，1 ，8 , P450 mgkg 100 ?2 结果显示各指标在暴露 周时均无显著变化但在第 周时各指标均受到显著抑制含量在 剂量水平下暴露 周时 化) 1 ; GST、SOD SOD mg?kg CAT 3 ，CAT 100 和 活性则均在第 周开始表现出显著的诱导效应且 和 在 剂量下即出现诱导现 现出显著的诱导效应) 1 GST mgkg , 4 ，P450 GST ，SOD ，200 ?CAT 象而 暴露时间大于 周时含量及 则在剂量下显现诱导现象活性开始表现出抑制效应及活性则在暴 , : , ，Cu 6 露大于 周后显现抑制效应以上指标对污染物的响应模式为无显著变化诱导抑制铜是蚯蚓生长的必需元素蚯蚓自身对 的适应机 ?? , ，，P450 但各指标在对毒性的响应敏感性上存在差异其中响应 ，制以及对铜的长期摄取能危害蚯蚓正常代谢可解释上述响应模式产生的原因 SOD、CAT , ，，，，最为敏感而 最不敏感因此在生态毒性诊断时应选择不同指标作为一套指标体系相互补充以增强污染诊断的灵敏性及长期诊 , 断性 ; ; ; P450; :关键词铜亚致死剂量长期暴露细胞色素 抗氧化酶 :0253-2468( 2012) 03-745-06 :X171, 5:A文章编号中图分类号文献标识码 ongem eec of coppe subeha dose o n cyochome P450 and L-trfftrwith ltltrantioxidant enzyme acves of eahwoms tiitirtr 1，2 3 1 1，2 1，2 1，*YANG Xiaoxia，ZHANG Wei，CAO Xiufeng，LIU Yang，JI Puhui，SONG Yufang 1, Institute of Applied Ecology，Chinese Academy oSf ciences，Shenyang 110016 2, GraduatedS chool，Chinese Academy oSf ciences，Beijing 100039 3, College of Land andE nvironmental Science，Shenyang Agricultural University，Shenyang 110161 Receved 28 April 2011; eceved in revised form 29 May 2011; accepted 9 June 2011 iri ) 1 Abstract: Earthworms E( isenia fetida) as test usbjects are exposed tosu b-lethal dose (10 0，200，300 and400 mgkg ) of Copper ( Cu) f8o rw eeks?st nd d th th th raccording to the method of meadow broswnoil polluted artificially, At the 1 ，2 ，3 ，4 ，6 and 8 week，the cytochromPe45 0，glutathione-s- transferase ( GST，) superoxide dismutase ( SOD) and taclaase ( CAT) were tested, The results show that thev ariation of all indices is not significant in st th the 1 week，while at the8 week they changseig nificantly, The response behavior of all indices during exposure can besu mmarized as: insignificant changeinductioninhibition, The reasons for suchr esponse behavior are that Cu is the essential metal for earthworms and earthworms haavdaep tive ?? mechanism for Cu，buta bsorbing over-dose Cu for ong time will do