牛磺酸对急性缺氧诱导的视网膜损伤防护效应及机制研究

牛磺酸对急性缺氧诱导的视网膜损伤防护效应及机制研究 第三军医大学研究生学位独创性声明 秉承学校严谨的校风和科研作风，本人申明所呈交的论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。 申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。 论文作者签名: :垡墨 日期:丝:～:兰,, 第三军医大学研究生学位论文版权使用授权书 本人完全了解第三军医大学有关保护知识产权的规定，即:研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属第三军医大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为第三军医大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分(保密内容除外)，可以采用影印、缩印或其他手段保存论文。 论文作者签名: 指导教师签名: 日 期: 蓥 第三军医大学博士学位论文 英文缩写一览表 (按英 中文名称,,, ,,,,,,, ,,, ,,,文字母排序)英文缩写 英文全称 ;,,,,,,,,,,, 琼脂糖凝胶电泳,, ,,,, ,,,, 碱基对,,, ,,,,,, ,,,,, ,,,,,,, 牛血清白蛋白,,,, ;,,,,,,,,,,,, ,,, 互补脱氧核糖核酸,,, ,’，,,,,,,,,,,,,,,,,,, ,、，,一二氨基联苯胺,,,, ,,,,,;;, ,, ,,,,,,, ,,,,,,,,, ,,,,,, ,,,,,;;,氏最低营养培养基,,,, ,,,,,,,, ,,,,,,,,, 二甲基亚砜,,, ,,,,,,,,,,,;,,,; ,;,, 脱氧核糖核苷酸,,,,, ,,,,,,,,,,,;,,,,, 脱氧核糖核酸酶,,,, ,,,,,,,,,,,;,,,,,, ,,,,,,,,,,,,, 三磷酸脱氧核苷,,, ,,,,,,,,,,,,,, 二硫苏糖醇,, ,,,,,,,, ,,,,,,, 溴化乙锭,,,, ,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,,;,,,; ,;,, 乙二胺四乙酸,,,, ,,,,,,,,,,,;,, ,,,(,,,,,,,— 乙二醇双(,,氨基乙醚)四乙酸 ,,,,,,,,,,,,),,,,,,;,,,; ,;,,,,, ,,,,,,,,,,,,,, 促红细胞生成素,,, ,,,, ;,,,,,,,, 流式细胞分析,,, ,,,,, ;,,, ,,,,, 胎牛血清,,,, ,,,,,,,,,,,,,; ,;,, ,(氨基丁酸,,, ,,,,,,,, ;,,, ,,,,, 神经节细胞层,,,, ,,,,, ,,,,,,,,,, ,;,,,; ,,,,,,, 神经胶质酸性蛋白,,,,, ,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,, , 谷氨酸转运蛋白,,,,,乙, ,,,;,,, ,,,,,,,,,,, , 葡萄糖转运蛋白,,,, ,,,,,,,,, 谷氨酸,, ,,,,,,,,, ,,,,,,,,,, 谷氨酰胺合成酶 第三军医大学博士学位论文,, ,,,,,,,,,,,,,,,,, 苏木精(伊红染色,，,(, ,,,,,,, ,,,,;,,,, ,,;,,, , 缺氧诱导因子, ?,,, ,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,, 辣根过氧化物酶，,, ，,,,, ,,;,,,, ,,,,, 内核层，,, ，,,,, ,,,,,,,,, ,,,,, 内网状层,, ,,,,—,,,,,,, 千道尔顿,,, ,,;,,,, ,,,,,,, ,,,,,, 乳酸脱氢酶,,, ,,,,,, ,,,,,’, ,,,,,, 改良的,,,,,’,培养基,,,, ,,,,,,,,, ,,,,,,;,,,; ,;,, 信使核糖核酸,,, ,,;,,;,,,,,, ,,,,,,,,,,, ,,,, 微量噻唑蓝分析,,, ,,,,,,,,,,,,,,, ,,,, ;,,,,,, 氯化硝基四氮唑兰,,, ,,,,,,,,,,,,,, ,,,,, 神经纤维层,,一,, ,,,,,,, ,一,, 非离子型去污剂,, ,,,,;,, ,,,,,,, 光密度,,, ,,,,, ,,;,,,, ,,,,, 外核层,,, ,,,,, ,,,,,,,,, ,,,,, 外网状层,,,, ,,,,,;,,,,,,,, ,,, ,,,;,,,,,,,,,,, 聚丙烯酰胺凝胶电泳,,, ,,,,,,,,, ,,,,,,,, ,,,,,, 磷酸盐缓冲液,,,, ,,,,,,,,, ,,,,,,,, ,,,,,,—,,,,,一,, ,,,吐温缓冲液 ,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,, ;,,,, ,,,;,,,, 聚合酶链式反应,,, ,,,,,,,,,,,,,,,,, 多聚甲醛,,, ,,,,,,,,,,;,,, 多聚赖氨酸,,,, ,,,,,, ,,,,,, ,,,,,,,, ,,,,,,,, 苯甲基磺酰氟,,,,, ,,,,,,;,,,,, ,,,酶，,,,,,, ,,,,,,, ,,,,,;,,,,,,, ,,,,,,,,,, ;,,,, 逆转录(聚合酶链式反应 ,,,;,,,,,,, ,,;;,,,,, ,,,,,,,,,,,,, 琥珀酸脱氢酶,,, ,,,,,, ,,,,;,, ,,,,,,, 十二烷基磺酸钠,,,(,,,,, ,,,,,, ,,,,;,, ,,,,,,, ,,,,,;,,,,,,,, 十二烷基磺酸钠一聚丙烯酰胺 ,,, ,,,;,,,,,,,,,,, 凝胶电泳 , 第三军医大学博士学位论文,,, ,,,,,,, 牛磺酸,,, ,,,,—,,,,,,?,,,,(,,,,,,) ,,,,,硼酸,,,,,缓冲液,,, ,,,,?,,,,,;,,,,,; ,;,, ,,,,,, ,,,,,,,, ”，,,,(盐酸缓冲液,,,,, ,，,，,，,’,,,,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,,, 四甲基乙二胺,’,,, ,,,,(,,,,,,,, ,,,,,,),,,,,—,,,,,,, 三羟甲基氨基甲烷 , 第三军医大学博士学位论文 ,,,,, ,, ,,,,,;,,,, ,,, ,,;,,,,,, ,, ,,,,,,, ,, ,;,,, ,,,,,,, ,,,,;,, ,,, ,,,,,, ,,,,,, ,,,,,,;, ，, ,,,, ,,,,,,,, ,,,, ,,,, , ,,, ,,,,,,，,,,, ,,,,,,,,,,;,, ,,,;,,,, ;,,,,,, ,, ,,,,,,, ,,,,,,,,; ,,,,,,,(,;,,,,, ,,,,,;,,, ,, ,,,,,,,，,,,, ,,,,,,,, ,,,,,,,, ,,, ,,,,,,,,,,,,,,,(,，),;;,, ,, ,,,,,,,,,,,,,(,,,, ,,,,,,,, ,,,,,,, ,,, ,,,,;,, ,, ,,,,,, ,,,;,,,,，,,, ,,,,,,,，,,,, ,,,,,,,,,, ,,,, ,,,,,,,,,，,,,,,, ,,;,,,,,,，;,,,, ,,,,,, ,,;,,,,,,，,,,,,,,, ,,,,,,, ,,,,,,,,,,(,,,,,,, ,,,,,, ,, ,,,, ,,,,,,,, ,, ;,,,,, ,,,,—,,,,,,,,,,,,,,,,,,,(,,,)(,,, ,,,,,,,, ,, ,,, ,,, ,,,,,,,, ,,, ,,,,,,,,,,,，,,,, ,, ,,,;,,,,,;,, ,,,,,, ,,,;,,,,,, ,,,,,,,,,;, ,, ,,,, ,, ,,,,,，,,,, ,, ,,,,,,,,, ,,, ,,, ,,;,,,,,,;, ,, ,,,,,( ,,,,,, ,,,,,,,,, ,, ,,,,, ,,,,, ,, ,,,,,, ,,,,,, ,, ,,,,, ;,,,,,,,,，,,, ,,,,,, ?,,,,,,,,, ,, ,,,,, ,,,,, ,, ,,,,,,,,, ,, ,,,,,,, ,,,,,, ;,,,(,,,,,, ;,,,, ,,, ,,, ,,,,;,,,,,,,,, ;,,,, ,, ,,,,,,，,,, ,,,,, ,,;,,, ,,;,,, ,, ,,,,, ,,;,,,, ,,,,,(，,,)，,,, ,,, ,,,,,,,,,,,,,, ,,,, ,,,,,,,, ,,,,,,,, ,,,,,,,, ,, ,,,,,,,,，,, ,,,;,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,, ,,—,,,,,, ,,,,,,,, ,,, ,,,,,,(,,,,,,, ,,,,,,,,,, ,,, ,,,,,,,,,,, ,,,;,,,,，,,,,,, ;,,,,,;, ,, ,,,,,, ,