正交实验数据的极差分析与多元线性回归对比对大黄提取工艺优化影响

正交实验数据的极差分析与多元线性回归对比对大黄提取工艺优化影响 本文用正交实验设计优选出大黄的最佳提取工艺,并对实验数据进行了极差方差计算,经 直观分析以及用多元线性回归分析,计算机程序计算处理两种方法所优选工艺条件的比较,为 合理筛选大黄的提取工艺提供科学依据。 1 仪器与试药 ,, 2201型紫外分光光度计(日本岛津公司),均匀设计实验数据 处理软件,由华西医科大学李瑞雪教授提供。大黄购自成都荷花池药材市场,并经 药学院生药教研室鉴定。1,8 二羟基蒽醌(供含量测定用,批号0829 9702),由中国 药品生物制品检定所提供,所用试剂均为分析纯。 2 2 方法与结果2.1 样品的提取 取50,药材按1、表2选择的因素和水平 进行回流提取,取滤液作为供试品溶液。2.2 游离蒽醌、总蒽醌的测定[1, 2]2.2.1 曲线的制备:精密称取经105?,干燥至恒重的1,8 二羟基蒽醌对 照品12.5,,,置25,,量瓶中,加乙醚适量,振摇使溶解,并稀释至刻度,摇匀,得 对照品储备液。精密吸取对照品储备液5,,,加乙醚至50,,制成对照品溶液。 分别精密吸取1,2,3,4,5,,置10,,量瓶中,水浴挥去乙醚,残渣加0.5%醋酸镁 甲醇溶液至刻度,摇匀。以0.5%醋酸镁 甲醇溶液为空白对照,在400,800,, 波长处进行扫描,得出510,,为检测波长。测定吸收度,得回归方程为,=0.045 ,-3.765×10-3,,=0.9999。2.2.2 供试品溶液的制备游离蒽醌含量测定的样品 制备 精密吸取供试品4.0,,,置10,,具塞刻度试管中,水浴挥尽乙醇,加纯 化水至2,,,摇匀,用乙醚提取4次,每次10,,。醚液合并,分次转移至50,, 量瓶中,加乙醚至刻度,摇匀。精密吸取5.0,,于10,,量瓶中,水浴挥干乙醚液, 残渣加0.5%醋酸镁 甲醇溶液至刻度,摇匀。备用。总蒽醌含量测定的样品制备 精密吸取供试品0.5,,置10,,具塞刻度试管中,水浴挥尽乙醇,加纯化水至1 ,,摇匀,加40%三氯化铁溶液0.5,,,摇匀,于沸水浴中加热不停振摇20,, ,,再加浓盐酸0.2,,,摇匀,于沸水浴中不停振摇加热30,,,,立即冷却,用乙 醚提取4次,每次10,,。醚液合并,用纯化水洗涤醚层2次,每次10,,,醚液经 无水硫酸钠脱水,分次转移至50,,量瓶中,加乙醚至刻度,摇匀。精密吸取5.0 ,,于10,,量瓶中,水浴挥干乙醚液,残渣加0.5%醋酸镁 甲醇溶液至刻度,摇 匀,备用。2.2.3 含量测定方法 取上述供试液,以0.5%醋酸镁 甲醇溶液为空白, 在510,,处测定吸收度,计算即得总蒽醌、游离蒽醌的含量。总蒽醌与游离蒽 醌之差即为结合型蒽醌的含量。2.2.4 显色稳定性的测定:取上述供试液,,,, 游=0.77%,,,,总=0.50%,,,=2,。加样回收率的测定: ,游=99.86%,,,, =3.24。 ,总=100.09%,,,,=5.85。,=9。2.3 正交实验及结果 根据初步 预实验的结果,拟用四因素三水平(表1),按,9(34)正交实验表对大黄进行回流提 取实验,结果见表2。2.3.1 试验结果数据处理极差方差计算结果见表2。 多元线性回归计算 由于正交设计因素间彼此正交,即因素间的相关系数,, ,=0本试验设计的相关系数矩阵见表3,符合多元线性回归对因素的要求。因此,试验结果数 据可采用多元线性回归计算处理,结果见表4。以总蒽醌含量为指标,2,回归方程如下:^,2=1.0285+0.0083,+0.0790,+0.1377,+0.0197,;,=9 ,=0.7357 ,=1.1797 ,=0.1919,0.14,4=4.11 以游离蒽醌含量为指标,3,回归方程如下:^,3=0.0932+0.0006,+0.1220,+0.0957,+0.0246,;,=9 ,=0.8879 ,=3.7362 ,=0.0785,0.144=4.11以结合蒽醌为指标,4,回归方程如下: