实验 血药法测定扑热息痛片的生物利用度[1][试题]

实验 血药法测定扑热息痛片的生物利用度[1][试] 实验二 血药法测定对乙酰氨基酚片的生物利用度 一、实 验 目 的: 1 掌握血药法测定固体口服制剂生物利用度的原理及方法。 2 掌握药动学参数的求算。 3 熟悉生物利用度在药物评价中的意义。 4 了解血清生物样品的处理方法。 二 、仪 器: 1(仪器: 具塞离心管10ml 3支;20ml 16支; 刻度吸管1ml 1支;5ml 3支;10ml 1支; 滴管2,3支; 玻璃漏斗3,4cm直径8个;5ml塑料离心管8支; 紫外,可见分光光度计 其他:滤纸、试管架、刀片、塑料夹、酒精棉球、脱脂棉、注射器、注射针头、兔盒等物件。 2(试药: ?0.12N氢氧化钡溶液:取纯氢氧化钡19克，加新鲜煮沸放冷的蒸馏水溶解并稀 释至1000 ml，静置过夜，过滤即得。 ?2%硫酸锌溶液:取分析纯硫酸锌20克，加蒸馏水溶解并稀释至1000ml即得。 三 、实验内容: 1( 家兔空白血的采集: 取体重3kg左右家兔一只，心脏取血约30ml，于10ml具塞离心管中，37?水浴中保温1小时，以5000转/分的转速离心10 min，取空白血清供曲线制备用。 2( 标准曲线的制备: 精密称取扑热息痛对照品50mg，置100ml容量瓶中，以蒸馏水溶解，并添加至刻度摇匀，精密吸取10ml于50ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度摇匀即成100µg/ml的标准溶液，分别吸取1中“标准液取量”于20ml具塞试管中，分别加定量蒸馏水使成10ml，然后各加上述血清1ml混匀，再各加0.12N氢氧化钡4.5ml，混匀，放置2分钟，再分别加入2%硫酸锌溶液4.5ml，混匀，即现出明显乳状浑浊，用双层滤纸过滤，去初滤液，收集续滤液于10~15ml干燥具塞试管中，以1号管溶液作空白对照，于245nm处测定吸收度(A)，结果于表1。 3(家兔体内血药浓度的测定: ?血样品的采集: 取体重3kg的健康家兔一只，实验前二天下午禁食，实验当日晨耳静脉取血4ml，作为空白，然后即口服给予扑热息痛片，剂量为500mg/只，在给药后0.25、.50、1、2、3、4、5小时耳静脉采血4ml，供测定血药浓度用，喂药4小时后可以喂食，采血时间于表2。 ?血药浓度测定: 将采取的血样按前空白的处理方法处理后，精密吸取血清1 ml，加蒸馏水10ml，余下按标准曲线制备中“……再各加0.12N氢氧化钡溶液4.5ml”起进行操作，测得值记于表2。 表1 标准曲线测定结果 管 号 1 2 3 4 5 6 7 8 标准液取量 (ml) 0 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 2.4 2.8 血药浓度C (μg/ml) 0 40 80 120 160 200 240 280 HO (ml) 10 9.6 9.2 8.8 8.4 8.0 7.6 7.2 2 吸收度A 表2 血药浓度测定结果 兔重: 给药量: 给药时间: 编 号 0 1 2 3 4 5 6 7 采血时间 时间t (h) 空白 0.25 0.5 1 2 3 4 5 A值 血药浓度C (μg/ml) lgC 四、实验结果及数据处理: 1(标准曲线的回归分析及绘制: 以表1中吸收度A对标准曲线中血药浓度C直线回归，求得直线回归方程 A = a + bC，并计算相关系数r 。 以A为纵坐标，C为横坐标绘制标准曲线。测得样品A值，代入回归方程，计算出C值 A,a C, b 2(药时曲线的绘制: 表2中的实验数据，以浓度C对时间t作图，即得药物浓度经时变化曲线。 3( 消除速率常数k的求算:文献载扑热息痛的体内过程系一室模型，血管外给药一室模型动力学方程的解为: ,kt,ktaC,A(e,e) ? kFXa0A,其中 ，，Vk,ka ,ktae假设k>k，当t充分大时，?式中首先趋向于零，而可忽略，故?式可改写为:a ,kt C,A, ?e ?式两端取对数: klgC,,t，lgA ?2.303 用药时曲线中尾部近似于直线上的3点，即尾部数据，代入式?作直线回归，求出系数: =,,,,,, b = ,,,,,, a -1则:k =,2.303 b A = Lg a 4( 半衰期t的计算: 1/2 t= 0.693/k 1/2 5( 药时曲线下面积AUC的计算: ?0? 将表2中时间t和浓度C代入下式即可求出AUC?0? C1nAUCCCtt,[(，)(,)]，,0,,(,1)(,1)aaaa k2 6(扑热息痛片相对生物利用度计算: 若已知扑热息痛片某一标准制剂(如半合成脂肪酸脂)的AUC=1093(μg)h)?0?-1ml)，则用下式可计算出扑热息痛片的相对生物利用度: AUC0,,样品F,，100%rel AUC0,,标准 五 思考题: 1 血药法在生物利用度研究中的意义。 2 本实验血清样品处理的特点。