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,(,,,,,,, ,,,,;,, ,,,,,, ;,,,, ,,,;,,,,,, ,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,, ,,,,,,,(,,,,,,, ,,,,;,, ,,,,,,,,,;,,, ,, ,,,,,,, ,, ,,,,,, ,,,,, ,,,,,(,,, ;,,,,,,,,, ,,;,,,,,,, ,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,, ,,,,;,, ,,,,,,, ,,,,,,,，,,,,;,,,,, ,,,,,,,,,, ,,,,,,,, ;,,,,，,,,,,,,,,, ,,,,, ,, ,,,,,,, ,,,,,,,, ;,,, ,,,,,,,,, ,, ,,,,,(,,,,,,,,,, ,,,,,, ,,,,,,,,,,,, ,, ,,,;,,,(,,,,,, ;,,,, ,,, ,,, ,,,,,,, ,, ,,,,,,, ,,,,,,,,,(,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,, ，(,,,,,),, ,,,,,,, ;,,,, ,,,,,,,,, ,,,,,,,,, ,,,,,,,,, ,, ,,,,,,, ,, ;,,,,,,,,,,,，,,,, ;,,,,,, ,,,, ,, ,,,,,,,,, ,, ,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,(,,)，,,,;,,,,,,,,,, ;,;,, ,, ,,,,,,(,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,,, ,,,,,,, ,, ,，,,,,,,,(,, ,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,,,,, ,, ;,,,,(,，,, ,,,(,,,,,,, ,,,,;,, ,,,, ;,,;,,,,,,,,, ,, ,，,,,,,,, ,,,,,,;,,,,，,,,;, ,,,,,,, ,,,,,,,,, ,,,,,,(,,,,,,,;, ,, ,,;,,,,,, ,，,,,,,,, ,, ,,,,,,,,,,;,,,,,,, ,，;,,,,,, ,,,,(,(,,, ,,,,, ,, ,,,,,,,,,,,,,,;,, ,,;,,,,,,,;,,, , ,,, ,,,,,,, ,,,,,,,,(,,,,,,, ,,,,,,,,,,,,, ,, ,,,,,,,,, ,,,,,, ,,, ,,,,,,,,, ,, ,,,,,, ;,,, ,, ,,,,,,, ,,,,,,,,(,,,,,,,,,, ,, ,,,,,,, ,, ,, ,,,,,,,,, ,,,,,,, ,, ,,,,,,,(,,,,,;,, ,,,,,,, , 第三军医大学博士学位论文 ,,,,;,,,, ,,;,,, ,(,，,一,)，,,, ,,,, ,,,,,,,,,, ,,;,,, ,, ,,,,,,, ,,,,,,,,,, ,, ,,,,;,,,, ,,, ,,,,,,, ,,,;,,,,(,, ,,,,,;, ;,,, ,;,,,,,,,,，,，,一, ,;,,,,,, ,,,,, ,,,,,,,,,,, ,,,罅 ,,,,,,,,,,, ,,, ,,,,,,,,,,(,,,;,,, ,,,,,,,,,,, ，(,,,,,，),, ,,,,,,, ,,,,,, ;,,, ,, ,,, ,, ,,, ,,,,,,,,,, ,,,,,(,,,,,,, ,，,一, ,, ,,,,,,, ,,,,,,,,,, ,,,,;,,,,,, ,,,,,, ,,,,,,,,, ,, ,,,,, ,,,,,,,( ,,, ,, ,,,,,, ,,,,, ,;,,, ,,, ;,,,,,,,,,, ,,,,,,,,, ,,,,, ,;,,, ,,,,,,, ,,, ,,,,, ,,,,,,,, ,,,, ,,,,, ,,,,,, ,, , ,,,(,,,,,,, ,, ,,,,,,,,,, ,, ,, ,,,,,, ,,,,,,,,,,, ,, , ,,, ,,,, ,,, ,,,,,;,,,,, ,,,,,,, ,,,,,,,,,(,,,,,,, ,, ,,, ,,,,,,,,;,,,,,, ,,,,,, ,, ,,,,,, ,,, ,, ,,,,, ,, ,;, ,, ,, ,,,,,,,,