[doc] 双黄连口服液和双黄连片中黄芩甙的含量测定

[doc] 双黄连口服液和双黄连片中黄芩甙的含量测定 双黄连口服液和双黄连片中黄芩甙的含量 测定 第33卷第3期西南民族大学?自然科学版Jun.2007 Journa1ofSouthwestUniversityf0rNationalities?Natura1ScienceEdition 文章编号:1003—2843(2007)03-0538-04 双黄连口服液和双黄连片中黄芩甙的含量测定 张成志 f乐山师范学院,四川乐山614004) 摘要:采用了反相高效液相色谱法测定双黄口服液和双黄连片中黄芩甙的含量.具体是采用C18色谱柱,以甲 醇:水:冰醋/I~=49.5:50:O.5为流动相,流速1.0ml/min,紫外光度检测器于波长277nm测定,实验结果表明黄芩甙浓 度在O.05,0.20mg/ml时呈良好的线性关系,r=0.9988,在双黄连片中回收率为86.70%,RSD为2.27,在双黄连口服液中回 收率为97.31%,RSD为2,10.采用本法测定双黄口服液和双黄连片中黄芩甙的含量,方法灵敏,快速,简便,准确,结果 稳定,重现性好,能起到控制双黄连片和双黄连口服液质量的作用. 关键词:双黄I:7服液:双黄连片;黄芩甙;含量HPLC 中图分类号:R284文献标识码:A 双黄连片是一种辛凉解表,清热解毒的药物,它对流感病毒A,A3,流 行性腮腺炎病毒(MEV),呼吸道合胞 病毒(RSV),腺病毒3型(ADV3),柯萨奇病毒B3型(cox.B3)等病毒均有抑制作用;抑菌试验表明本品对金黄色 葡萄球菌,肺炎杆菌,大肠杆菌等均有较强的抑菌作用,动物试验证明,本品具有较好的抗炎,解热作用. 双黄连口服液是由金银花,黄芩,连翘三味中药组成,也是一种清热解毒,用于风热感冒发热,咳嗽,咽痛 的药物.本文利用高效液相色谱法(HPLc)测定黄芩甙结果准确可靠. 仪器与试剂 LC.2010A型岛津高效液相色谱仪;紫外光度检测器;CI8十八烷基硅胶键合幽定相;甲醇(分析醇);冰醋 酸(分析醇);重蒸馏水;黄芩甙对照品(鹤山生物);双黄连片(陕西白鹿制药股份有限公司,匡I药准字:Z10960036, 批号:030905);双黄连口服液(国药准字:Z10920053,批号:04102712). l色谱条件 C18分析柱为色谱柱;流动相:甲醇.水.冰醋酸(49.5:50:O.5);检测波长为277nm;柱温为4O.c;流速: 1.0ml/min;理论塔板数2572.在此色谱条件下,黄芩甙标样及双黄连片和双黄连口服液的HPLC色谱如图l, 图2,图3所示.. OO25507.5100 图l黄芩甙标样HPLC图图2双黄连片HPLC图图3双黄连口服液 HPLC图 收稿日期:2007一Ol-26 作者简介:张成志(1946.),男,乐山师范学院化生系教授 第3期张成志:双黄连口服液和双黄连片中黄芩甙的含量测定539 2对照品溶液的制备 精密称取在600(2真空干燥4h的黄芩甙对照品51.1mg,用无水乙醇稀释至50ml,制成1,022mg/ml的溶液, 再分别取0.4ml,0.8ml,1.2ml,6ml,2.0ml该溶液用50%的甲醇稀释至10ml配成浓度分别为0.04mg/ml, 0.08mg/ml,0.12mg/ml,0.16mg/ml,0.20mg/ml的溶液作为对照品溶液. 3供试品的制备 (1)取双黄连片6片,精密称定,研细,取细粉0.5021g,置100ml锥型瓶中,精密加入50%甲醇100.0ml,搅 拌,浸泡24h,使其充分溶解,滤过,精密吸取续滤液5ml,置50ml量瓶中,用50%甲醇稀释至刻度,摇匀,作为 片剂供试品溶液fO.5021mg/m/). (2)精密称取双黄连口服液2.2764g,用50%甲醇稀释至50ml,制成浓度为0.04553g/ml的溶液,再取2ml该 浓度溶液,用50%甲醇稀释至10ml,摇匀,作为口服液供试品(0.009106g/m1). 4曲线的制备 精密吸取对照品溶液 (0.04mg/ml,0,08mg/ml,0.12mg/ml,0.16mg/ml,20mg/m1)各5ul,按上述色谱条件测 定峰面积,以黄芩甙浓度(mg/m1)为横坐标,以峰面积(A)为纵坐标.绘制标准曲线图,如图4,计算得回归方程: Y=2E+07X.87043相关系数r=0,9988(n=5),黄芩甙浓度在0.05—0,20mg/ml时呈良好的线性关系. 5样品的测定 3500000r 3000000 2500000 .2000000I 蹙1500000{一 1000000一 500000 0 00,050.10.15 浓度(mg/m1) 图4黄芩甙标准曲线 ..一.L一———J 0.20.25 (1)取双黄连片6片,精密称定,研细,取细粉0.5021g,置100ml锥型瓶 中,精密加入50%甲醇稀释至 100.Oml,搅拌,浸泡24h,使其充分溶解,滤过,精密吸取续滤液5ml,置50ml量瓶中,用50%甲醇稀释至刻度, 摇匀,作为片剂供试品溶液.在高效液相色谱仪上以每次进样5ul测定6次,求其平均值作为结果.tR=6.967, Area=976918,最后得出样品含量为4.332mg/片. (2)精密称取双黄连El服液2.2764g,用50%甲醇稀释至50ml,制成浓度为0.04553g/ml的溶液,再取2ml该 浓度溶液,用50%甲醇稀释至10ml,摇匀,作为口服液供试品.在高效液相色谱仪上以每次进样5ul测定6次, 求其平均值作为结果.tR=6.850,Area=1138902,最后得出样品含量为0.673lmIg/g. 