harm to earthwormnso' rma metaboism, However，thee xperimenta resuts showt hat lllllthe response sensitivities of different indexes to Cu are different, The P450 content was the mosesnts itive index，while SOD andC AT activity were the east, Therefore，the four ndces shoud be used together as a set oofm baes to mpove the senstvty and effcency when dagnosng dffeent exposue liilirkririiiiiiiirr concentrations, Keywords: copper; sublethal dose; l ong time; cytochrome P450;a n tioxidant enzymes : ( No, 20977094，40930739)基金项目国家自然科学基金项目 Supported by the National Natural Science Foundation of China ( No, 20977094，40930739) : ( 1985—) ，，E-ma: xaoxayang2000@ gma, com; * -ma: songyufang@ae , ac, cniliiil()，Eili作者简介杨晓霞通讯作者责任作者 女 Biography: YANG Xiaoxia( 1985—) ，female，E-mail: xiaoxiayang2000@ gmail, com; * Corresponding author，E-mail: songyufang@iae , ac, cn ( 2009; ，2007;，时响 应 更 为 敏 感 王 磊 等张 薇 等 1 ( Introduction)引言2009)， P450 但 酶系在诊断重金属污染时是否较抗 ,氧化酶系敏感还有待进一步研究 、“”、伴随着矿业开发三废排放污水灌溉，，因此本文采用土壤接触法将赤子爱胜蚓暴 等人 ( 100、200、300、400 露于含有亚致死剂量铜 ，( Cd、Cu、Zn、Ni) 类活动的进行土壤重金属污染愈 ) 1 mg?kg ) 8 ，, ，的土壤中 周监测其体内的细胞色素 加严重尽管土壤对重金属污染具有缓冲作用但 P450 、SOD、GST , CAT ，，酶含量和 酶活性的变化旨在 因重金属具有可迁移性差不能降解等特点因而 Cu ( ，2003) , ，探讨土壤中亚致死剂量 污染对蚯蚓体内上述酶 能在土壤中长期积累郑喜坤等因此如何 ，利用合理的生物标记物进行长期的土壤重金属污 含量或活性的剂量及时间效应寻找适合的生物标 ，Cu ，,记物为 污染环境的长期诊断以及环境监测标 染诊断是一个具有理论与实际意义的问题 ,准的制定提供更为现实的科学依据 赤子爱胜蚓是国际上公认的土壤毒理实验模 ，( OECD，1984) 式生物经济合作发展组织已建立了 , 其急性致死与慢性体重抑制率的标准实验但上述 指标不能满足低剂量污染条件下土壤毒理长期诊 2 ( Materials and methods)材料与方法 , P450 ( SOD、CAT、GST) 断的需求酶及抗氧化酶如 2, 1仪器与试剂作为生物标记物已经在水生及陆生环境中不同生 : CP-80MX ( ) ，仪器低温超速离心机日立紫外 ( Sirokaet al, ， 2004; GoksyrUV-2550( ) ，物 体 得 到 了 证 实 双光束分光光度计 岛津受控环境生 ,长箱 et al, ，1992; Gravato eatl , ，2002; Peters eatl , ， : ( BSA) G-250 试剂牛血清蛋白及考马斯亮蓝 1994; ，2009) , 薛银刚等近年有学者研究了陆生生 ( CBG) ，均购于上海生工生物技术服务有限公司为 ，物蚯蚓体内抗氧化酶的响应但这些研究大多采用 ，,分析纯其它药品均为市购分析纯 ( ，2007; ，2009; 滤纸接触法卜元卿等王磊等张薇 2, 2 2009; ，2007;，2009 ) , 土壤暴露实验等薛银刚等滤纸接触法虽 ( Eisenia fetida) 供试动物赤子爱胜蚓购于沈阳 ，，简单易行但却与蚯蚓自然生长环境相距太远不 ，, 接近现实亦不能进行长期暴露实验也有部分学 :3 ，300 :400 mg ，2 月龄体重 带有农业大学选用 ，30 d 者利用土壤接触法进行研究但暴露时间均小于 , 环带的健康蚯蚓作为供试动物供试土壤来自中国 ( 2010; ，2010; ，，卜 元 卿 等范 学 铭 等王 磊 等 ，0 : 20 cm 科学院沈阳应用生态研究所试验站为 的 2009) , P450 ，此外蚯蚓体内 酶作为污染物代谢的 ，1,表层清洁土壤理化性质见表 ，，PAHs 第一阶段酶较抗氧化酶系而言在诊断 污染 表 1 供试土壤的理化性质 Tabe 1 Physica and chemica properties of test sio llll 总磷凯氏氮有机质阳离子交换量 土壤类型总钾pH) 1 ) 1 ) 1 ) 1 / ( g?kg )/ ( g?kg )/ ( g?kg )/ ( cmol?kg ) 草甸棕壤0. 140. 18%0. 9116, 5012, 306, 22 ( 16 h /8 h) ，1、2、3、4、6箱中光暗交替培养蚯蚓暴露 根据人工土壤中赤子爱胜蚓的铜半致死剂量 ) 18 , 及 周后测定其内脏中各生化指标含量或活性每 ( LDmg?kg ) 、463 为 沈阳农业土壤的背景值及 50 4 ，3 , 个剂量处理设 个平行每个平行重复测定 次为 ( GB 15618—中华人民共和国土壤环境质量标准 ，避免新生蚯蚓引起结果误差每周定期将土壤中的 1995) CuSO，设计暴露水平在清洁土壤中加入 溶 4 ,卵茧剔除 ，Cu 0、100、200、300、400 液使各处理 含量依次为 ) 1 ) 1 2, 3 生化测定mg?kg ，，0 mg?kg , 其中为空白对照调节土壤中 4? 20% (V / V ) 5 蚯蚓在 的 甘油溶液中浸泡 25% , Cu 水含量为 为减少 由于吸附固定引起的有 ) 1 min ，, 0. 15 mol?L KCl 后迅速解剖内脏内脏用 的 ，7 d 效浓度降低带来的误差以上土壤经过 平衡处 ) 1，( 45 cm × 35 cm × 30 cm， ( 250 mmol?L ，4 mL 理后转移到带盖的塑料盒溶液清洗后移入 匀浆缓冲液 × × ) ，5 kg，100 长 宽 高中每盒盛有土壤 并放入 条 ) 1 ) 1，( 20 ? 2) ? 、80% 蚯蚓置于湿度为 的受控环境生长 ，50mmol?L Tris，pH = 7, 5，1 mmol?L 蔗糖) 1 DTT，1 mmol?L EDTA) ，中用玻璃组织研磨器将 747 3 : P450 期杨晓霞等亚致死剂量铜对蚯蚓 酶和抗氧化酶活性的长期影响 8, 0 ，SPSS1 6, 0 ，6 mL，其细胞破碎后使其最终匀浆液体积为 在低处理数据及作图采用 统计软件进行( 4? ) 15000 × g ，p , 0. 05 ,15 min 温超速离心机上以 离心 后 统计分析被认为差异显著 ，得上清液一部分用于测定蚯蚓体内的抗氧化酶活 3 ( Resuts) l结果; ，性或含量另一部分用于制备微粒体并于超速离 4 ? 150000× g min ，90 心机在 以 再次离心 后将所 ，P450 SOD、、在整个实验过程中空白组 含量) 1 3 mL ( 250 mmo lL，50 ?得沉淀用 保存缓冲液蔗糖) 1 ) 1 CAT GST ( 0.87 ?，及 均 无 显 著 变 化分 别 保 持 在 mmolL Tris，pH = 7, 5，1 mmolL DTT，1 ??) 1 ) 1 0. 08)n molmg ( ) 、( 64, 71? 3, 55 )?以 蛋 白 计mmolL EDTA，20% ) ，?甘油重新悬浮测定蛋白含 ) 1 ) 1 Umg ( ) 、( 3, 00 ? 0. 41)U mg ( ??以蛋白计以蛋白P450 ,量与 含量 )1 ) 1 ) 、( 75, 75 ? 2, 15) nmolmg min ( mg ??