,,，,,,,,,,, ,,,,,,,,,,, ,,,,, ,,, ,,,,,,,,,,,,,(,,,,,,, ,,,,;,,,;, ,, ,,,,,, ,,,,, ,, ,,,,,,,, ,,,;,,,,,,,,,,,,, ,,, ,,;,,,,,,,;,, ,, ,,,,,,, ,,,,,,, ,,,,,,,,,, ,, ,,,,; ,,,,,(,,,,,,, ,,,,,,,,,,, ,,,;,,,, ,,;, ,,,,,,, ,,,,,, ,,,,,,, ,,,,,,,,,,,,(，,;,,,,,, ,,,,,,, ,,,,,,,,, ,, ,,,,,,,,, ,,,,, ,,, ;,,,, ,,,,,,, ,,,,;,,,;, ,, ,,,,,,，,,,;, ,, ,,,, ,,,,, ,, ,,,,,, ,,,,;,,,, ,, ,,,;,,,,,, ;,,,,,,(,,,, ,,,,,,;,,, ,,,, ,,,,;,,,, ,,,,,,, ;,,,, ,,,,,;, ,,,;,,,,,, ,,,,,,(,,,,,,, ,,,,,,;, ,,,,;,,,, ,,,,,,, ;,,,, ,,,,,,, ,,,,,,,, ,,,,,, ,,,,,, ,, ,,,,,,,; ,,,,,,,,,,,(,,)(,,,,,,, ,,,,,,, ;,, ,,,,,;, ,,,,,,, ,,,,;,, ,,,,,, ,,,,,, ,, ,,,, ,,,,,,,, ,, ,,,,,,, ,,, ,, ,,,,,, ,,,,,,,，,,, ,,,,,,, ,, ,,, ,,,,,,,,,,,, ,,,,,,, ,,,, ,,, ,,, ,，,一, ,,, ,,,,( ,,,,, ,, ,,, ,,,,,,,, ,,,,,，,, ,,,,,,, ,,,,,,, ,,? 猓?,, ,,,,;,,,, ,,,,,;,,,, ,,,,, ,, ,,,,,, ,,,,,, ,,,,;,, ,, ,,,,,,,(,,, ,,,,,,, ,, ,,,, ,,,,, ,,, ,, ,,,,,,,,, ,,,,,,, ,,,,,,, ;,,,, ,,,,,;, ,,,,,, ,,,, ,,,,,,, ,,,,;,, ,,, ,,,,,, ,,,,,, ,,, ,,, ,,,,;,,,,, ,,,,;,,,, ,,;,,,,,,(, ,,, ,,,,, ,,, ,,,, ,, ,,,,,,,, , ,,, ,,,,,, ,, , ,,, ,,,,,, ,,,, ,,,,,,,, ,, ,,,, ,,, ,,, ,,,, ,, ,,,,,,,,,,,, ;,,,,,,，,,,, ,,,, ,,,,,,, ,,,, ,(,,,,,,,,, ,,,,,, ,,, , ,,,,(,, ,,,,, ,,,,,，,,, ,,,,,,,,, ;,,, ,, ,,,,，,,, ,, ,,,;, ,, ,,,,,, ,,,,,, ,,,, ,,,,,, ;,,,,,, ,, ,,, ,,,,,,, ,,, ;,,,,，,,, ,,,,, ,, ,, ,,,,,,,, ,,,,,,, ,,,,,, ;,,,,( ，,,,,,,,,,,;,,,,,,,,，,,,,,,,,,,,;,,,,,,,,，,,,,,;,,,;,,,,,,,,，,,,,, ,;,, ,,,,,,,,， ,,,,, ;,,,,;,, ,,,,,,,;,, ,,,,,，,,,, ;,,,,,,,,，,,,,,, ,,, ,,,,,,, ,,,,,,,, ,,,,,, ,,,, ,,,, ,, ,,,,, ,,, ,,,,;,,,,, ,,, ,,,;,,,,,, ,,,,,, ,,,,;,, ,, ,;,,, ;,,,,,,,,, ,,,,,,,， ,,,, ,, ,,, ,,,,;,,,, ,,,,;,, ,, ,,,,,,,(,, ,,,, ,,,,,，,,, ,,,;,,,, ,, ,,,,,,, ;,,,, ,,, ,,,,,,, ,, ,,,, ,, ,,, ,,,,;,,,,, ,,,,;,,,, ,,;,,,,,, ,, ,,,,,,,, ;,,,,,,;, ,,,,,,, ,,, ,,,,,,, ,,,,,,,,,, ,,,,,,, ,,,, ,,,,,, ,,,,,,,( 第三军医大学博士学位论文 ’， ,, ,,,, ,,,,,,, ,,, ;,,;,,,,,,, ,,,, ,,,,,,,,,, ,, ,,,,,,,: ,(,,,,,, ,,,,, ,,,,, ,,, ,,,,,,, ,, ,,,,,,, ,,,,,,,,, , ,,, ,,,,,, ,, , ,,, ,,,,,, ,,,, ,,,,,,,,(,,,,, ,, ,,,,, ,,,,,,,,, ,,,,,(，,,),,, ,,,,,,,, ;,,, ,,,,,(,,,),,,, ,,,,,,,,，,,,,,, ;,,,, ,;;,,,,, ,,,,,,,,,,,, ;,,,,,, ,, ;,,,,,,,,,,, ;,,,,, ,,,, ,, ,,,,,,,,(，, ,,,, ,,,,,,, ,,,, ,(,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,, ,,,,,, ,,, ,,, ,,,,(,,, ,,,,,, ,, ,,,,,,,, ,,, ,,,,,, ,, ,,,,,,,;,,,,,,;,,,, ,,,, ,,,,,,, ,,,,, ,,,,，,,,,;,,,,, ,,,,,,, ;,,,, ,,,,,;, ,,, ,,,,, ,,,,,, ,, ,,,,,, ,,,,;,, ,, ,,,,,,, ,,,,;,,,,,,(,,,,,,, ;,,,, ,,,,,,,, ,, ，,, ,, ,,,,,,, ,,,,,, ,, ,,,,,,,,,,，,,,,,,, ,,,,,,,, ,,, ,,,,,,,,,( ,(，, ,,,,,,, ;,,,,,, ,, ,,, ,,,,,,, ,,, ;,,,,，,,,,,,, ,,, ,,,,, ;,,,, ;,,,,,,, ,,,,,,,, ,,,,(,,,,,,, ,,,, ,,,, ,,,,,,,,, ,, ,,,,,,, ,, ,,,,,(,,,,,,, ,,,,,, ,,,,,,,, ,,,, ,,,,,,,,, ,,,;,,,,, ,,,,,, ,,,,,,(,,,,, ,(, ,,,,,(，,,,,,, ,,, ,, ,,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,，,,, ,,,, ,,,, ,, ,,(,,(,,(,,,,, ,,(,,(,,, ,,,,;,, ,,,,, ,,,,,, ,,,,,,, ,,,, ,,,,,,,;,,,,,,, , ,,,,，,,,,,,,,,, ,,,, ,,,,,,, ,,,,,,, ,,,,,,,, ,,,, ,, ,,,, ,,,,,,, ,,,,,,,,,, ;,,,, ,, ,,,,,,,( ,(,,,,,,, ,,;,,,,,, ,,,,,,,,,,,,, ,, ,,,,,,, ;,,,, ,, ,, ,, ,,,,,，,,, ,,,,,,, ,,,,,,,,,,, ;,,,, ,,,,, ,,,,, ,, ,,,, , ,,, ,,,, ,,,,,(,,,,, ,, ,,,,, ,, ,,,,,,,，,,,;,,,,;,,,,,,,, ,, ,,,,,, ;,,,, ,,;,,,,,, ,,,,,,,，,,,;, ;,,,, ,,, ,, ,,,,,,,, ,,,,,,, ,,,,,,,,, ,,, ,,,,(,,,,,,, ;,,,,, ,,,, ,,, ,,,,,,, ,, ,,,;,,,; ,,,,,,, ,, ,,,,,,, ;,,, ,,,,,,,,,,,,,,, ,;,, ,,,,,,,(,,,,),,, ,,,,,,,, ,,;,,,,,,，,,;,,,,?;,,,,,,,,,; ,,,,, ,, ,,,,,,,;,,,,,,(,, ,,,, ,,,,,, ,(,,,,,,,,, ,,, ,, ,,,,, ,,,,,, ,(,,,(,,, ,,, ,,,, ,,,,,,,;,,,, ,,,,, ,,,,,,, ,,,,;,, ,,;,,,,,,, ,, ,,,, ,,, ,,,,,,,, ,,,, ,,, ,,,,,,,(,,;,,,,—;,,,,,,,,,; ,,,,, ,, ,,,,, ,,;,,,,,, ,,,,, ,,,,,,, ,,,, ,(,,,，,,, ,,, ,,,,,,,,,,,(,,,,, ;,,,,,, ,,,,,, ,,,,,,, ;,,,, ,,,,,,;,,,, ;,,,,, ,, ,,,,,,, ;,,,, ,, ,,,,,,,,, ,,,,,,,,, ,, ,,,,,,,( ,(,,,,,,,, ,,,,, ,, ,,;;,,,,, ,,,,,,,,,,,,,(,,,),,, ,,;,,,, ,,,,,,,,,,,,,(,,,),,,,,,,,,,,,,;,,,,,,,, ,,,,,,, ,,,, ,,,,,, ,, ,,,,, ,,,,,,,,, ,,,,,(,,,)，，,, ,,, ,,,(,,, , ;,,,,,,,, ,, ,,, ,,, ,,, ,,;,,,,,, ,,,