西南民族大学?自然科学版第33卷 6回收率实验 精密称取已知含量的双黄连片和双黄连口服液,精密添加不同量的黄芩甙对照品,按上述色谱条件进行测 定.结果见表1和表2. 表l双黄连片回收率试验测定结果 7讨论 本实验的黄芩甙对照品放置时间过长,在50%甲醇中的溶解性不好,采用无水乙醇来溶解,液体澄清,故选 用无水乙醇为溶解液. 以甲醇.水.冰醋酸作为流动相,从HPLC谱图来看,峰形较好,主峰与杂质峰能达到基线分离,分离效果满 意;本实验中,理论塔板数为2500以上,达到实验. 在双黄连口服液样品谱图中可见,有未知成分的峰,这说明乙醇溶液里含有芳香族化合物其在紫外区有吸 收.从绘制的标准曲线图来看,黄芩甙浓度在0.05—0.20mg/ml时呈良好的线性关系.另外,在黄芩甙对照品谱 图中可见有未知成分的峰,且峰面积随进样量的多少而改变,如果将乙醇改为5O%甲醇为溶解液,则峰面积也 随之改变. 本文采用HPLC法对双黄连口服液和双黄连片中黄芩甙的含量测定,此法准确,灵敏,快速,简便,能起到 控制双黄连nN.液和双黄连片质量的作用,对完善该类药物的质量标准有一定意义. 参考文献: 【l】肖引,乔博灵.高效液相色谱法测定双黄连糖浆LIJ黄芩甙的含量【J】.中国医学,2002,17(10):600-601. 【2】2ZHOUXIAO-GUANG,RENBAI?X1ANGDeterminationofBaicalininBic optislnjectionByHighPerformanceLiquid Chromatography[J].ChineseJournalofSpectroscopyLaboratory,2003,20( 4):410-411. [31MENGXIANG?MINC~MENGZHI?YUN,ZHANGLIANG,eta1.Sim u-ltaneousDeterminationofCeflazidimeandTazobactamin 第3期张成志:双黄连口服液和双黄连片中黄芩甙的含量测定54l InjectablepowderbyReversed-PhaseHighPerformanceLiquidchmmatography【J】.JournalofChinesePharmaceuticalSciences 2004,l3(4):332-334. DeterminationoftazobaetaminsliceofpairoftherhizomeofChinesegoldthread andoralliquidofpairoftherhizomeofChinesegoldthread ZHANGCheng—zhi (LeshanTeacher’SCollege,leshan614004,PR.C.) Abstract:Areversed-phasehighperformanceliquidchromatographic(RP-HPLC)Methodisdevelopedandvalidatedforthe determinationoftazobactaminsliceofpairoftherhizomeofChinesegoldthreadandoralliquidofpairoftherhizomeof Chinesegoldthreadinthisexperiment.ChromatographyiscarriedoutonCiscolumn.withthemethylalcohol:Water:Glacial aceticacid=49.5:50:0.5forflowlooks.Theflow.rateofthemobilephaseWasImL/min.TheUVdetectionwavelengthiS 277nm.Thelinearrangesoftazobactamis0.05~0.20mg/ml,R2=0.9988,resp ectively.Theaveragerecoveriesoftazobactamin sliceofpairoftherhizomeofChinesegoldthreadis86.702%,RSD=2.27%andinoralliquidofpairoftherhizomeofChinese goldthreadis97.3l%,RSD=2.10%.WeCanconcludethatthemethodtodeterminethecontentofsliceofpairoftherhizomeof ChinesegoldthreadandoralliquidofpairoftherhizomeofChinesegoldthreadbyHPLCissensitive,fast,simple,convenient, andaccurate,theresultissteady,andthereappearingisgood.ItCanbeusedforthequalitycontrolofsliceofpairofthe rhizomeofChinesegoldthreadandoralliquidofpairoftherhizomeofChinesegoldthread. Keywords:oralliquidofpairoftherhizomeofChinesegoldthread;sliceofpairoftherhizomeofChinese;goldthread tazobactam;content:HPLC