计以每 蛋 -各酶活性或含量的测定均采用紫外可见分光 DNPG ) ，1 ，白中的 计且暴露 周时各处理组上述指 , P450 ( ，2007 ) 光度计含量测定参照文献张薇等方 ( 1 ) , 2 标与空白组相比无显著变化图 当暴露至第 ，P450 ，周时各处理组 含量均显著高于空白组分别 et al, ，( Luo，SOD 法活性采用氮蓝四唑法测定 1, 49 、1, 83 、1, 79 、1, 61 ，为空白组的 倍倍倍倍表 1999)， CAT ( ，1997)活性的测定参见文献徐镜波等( 1a) , 3 现出显著的诱导效应图 而当实验进行至第 ( ，1986 ) ，GST 方法活性测定参照文献毛德寿等方 ，P450 , 周时各处理组 恢复至空白组水平暴露持续 , 法粗酶液与微粒体悬浮液中蛋白含量的测定均采 4 ，P450 ，至第 周时各处理组 量表现为诱导效应且 ，,用考马斯亮蓝法以牛血清蛋白为标准蛋白 ) 1 ( 100、200 mgkg ) P450 ?低剂量处理组的 含量显著 ) 1 ( 300、400 mgkg ) , ?高于高剂量处理组但随着暴露 2, 4数据分析 ? , Origin数据均用平均值 标准误来表示利用 图 1 不同含量 Cu 处理对赤子爱胜体内 P450 含量 (a)、SOD (b)、CAT (c)和 GST (d)活性的影响( 相同字母表示无显著差异，下同)Fig, 1 Effect oCuf on P450 content ( a) ，SOD (， bC)A T ( c) and SOD ( d) tiv iatices in the gut ofE isenia fetida ( the samlee tter indicated no sgnfcant dfference) iiii 6 P450 ( 300、400，量长期暴露下对蚯蚓体内 酶系初期诱导后期时 间 的 增 加至 第 周 时 高 剂 量 组 ) 1 , 1 ，P450 ，抑制暴露 周时各处理组 无显著变化暴露 mgkg ) ( 100、200?，表现为抑制效应而低剂量组 ) 1 2 ，，Cu 周后显著增加表现出诱导效应可能是由于 mg?kg ) P450 , 的 含量与空白水平相当当整个实 ，Cu ，是生命必需元素在此时段内 摄取尚未过量亦 ，P450 验结束时含量表现为随着暴露剂量的增加而 , 4 是蚯蚓适应环境的结果而暴露时间超过 周至实 ，,减少各处理组均表现为抑制效应 ，，Cu验结束出现了显著的抑制效应这可能是由于 1b SOD ，2 如图 所示暴露至第 周时各处理组的 ，活性与空白组对比仍无显著差异且各处理组间的 Bouraoui et al, ， 2008; (在 蚯 蚓 体 内 不 断 积 累 SOD , 3 ，活性亦无明显差异在暴露至第 周时各处 Bozcaarmutlu et al, ，2007 ) ，P450 抑制 载脂蛋白的SOD 理组 蚯 蚓 体 内 活性分别显著高于空白组 形成或是抑制了载脂蛋白与血红素间的相互转化 54. 80%、 45, 97% 、57, 42% 、67, 83% ，表现为明显 , 4 ，的诱 导 效 应当实验持续至第 周 时高 剂 量 组 ( Baldwin et al, ，1999; Viarengo et al, ，1997) ，抑或) 1 ( 300、400 mg?kg ) SOD 的 活性分别为空白组的 P450 ( Wong eatl , ，2000 ) ,是抑制了 基因的表达 ) 1 1. 51 1, 88 ( 100、200 mgkg ) 、，?倍倍而低剂量组的 Narusaka ( 2005) CuSO等已通过基因芯片实验证实 4SOD , 6 ， 活性却保持在空白组水平暴露至第 周时 P450 , Wong ( 2000) 能影响 多数基因的表达等则通SOD ，各处理组的 活性均显著高于空白组表现为诱 PCBs、PAHs、Cu、Cd 7 过将鱼类暴露在含有 的海水 , ，SOD 导效应当实验结束时各处理组 的活性明显 d ，P4501A genes 3, 6 :9 , 0 后发现 是对照组的 ，,低于空白水平表现为抑制效应 , Hesham ( 2005) ，Cu 倍在 等的研究结果中离子能降CAT 在整个实验过程中随时间及浓度的变化 cyp1a1 ，Ahr，低 的催化活性直接激活 通过转录及后SOD ( 1c) , 3 4 与 相似图 在暴露时间大于 周而小于 CYP1A1 , 转 译机制显著降低 蛋白的降解速率亦有 ，CAT , 周时活性表现出显著的诱导趋势暴露持续 ( ，2009; ，2007; 2009) 学 者王磊等张薇等将蚯蚓暴) 1 4 ，( 300、400 mg?kg ) 至第 周 时仅 高 剂 量 组 的 、( a) P450 14 d ，露 于低剂量芘苯并芘 后发现 出现 CAT , 6 ，活性显著增加而实验至第 周时仅低剂量 , 了 显著的抑制效应上述研究结果与本研究结果的) 1 ( 100、200 mgkg ) ?CAT ，组的 活性显著增加高剂 、差 异一方面是由于污染物暴露环境或供试生物) 1 CAT ( 300、400 mgkg ) ，P450 PAHs ?