,, ,,,,,,, ,,, ,,, ,,,,，,,;,,,,,,, ,,,,,,,,,,,,,,, ;,,,,,,,,, ,, ,,,,,,,,, ,,,,,,,, ,,, ,,,, ,, ,,,,,,,，,,,,,,, ,,—,,,,,,,,, ,,,,;,,,,,,,, ,, ,, ,,,,,,, ,,,,,，,,, ,,,, ,,,,, ,,, ,, ,, ;,,,,,,(,,, ,,,,,,, ,,,,;,,,, ,,,,,,,,,,, ;,,,, ,,,,,;, ;,,,,,,,,,,, ,,,;,,,, ,,, ,,,,,,, ,,,,,, ,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,, ,,;,,,,,,, ,, ,,,,,,; ,,,,,,,,,, ,,, ,,,,,,,,,; ,,,,,,,,,,( ,(,,,,,,, ,,,,,, ,, ;,,,,,, ,, ,,,,, ,;,, ,,,,,,,,,,, ,,, ,,,,,,,,, ;,,;,,,,,,,,, , 第三军医大学博士学位论文,,,,,, ,, ,,,,,(,,;,,,, , ,,,, ,,,,,,,,,,, ,,,,,,,, ,,, ,,,;,,, ,,;,,,,,, ,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,,,,(,,,,,,,, ,,,,,, ,,,,,,, ,, ，,, ,,, ,,, ,;;,,,,,, ,, ,,,,,,,,,,,;,,,,,,,,,,,,,,,(,,,,,,, ,,,,,,,,, ,,,,, ,,;,,,,,,, ,,,,,,,;,,,,,(,,,,,,, ,,;,,,,,, ,,, ,,,,,,,,, ,,,,,,,,,, ,,,,,, ,,, ,,,,,,,,, ,,,,,,, ,,,,,,,, ,,, ,,,,,,,,,, ,, ,,,,,，,, ,,, ,,,,(,,,,,(,,,,,,,,,, ,,,,,,,, ,, ,,,,,, ;,,,, ,,;,,,,,, ,, ,,,,,,, ,, ,,,,，,(,,,，,,,,,, ,, ,,,,,, ,,,,,,, ,,;,,,,,, ,, ,, , ,,,,(,,,,,,,,, ,,,,,,(,,, ,,,,;,, ,,,,;,,,, ,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,, ,,,,,,,, ,,,,,,,,, ,, ,,,,,, ;,,,,，,,,,,,, ;,,,, ,,—,,,,,,,, ;,,,,,,,,,,,,,;,,, ,, ,,,,,,,, ;,,,,,,;, ,,,,,,,( ,(，, ,,,, ,,, ,, ,,,,, ,,,,,,, ;,,,,,,,, ,,,, ,，,?, ,,,,,;,,,,,, ,,,,,,,,,, ,, ,,,,,,,(,;,,, ,,,,,,, ,,,,;,, ,,,, ,,,,,,,,,, ,, ,，,一, , ,,, ,，,一, ,, ,,,,(,，,一, , ,,,,,,, ,,,,,,, ,,,,,, ,,,, ,, ,, ,,,, ,,,,, ？,,;,,,，,,, ,,,,,,,, ,,,,, ,, ,，,一, , ,, ,, ,,;,,,,, ;,,,, ,, ，,, ,,, ,,,(,,,,,,,, ,,,,, ,, ,，,一,?,, ，,, ,, , ,,,,, ,, ,,,,,,, ,,,,,,, ,,,,(,,,, ,, ;,,,,,,，,,,,,,, ,,,,,,,, ,,, ,,,,, ;,,,,,,，,,,,,;,,, ,,, ,,,,, ,, ,,(,,(, ,,, ,,,,, ,, ,，,一, ,, ,,,, ,,,, ,,;,,,,,, ,, ,,,,,,,，,,,, ,, ,,,, ,,,,,,,,;, ,,,,,,,,,, ,, , , ,,,,, ,, ,,,,,,,，,,,, ;,,,,,,,,, ,,,, ,,,,, ,,,,,,,,,, ,, ,,,,,,, ,, ,,,,,,(,,,,,, ,,,, ,,, ,,,,,,, ,,,,,, ,,;,,,,,, ,, ,,,,,,, ,,,,,, ,, ,,,,,,,，,,, ,,,,?,, ,,,,,,, ,,,,, ,, ,,,,,,,(,,,,,,, ,,,,,,,,,, ,,,,,, ,, ,,,,,,, ,, ,,,,, ,,,,,, ,, ,,,,,,,(,,,,, ,,,,,,, ,,,,,,,, ,,,,,,, ,,,,,,,, ,,, ,,,,,,, ,, ,,,;,,, ,,,,,,,,, ,, ,,,,,, ;,,,,,,,,,,, ,;,,,, ,,,,,,,, ,,, ,,,,,,,,,, ,,,,, ,, ,，,一, ,,,,,,,( ，, ,,,,,，,, ;,,,, ;,,,,,, ,,,,,,,,,, ,,,, ,,,,,,, ,, ,,;,,,,,,,;,,, ,, ,,,,,, ,, ;,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,, ,,, ,,,,,,,,,, ,, ,,,,,，,, ,,, ,,,,(, ,, ,,,,,, ;,,,,，,, ,,, ,,,,,,,,, ,, ;,,,, ,,,,,;,,,,, ,,,,,,, ,,,,,,, ,,,,,,, ,,—,,,,,,;,,,, ,,;,,, ,,,,,, ,，,一, ,,, ,,,,,, ,,,,,, ,,,,,,,;,,,; ,,;,,,,,, ,, ,,,,,,,,?铮?,,,,,,,,，,,,, ,,,,,,,，,,,;,,,,,,;,,,, ,,,,,,, ,,,,;,, ,,,,,, ,,,,,, ,, ,,,;,,,, ,,, ,,,,;,,,,(,,,,, ,,,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,,, ,,,,,,,,, ,,, ,,,,,,, ;,,,,;,, ,,,,,;,,,,,( ,,, ,,,,,:,,,,—,,,,,,,,;,,,,,,,;,,,;,,,,,,;,,,,,, ,,,,,,,,,;,,,,,,,;,,,,,,,,,; ,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,, ，(,,,,,);,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,(,,);,,,,,,,, ,,;,,,,,,, ,，;,,,,,, ,(,(,,,,(,);,,,,,,, ,,,,;,,,, ,,;,,, ，(,，,一,); ,,,;,,, ,,,,,,,,,,, ，(,,,,,,);,,,,,, ;,,,;,,,,, ,,,,,,,,,, ,;,,,; ,,,,,,,(,,,,);,,,,,,,,;,,,,, , 第三军医大学博士学位论文 牛磺酸对急性缺氧诱导的视网膜损伤防护效应 及机制研究 摘 要 高原是指海拔超过, ,,,米的地区，在这样的高度，大气压和氧分压低，即环境性缺氧，对进驻高原的人可造成供氧不足，为了适应此缺氧环境，人体器官的生理功能会发生改变。急进高原时有,,,,,,,的人会出现不同程度的高原反应，严重情况下甚至诱发高山病(,,,,,,,, ,,,,,,,，,，)。对视觉的影响主要表现在:暗适应时间延长，视力下降，色觉减退，甚至出现视网膜出血，引起高原视网膜病(,,,,(,,,,,,,,,,,,,,,,,,,，,,,)。,,,最初表现为血管扩张、 出血，严重的导致视功能障碍、失明，有的在回到平原后仍不能恢复正常。 视网膜外层由毛细血管供氧，内层的氧供给需要,,,,,,,细胞参与。,,,,,,,细胞是视网膜中主要的胶质细胞，其胞核位于视网膜内核层(,,,,, ,,;,,,, ,,,,,，，,,)，突起则自外界膜纵向伸展，穿过整个视网膜至内界膜，在内外界膜处构成血一视网膜屏障。因此，,,,,,,,细胞在视网膜物质、能量供给和内环境稳定中担任重要角色。缺氧可导致,,,,,,,细胞功能全面下降，引起内环境失稳。一方面，缺氧可引起视网膜内层神经元兴奋毒性增强，兴奋性谷氨酸的持续作用影响视网膜神经细胞特别是节细胞功能，最终触发节细胞的凋亡或死亡，阻断视觉信号传递。,,,,,,,细胞是视网膜谷氨酸浓度的调节单元，通过胞膜上的谷氨酸转运蛋白，主要是谷氨酸转运蛋白,(,,,,,,,,,,,,,,,,,,,, ,，,,,,,)摄取突触间过多的谷氨酸，由谷氨酰胺合成酶(,,,,,,,,,,,,,,,,,,,，,,)转变为无兴奋性的谷氨酰胺。谷氨酸的转运是电压及,，依赖性的，谷氨酸摄入细胞的同时,，向胞外转运。缺氧时胞外,，浓度升高，谷氨酸的摄入受到抑制。,,,,,,,细胞可通过内向整流钾通道(,,,,,,,, ,,;,,,,,,, ,，;,,,,,,，,,,),,,,(,清除胞外多余的,十，从而减弱高,，浓度对谷氨酸摄入的抑制。但急性缺氧时,,,,,,,细胞的谷氨酸摄取和代谢路径发生了怎样的变化，目前尚缺乏深入研究。