【doc】冯了性风湿跌打药酒中东莨菪素含量的高效液相色谱法测定

【doc】冯了性风湿跌打药酒中东莨菪素含量的高效液相色谱法测定 冯了性风湿跌打药酒中东莨菪素含量的高 效液相色谱法测定 第"卷第3期 3996年5月 色谱 CHINESEJOURNALOFCHROMATOGRAPHY VoI_14No.3 May1gg6 冯了性风湿跌打药酒中东莨菪素含量的 高效液相色谱法测定 朱炳辉罗文东余锦雄 (广东省药品捡验所广-州510180) 提要舟绍了用高效澈相色谱法测定冯了性风湿跌打药酒中东莨菪隶含董的方法.色谱柱为SpherisobCts柱 (150rcsm×46一,5【I1){流动相为甲醇一求(46:54,/l)的混合液?流速0.8mL/mJn{检测波长360rim.样品流 过Sep—Pakc8微柱,收集第6mL至第8mL的流出液作供试液方法平均回收事为101.0,5tRSD=0.93%.进 样量在0.206~2.06/~g范围内线性关系良好,r=0.9997.所建立的方法可怍为冯了性风湿趺打药酒质量控制的 一 种简便,快速和准确的测定方法. 关键词高教棱相色谱法,冯了性风湿跌打药酒,东莨菪翥 1前盲 冯了性风湿跌打药酒由丁公藤等27味药材制 成,丁公藤是主药":东莨菪素(scopoletin)是丁公 藤的主要有效成分,具有祛风,抗炎,止痛作用.,也 是该药酒的主要活性成分. 对东莨菪素含量的测定方法有紫外分光光度 法.,薄层色谱法"'等近期报道用高效液相色谱法 (HPLC)测定了丁公藤注射液的东莨菪素含量"',但 对组成复杂的制剂中东莨菪素含量的HPLC测定 则耒见摄道.本文采用Sep—PakC微柱对冯了性风 湿跌打药酒进行前处理,用HPLC法测定了东莨菪 素的含量,具有前处理手续简便,有利于延长色谱柱 使用寿命分析结果准确可靠等优点. 2实验部分 2】仪器与 仪器:Waters高效液相色谱系统:510泵.490E 紫外可见光检测器,U6K阀,Baseline810工作站; SpherisorbClB柱(150ramX4.6mm,5m,中科院大 连化学物理研究所产);sep—PakC微柱(Waters公 司产). 对照品:东莨菪素(中国药品生物制品检定所提 供,批号为768—9001);供试品:冯了性风湿跌打药酒 三批(佛山市制药一厂生产,批号分别为9104114, 93J~010,9303005,本所留样)}试剂:甲醇(/ff析纯) 2.2方法与结果 色谱条件流动相为甲醇一水(4654,/), 流速为08mL/mln,检测波长为36Ohm,灵敏度为 0.5Aufs. 东莨菪素对照品贮备瘦的制备精确称得对照 品lO.3rag置于5OraL容量瓶中用甲醇溶解并稀释 至刻度,摇匀,作东莨菪素对照品贮备液,密闭,避光 备用 对黑品溶液曲制备精确量取对照品贮备液 5mL置于25mL容量瓶中.用甲醇稀释至刻度,摇 匀,作末莨菪素对照品溶液,即配即用. 供试液的制备用注射器吸取本品,接上Sep PakC微柱轻压注射器柱塞,使该药酒以lmL/ mln左右的流速缓缓流出把前6mL的流出波弃 击,收集第6~SmL之间的流出液于2mL的窖量瓶 中作供试液. 标准曲线的绘制将依次精确量取的对照品溶 液5,10,15,20,25,30.40和j0进样,进样量范围 为0206~2.06t~g.测定进样量C()与峰面积R (V?s)之间的关系.得线性回归方程式为;C一 0.01224+0.01274×10一R,相关系数r一 0.9997 样品的涮定结粟取由每批样品制成的供试液 10止进样.平行进样6次,测得批号为9104114, 9304010和9303005三批样品中东莨菪寮的台量分 别为93-6t91.3和62.4~g/mL,RSD苛别为 0.44%.0.g7和0.76样品色谱图见图1 加样回收率试验分别精确量取3mL东莨菪 寮对照品贮备液和20mL冯了性风湿跌打药酒(批 号为9303005)置于同一25mL的容量瓶中,用水稀 妻袭善曹蠡暑嚣月4日,修回日期;..年月.日 14卷?206? 释至刻度,摇匀.按供试渡的制备方法操作.收集 第6~8mL的流出渡.取该流出液10VL进样,平行 进样6次,测得平均回收率为102.0,RSD一 0.93 3讨论 3.1捡测波长的选择 取对照品少量,用流动相溶解.溶液经紫外光谱 扫描,发现最大吸收波长为346nm346nm作检 测波长.其余色谱条件同前述,取经前处理的供试渡 10止进样,发现被测组分峰受干扰较大,影响定量. 改用360nm作检测波长.未见有相邻杂质峰干扰 3.2流动相的选择 当流动相中甲醇与水的体积比分别为80:20. 65:35,j05O,46:5I和4O6O时.测得东莨菪 素容量因子k分别为0.15.0.37—1.19,1.47和 2.54=1.8rain.东莨菪素色谱峰与其他干扰峰的 分离情况随流动相中甲醇浓度的下降而得到改善. 当甲醇_水的比例为50t5o时,东莨菪素色谱峰未 能与相邻的峰完全分离;当甲醇一水的比倒降为46: 54时,东莨菪素色谱峰与相邻的峰能完全分离.分 析时间适中,见圉1. lI1'll 田1样品色谱田 Fig,1Chromatogramofk 东莨菪素保留时闻为4.49mla. RetentiontJraeofscopoletln449rrdn. 3.3供试液收集的选择 按照供试液的制备方法,使样品流过Sep— PakC.微柱.依次收集6管流出液.并依次编号.每 管收集2mL.在每管中精确量取10溶液进样,分 别测定东茛菪素的浓度.浓度与管编号的对应关系 见图2.