量组的 活性与空白组水平 不 同另一方面也表明 酶在响应低剂量 , ，CAT Cu P450 ，相当实验结束时各处理组的 活性受到显著 时 较 敏感这有可能是因为 更容易催化亲 脂 性化合物的氧化而产生羟基化合物或环氧化合,抑制 ,物 2 ，蚯蚓暴露于土壤中小于 周时各处理组的蚯 Cu ，虽是生物体必需元素但摄取过量则会刺激 GST ( 1d) , 蚓体内 活性与空白组水平一致图 当暴 ) 1 ，( 细胞产生大量活性氧引起机体的氧化损伤卜元 3 ，100 mg?kg ，露持续至第 周时除 处理组外其余 ，2007) ,S OD -CAT 卿等是生物体的重要抗氧化系 GST 33, 25% 、处理组的 活性分别显著高于空白组 ，，统可有效清除体内产生的超氧阴离子终止自由 40. 45%、 47, 58% , 4 ，而 暴 露 至 第 周 时各 处 理 组 , 基反应本研究中不同处理水平在供试时间段内 GST , 4 活性均显著高于空白组而暴露时间大于 周 CAT SOD , 3 :4 的变化趋势与 极为相似在暴露 周 ，GST 直至实验结束各处理组的 活性均显著低于空 ，SOD-CAT ，时活性显著增加表明蚯蚓体内可能积 ，GST 白组水平且随着暴露水平的增加 活性随之呈 Cu，累了过量的 从而引发大量的超氧阴离子的产 ,减小的趋势 ，SOD-CAT 生进而使 活性增加以清除体内的活性 , 氧而在暴露后期则因活性氧自由基的积累已远超 ，过抗氧化酶系统清理自由氧的能力从而抑制了 SOD-CAT , ( 2007) 的活性卜元卿等亦证明了蚯蚓暴 4 ( Discussion)分析与讨论 ) 1 Cu 100 mgL ?28 d ，露于 浓度大于 的土壤中 后 P450 ，细胞色素 酶作为生物标记物目前在水体 SOD ， 活性表现为显著诱导效应这与本实验的结果 ( Sirokaet al, ，2004; Goksyr环境 中 的 研 究 较 多 ) 1 , 60 120 g?kg 一致而蚯蚓暴露在 和 μ芘污染土壤 et al, ，1992; Gravato eatl , ，2002; Peters eatl , ， 14 d ，SOD ，中 内其内脏中 活性的变化不显著而 1994; Wong ael,t ，2000; Narusaka eatl , ，2005 ) ， ) 1 240、480 g?kg SOD 960 和 芘则致使 活性出现 μ通常表现为被外源污染物诱导或抑制而使其活性 “”( ，2007) ,先诱导后抑制的响应模式张薇等 , ，Cu 或含量显著增加或降低本实验中在 亚致死剂 749 3 : P450 期杨晓霞等亚致死剂量铜对蚯蚓 酶和抗氧化酶活性的长期影响 ) 1 : 4 ，GST GST mgkg ,3 ，，200 ?周各处理组 活性显著升高这象而 则在 剂量下显现诱导现象暴露 ，Cu 4 GST ，P450 可能由于蚯蚓自身的适应机制在 的胁迫下致 暴露时间大于 周时含量及 活性开始表 ，SOD CAT 6 GSH GST 现出抑制效应及 活性则在暴露大于 周 使体 内 活性升高进而导致 活 性 升 高 , ，P450 ( Farombi et al, ， 2007; Sheweita et al, ， 1998; 后显现抑制效应因此蚯蚓体内的 及抗氧化 : ,Viarengo et al, ，1997) ，酶表现模式为无显著变化诱导抑制从而有效清除体内的类过氧 ?? ，，化物保护机体免受氧化损伤并起到一定的解毒 2) ，P450 从各指标对毒性的响应敏感性来说最 , 6 GST ，作用在暴露 周后 显著受到抑制这可能是 ，SOD , CAT 为敏感而 及 最不敏感由于各生化指标 ，铜在体内长期积累已经危害到蚯蚓的正常代谢 ，，对污染物响应的敏感性存在差异因此在生态毒 ( Farombi et al, ，2007) , ( 2007 ) 卜元卿等将蚯蚓暴 ，，性诊断时选择不同的指标作为一套指标体系有 ) 1 Cu mgL 100 28 d ，?