另一方面，当刺激到来时，组织具有一定的自我防御能力，促进机体快速建立缺氧适应是应对缺氧的重要途径，通过增强缺氧诱导因子,(,,,,,,, ,,,,;,,,, ,,;,,, ,，,，,(,)表达能有效改善缺氧反应。,，,一,是缺氧耐受因子，能激活多个基因的转录，增加供氧、提高代谢，反映出机体对缺氧的适应调节能力。存在于视网膜,,,,,,,细胞中的葡萄糖转运蛋白 第三军医大学博士学位论文,(,,,;,,, ,,,,,,,,,,, ,，,,,,,,)为其下游调控基因之一。,，,,,是否参与了视网膜缺氧适应调节目前尚无报道。 牛磺酸(,(氨基乙磺酸，,,,,,,,，,,,)属于含硫氨基酸，为人体条件必需氨基酸，不参与蛋白质合成，在体内游离存在或在一些简单肽类中存在。牛磺酸是视网膜中含量最丰富的氨基酸之一，具有抗氧化、膜稳定、调节渗透压等多种功能。婴儿缺乏牛磺酸导致视网膜电图异常，眼底可见视网膜色素上皮出现轻微颗粒。敲除牛磺酸转运蛋白基因的老鼠出现了严重的视网膜变性。在应激状态下牛磺酸在突触间的释放增加也可能引起视网膜细胞中的牛磺酸缺乏，当视网膜细胞中的牛磺酸降低时，视网膜结构和功能发生变化。以往研究发现牛磺酸对心肌缺氧具有明显的保护作用。另有研究显示，牛磺酸对糖尿病视网膜病(,,,,,,,; ,,,,,,,,,,,，,,)的谷氨酸重摄系统有促进作用。牛磺酸是否也能在高原急性缺氧下通过类似作用防护视网膜损伤，国内外尚无研究。 基于以上分析，推测，牛磺酸可能是一种理想的视觉缺氧损伤防护剂。本研究体内实验以,,大鼠为研究对象，,(,,牛磺酸经口摄入进行营养干预，利用低压氧舱模拟, ,,,米和, ,,,米高原,,,天急性缺氧条件，体外实验分别以原代混养视网膜细胞和纯化视网膜,,,,,,细胞制备细胞缺氧模型。通过免疫组织化学、酶组织化学、氨基酸分析、免疫细胞化学、流式细胞技术、激光共聚焦分析技术、,,,,,,、,,,,,,, ,,,,,,,等实验技术方法，首次在体内观察急性持续性缺氧诱导的视网膜 结构和功能损伤及牛磺酸的防护效应，并在体外进一步研究缺氧诱导的视网膜,,,,,,功能改变及牛磺酸的防护作用，从,,,,,,细胞谷氨酸清除路径和缺氧适应路径两个方面深入探讨牛磺酸对视网膜缺氧损伤防护作用可能的分子机制。 主要结果和结论如下: ,(模拟, ,,,米和, ,,,米高原缺氧主要对视网膜内层细胞造成影响。视网膜内网状层(,,,,, ,,,,,,,,, ,,,,,，，,,)、节细胞层(,,,,,,,, ;,,, ,,,,,，,,,)出现肿胀，超微结构显示，,,,,,,细胞出现线粒体脱嵴、肿胀变性。含,(,,牛磺酸的营养饲料预先干预一周，大鼠视网膜内层肿胀程度和超微结构损伤明显减轻。,,,,,,细胞在中度缺氧早期向，,,移行，有利于保护内层神经细胞，牛磺酸能促进,,,,,,细胞的移行，增强其保护作用。 ,(在原代混养的,,大鼠视网膜细胞中，神经细胞和胶质细胞共生良好，神经细胞对缺氧更敏感，缺氧后其存活率下降到,,，在培养介质中预先加入,(, ,,,,,,、, ,,,,,,和,, ,,,,,,的牛磺酸可使其存活率上升到,,(,,、,,(,,和,,(,,，, ,,,,,,牛磺酸 第三军医大学博士学位论文对提高存活率效果最显著。提示牛磺酸促进体外缺氧培养的神经细胞存活。 ,(缺氧降低,,,,,,,细胞,,,增殖活性，牛磺酸促进阻滞于,,,,,期的细胞进入,期和,,,期。完全缺氧,,,后,,,,,,细胞活性全面下降，各剂量牛磺酸不能逆转这一趋势。缺氧引起,,,,,,,细胞特征蛋白神经纤维酸性蛋，刍(,,,,, ,,,,,,,,,, ,;,, ,,,,,,,，,,,,、和波形蛋白(,,,,,,,,),,,,和蛋白表达增强，,,,,,表达核质比降低。体内实验,(,,牛磺酸的剂量，体外实验,(, ,,,,,,、, ,,,,,,和,, ,,,,,,的牛磺酸浓度减弱缺氧引起的,,,,和,,,,,,,,,,,,和蛋白的强表达。,一,,,表达核质比在,(, ,,,,,,、, ,,,,,,和,, ,,,,,,的牛磺酸处理后增强。提示缺氧导致的,,,,,,,细胞功能改变可被牛磺酸减轻或阻止。 ,(琥珀酸脱氢酶(,,;;,,,,, ,,,,,,,,,,,,,，,,,)和乳酸脱氢酶(,,;,,,,,,,,,,,,,,,,,，,,,)的酶组织化学染色阳性部位主要在视网膜外网状层(,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,，,,,)、，,,和,,,，急性缺氧造成,,,、,,,活性在,,,天显著下降，其下降程度随模拟高度增加和缺氧时间延长而加剧，牛磺酸能明显缓解缺氧引起的,,,、,,,活性下降，但不能使酶活性恢复到正常水平。表明牛磺酸能够通过保护细胞线粒体，抑制缺氧引起的有氧代谢酶和无氧代谢酶活性...