由图2可知,从2号管起各溶液的东莨菪素 的浓度已是平衡浓度过早收集的溶液,因微柱的吸 附作用使溶液中京莨菪素的浓度低于样品的实际浓 度泣c迟收集的溶液.可能会因微柱过载而含有较多 的强保留物质.本试验收集第6~8mL流出液是较 合理的. 收寨竹编号 cnllec【1IJbenllmber 田2洗出灌中东莨营素靠虞的变化曲线 F.2Concentrationchangecur scopoletlnineluteflsolution 34样品处理方法对色谱系统性能的影响 将试验过程中按"供试液的制备方法处理的供 试液进样约10次,比较第一次和最后一次进样时的 柱压力和柱的塔板数,未发现有明显的改变.试验结 束后.柱经40mL甲醇冲洗即可冲洗干净.未经微柱 处理的样品(已经滤膜过滤)进样数次后,柱压显着 增大,分离效率明显变差,雷经用甲醇和二氯甲烷长 时间反冲,柱压和柱效才回复到原状由此可见,如 果不先除去样品中的强保留物质,则有可能损害色 谱柱. 东莨菪素化学性质较不稳定.不能用加热,萃取 等常规方法对样品作前处理.本文介绍的微柱前处 理方法能有效地解决HPLC测定冯了性风湿跌打 药酒时遇到的样品纯化问题 3.5本法可用于东蓖着素的定量检测 《中国药典》(一部,1990年版)中"冯了性风湿 跌打药酒项下没有东莨菪素定量标准,不利于质量 控制.本文建立的HPLC测定该药酒中东莨菪素含 量的方法,选用的条件合理.操作简便,结果准确可 靠.在修订药典时可考虑采用本法作为该药酒的 定量检验方法. 参考文献 1中华^民菸和国卫生部葑典委员会.中国葑典(一部). 北京人民卫生出版社1990:425 2国家医药管理局中草药情报中心部编.植物药有效成 分手册.北京;人民卫生出版社,1986942 3叶惠珍,范椰新,刘植蔚等.中草药.1981|12(5):5 4陆敏仪,黄西蜂,马祥欢.中国中药杂志,1993】s(3) 158 5李梅,周燕文,扬正鸿等.中草药,1994I25(5)l246 ?2O7? DeterminationofScopoletininFengliaoxingFengshi DiedaWinebyHighPerformanceLiquidChromatography ZhuBinghui,LuoWendongandYuJinxiong (GuangdongProvincialInstituteforDrugControl,Guangzhou,51O18O) AbnranAhighperformanceliquidchromatographicmethodforthedeterminationofscopole tinin FengliaoxingFengsDiedaWinewasdescribed.Chrom8tographjcconditionswere{column ,SpherisorbCl8 (150ram×4.6mm,m)}mobilephase,methanol— water(46:54,V/V);flowrate,0.8mL/min;detection wavelength,360rim.QuantitationwascarriedOutbasedontheexternalstartdardofseopoleti n.Thewine sampleWaSpassedthroughaSepPakC】amicro— columnandtheelutedsolutionwascollectedlrom6to8mL astestsolutionforhighperformanceliquidchromatography.Thelinearrangeofthismethodw as0.206— 2.06btg(r一0.9997).Theaveragerecoverywas101.0,RSD一 0.93%.Themethodwassimple,rapid, accurateandcanbeappliedtOqualitycontrolforthiswine. Keywordshighperformanceliquidchromatography.FengliaoxingFengshiBiedaWine.sco poletin 《色谱》扩充英文摘要,图表加英文对照和增加审理费的通知 为了提高《色谱》杂志的质量及其在国外的知名度,根据编委们的,从现在起,本刊要 求作者在投稿时,1)尽量充实英文摘要的,尤其研究和研究简报或超过4000宇(图,表 所占位置亦折算成文字)的文章,英文摘要在《色谱》杂志上要占半页以上的版面(至少1300个 字符),其他栏目的文章可酌减(600,1200个字符);2)文中图的图序,图题,图注和表的表序, 表题,项目栏,栏,表注(总之凡图,表中有中文处)除用汉字外,还须用相应的英文对照书 写.上述规定本刊从今年第一期起开始执行.凡已投稿者请迅速补加有关英文内容寄至我部; 以后来稿凡缺少上述内容者,发表费恕酌情增加 注意:英文摘要应是详细摘要(不是简略的提示).应包含正文中的主要内容L主要论点及 结果),使国外读者结合正文中有外文标注的图,表即能基本了解全文的要点.撰写英文摘要 时,要注意二者(文与图,表)兼顾,将二者视为一个整体(行文时最好将图,表串起来,可在文中 注明见图×,表X;如有公式,亦可作相仿处理). 另,因一方面英文内容增多,另一方面要提高审稿质量.须增加审稿人酬金,故决定从现在 起将投稿审理费由原30元增至50元(自费者折半)作者在投稿时请一并将审理费5o元寄来 —— 文章发表时间一般是由收到审理费的先后顺序决定的. 《色谱》编辑部 1996生3月