露于 浓度为 的土壤中 后发现 ,助于增强污染诊断的灵敏性和长期有效性 GST ，活性表现为显著诱导效应这与本实验的研究 , ( 2007 ) 结果一致张薇等将蚯蚓置于低剂量芘污染 14 d ，GST 土壤 后活性在前期表现为诱导效应而后 1955—) ,,, :( 责任作者简介宋玉芳 女研究员长期从事土，BaP 期表现为抑制效应也有学者发现在不同 暴露 , -ma: songyufang@ ae, ac, cn,Eili壤生态毒理研究 ，GST 时间和浓度处理下赤子爱胜蚓体内的 活性保 ( Luo eta l, ，1999) ,参考文献(References):持不变 Cu ，尽管 能潜在破坏蚯蚓的正常代谢但在短 Badwin D R，Marsha W J, 1999, Heavy meta poisoning and itsllll，期暴露时间内由于蚯蚓肝脏内存在的胱氨酸能结 laboratory investigation ,J,, Ann Clin Biochem，36: 267-300 Cu，( Farombi 合 从而表现出解毒或者储存的作用 Bozcaamutu n , 2007, Effect omf ecuycadmumncerlA，AriErr，i，ikl， et al, ，2007) , 1 P450 这可能是在暴露 周时不论是 chomum and znc on netc popetes of NADPH-cytochromPe 450 riikiirriGST、SOD、CAT 还是 活性指标均未产生明显变化的 reductase uprified from leaping mullet( Liza saliens) ,J,, Toxicology in Vitro，21: 408-416 , 原因之一至实验结束时各指标均表现出显著的抑 Bouaou ZBann MGheda Jet a, 2008, Acute effects of dcmaum ri，i，ir，li，Cu ,制效应则表明 对蚯蚓的毒性长期存在 on liver phase I and phase II enzymes and emtallothionein ，P450 100 各指标对毒性的响应存在差异如 在 accumulation on sea bream Sparus aura,ta J,, Fish Physiol ) 1 mgkg 2 ?剂量下暴露 周后开始表现出显著诱导效 Biochem，34: 201-207 , GST SOD、CAT 3 应与 活性则均在第 周开始表现出 , 2010. ，，，卜元卿骆永明单正军等类二噁英多氯联苯对赤子爱胜 ) 1 J, , 30( 5) : 699-704,,蚓生理活性的影响 中国环境科学 ，SOD mgkg CAT 100 ?显著诱导不同的是 及 均在 ) 1 Bu Y Q，Luo Y M，Shan Z J，et al, 2010. Effect ofi odxin-like PCBs on GST mg?kg ，200 处理水平时就已显现而 在 时才 physiological activities of earthworms E( isenia fetida) ,J,, China , 4 GST ，P450 显现暴露大于 周后及 活性开始表现 Environmenta Science，30( 5) : 699-704( in Chinese )l，SOD CAT 6 出抑制效应而 及 则在暴露大于 周后才 , ，，P450 显现此效应由此可看出响应最为敏感其次 卜元卿，骆永明，滕应，等,2007,铜暴露对赤 子 爱 胜 蚓 ( EiseniaGST,为 fetida) 抗氧化酶活力的影响 ,J,, 环境化学，26( 5) : 59 3-597 Bu Y Q，Luo Y M，Teng Y，et a, 2007, Effect of copper oann tioxidant l enzymea ctvtes of earthworms( sena fetda) J, nvonmentaiiiEiii,,Eirl Chemistry，26( 5) :59 3-597( in Chinese ) , 2010. ，，，3 范学铭史小航王哲娟等玉迪安对蚯蚓 种抗氧化酶活 ,J,, ，26( 13) : 319-323性的影响 中国农学通报 Fan X M，Shi X H，Wang Z J，et al, 2010. Effect of dean Eonis enis 5 ( Conclusions) 结论foetida three antioxidant enzymesa ctivities ,J,, Chinese Agricultural Science Bulletin，26( 13) : 319-323( in Chinese ) 1) ，Cu铜是蚯蚓生长的必需元素而蚯蚓自身对 Farombi O，Adeowo O A，Ajimoko Y R, 2007, Biomarkers of oxidative l，Cu 亦存在一定适应机制但长期摄取 会超过蚯蚓 stress and heavy metal levels as Indicators of environmental pollution ，自身的生长适应范围而危害其正常代谢进而影响 in African cat fish( Clarias gariepinus) from Nigeria Ogun River P450 , 1 ，体内 含量及抗氧化酶的活性暴露 周时各 ,J,,P ubc Heath，4( 2) : 15 8-165 lil ，8 Gravato C，Santos M A, 2002, Juvenile sea bass liv er P450，EROD 指标均无显著变化但在第 周时各指标均受到显 ) 1 induction，and erythrocytic genotoxic responses to PAH and PAH- , P450 100 mgkg 2 ?著抑制含量在 剂量水平下暴露 like compounds, J,, Ecotoxicology and Environmental Safety，51 ; GST、SOD CAT 周时表现出显著的诱导效应和 活 ( 2) : 11 5-127 3 ，性则均在第 周开始表现出显著的诱导效应且 Goksyr A，Husy A M, 1992, The cytochromPe450 1A1 response in ) 1 SOD mg?kg CAT 100 和 在 剂量下即出现诱导现 fish: application of immunodetection in environmental monitoring andEcology，20( 9) : 2296-2300( in Chinese)toxicological testing ,J,, Marine enVironmental Research，34: 147- , 2009, ( Eiseniafetida) P450 ，，，王磊宋玉芳张薇等蚯蚓细胞色素 ( a) ,J,, 150 及抗氧化酶系对环境浓度苯并芘的响应 农业环境科 28( 2) : 33 7-342Korashy H M，l-Kadi A O, 2005, Regulatory mechanisms modulating the ，学学报 Wang L，Song Y F，Zhang W，et a, 2009, nfuence of benzo( ap)y rene lIlexpression of cytochrome P 450 1A1 gene by heavy metals ,J,,To xicolog ical Sciences，8( 1) : 3 9-51 on cytochrome P450 andant ioxidant enzymesin earthworms(E isenia fetida) ,J,, Journal of Agro-Environment Science，28( 2) : 337-342 Luo Y，Zang Y，Zhong Y，et al, 1999, Toxicological study of twono vel ( in Chinese )pesticides on earthworm Ei senia foetida ,J,, Chemosphere，39 ( 13) : 2347-2356 Wong C K，Yeung H Y，Cheung R Y，et a, 2000. 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