糖皮质激素诱导亮氨酸拉链蛋白与炎症反应关系的研究[J]

糖皮质激素诱导亮氨酸拉链蛋白与炎症反应关系的研究[J] , ,年 ,月第 , 第 ,期中 国危 重 病 急 救 医 学 , , ,卷 , , ,, ,,,, ,, ,,,, ， ,, ， ( ,,, ,, , ,，, , , , , ,,( , ,, , ? ? , 论 著 ,糖皮质激素诱导亮氨酸拉链蛋 白与 炎 症 反 应 关 系 的研 究 白祥 军 李 波 王 海 平 杨 朝 晖 李思 齐 【 ,, ) 摘要】 目的 探讨 糖皮质激 素诱导 的亮 氨酸拉链 蛋 白( ， , 在炎症反 应过程 中的作用机 制 方 法 ,，, ,培养基分两 组培 养人单核 细胞株 ,采用无血清,, , , 其中刺激组 加入地 塞米松 ( , 刺 ,,一,细胞 ， , ,) 而 , ,, ,,后 提 取 两 组 细 胞 总 ,, 和 总 蛋 白 ; 逆 转 录一 合 酶 链 反 激 ， 对 照 组仅 加无 血 清 , ,， ,,培 养 基 。, , 用 聚 , , ,) , 用蛋 白质免 疫印迹法 ( ,,,,,, , 在 翻译水平 应 ( ,— , 方法在转录水平半 定量检测 ,， ,基 因; , ,,,, ,,, ) , ,,一 , , ,与激活蛋 白一 (检测核转录 因子一 ,( , ), , 的蛋 白达 。 ,,,一 ) ,例临床创伤患者〔 收 创伤严重度 ， ) , 伤 , ,,内的外周血 ，评分 ( , ?, 分〕 后 集 , , 对 , ,, 提取 白细胞 后分为刺激组 和对照组 ， 照组给予无血清 , ,，, , 刺 , 培 ,,后 提 取 白 细 胞 总 ,培 养 基 。 激 组 在 对 照 组 的 基 础 上 加 入 , , 刺 激 ， 养 , 用 , , ,, 和 总 蛋 白 ; , , , , 用 ,,, , , ,方法在 翻译水平 检测 ,,—, , , ,， ,基因 ; ,,,, ,,, , , ,与 ,方法 在转录水平半定量 检测 ,,一,的 蛋 白表达 。结果 在 ,, ,, ,刺激下 ， ,刺激组 ,,,一, , ,,表 达水 细胞 和创伤患者外周血 白细胞 ,，, ,, ,均,, , ), ,刺激组 , , ,,一,蛋白在 ,平 均较 对照组升 高( (, ;, ,— ,, ,与 ,,一,细胞 和创伤患 者外周血 尸 (,。白细 胞 的表 达 水 平 均 低 于 对 照 组 ( 均 ,, , ) 结 论 ， ,基 因表 达 ; , 的 高表 达可 糖皮质激素可上调 ,, ,，, 以抑制 ,,— ,与 ,,一,的活性 ， 具有抗炎症反应 的作用 。 关 , , 【 键 词 】 糖 皮 质 激 素 ; 地 塞 米 松 ; 亮 氨 酸 拉 链 蛋 白 ; 核 转 录 因子 一 ; 激 活 蛋 白一 ; 全 身 炎 症 反 应 综 合 征 , , , , ,,,,, , , ,, , ,, , , , , , ,; ; , ,,, ,,, , , , ,, , , , ,, , , , ,, ,, ; , , ; ,, , , ,, ,,, ,, , ,, , , , , ,; , ,,, , , , , ,,,, , , , , , ,, , , ;,, , , , ,，, ，, ,, ,, ,,,,, , —, ， ,, ,,— , ,(,,,, , — , ，, ,？ 。,, ,,, ,, , ,, ,,, ,, , ,, ,, , ， , , , ,, , , , ,, , ,, , ,，, ,, , ,,,, ， ,, ,, , , , ,, , , , ， , , , ,,,,, , , , ,, ;,,, ， , , ,, , , , , , ,, ,;, , , , 日“ , ,,,,,,, ;,; , ,, ,, , ,, , ,,, , , ,, , , , , ，, , , ， , , , , ;〕 , , , , , ,, ,, , , ; , , , , ;, ,,, , , , ,, , , , , ; , , 〔 , ,, , , ,;,, , , , , ,, , , ,, , ,, ,, , , , , , ,; ; ,, , , ;, ,, ,, , , ; , , , , , ,， ,, ,, , , , ; ,,(, , , , ,, , ,, , , ,; , , ,,,, 一, ; , , , , , , ,,, , ( ,,), , ,,, , , , , , ,, ,, , , ,, , ; , , , , , ,, ,, , , , , , , , ,, , , , , ; ,, , , , , , , , , ,, ,, (， , , , , , , ,, ,,, ,, , ,, , , , , , , ,, ,, , , , , , ,,, ， , , ,, , , , , , , ;,, , ,, ,, ,, , , , , , , ,,,), , ,, , , , ( ,,, , ,,, ,, ,, (,,,, , , , , , , ,,, , , , , ,, , , ,, ,,, , , , , , , , ,,, , , ,, ,, ,, ,, ;, , , ,,, , , ( , , , , ; , , , , , , , , , , ,, , ？ , ,, ,, , , , , , , , , , , ; , , , —,, ,,,, , , , , , , , , , , , ,, , ,， , , , , ,, , , , ,, , , , ; , , , , , , , , ,, , , ,, , , , , , ;,, ,, —,, ,,, ,,; ,, ,, ,, ( ,,)(,, ,, , , ,,,, , ,, , ,,—, ( , ,, , , ,,, ,, ;, ,, —, , , ;, ,, , ,), ,, ,, , ,, ,,;, , ,, , , ,, , , , ( , 一, , ,, , , , ,, , ,, , , , , ,, , , , , ,, , , , , , , , ),,, , , , , , ,, ,, ,, , (, , , , , ,, ,, , , , , , , , ( ,, , , , , , , , , , ,, ， ,) ? , ; , , ,, , ; , ;, , , , , ; ,, ,, , ,,, , , , , , , , , ,, ,, , ,, ; , (, ,,,,〕 , , ,, ,, , , , , ,, , , , , , ,,, ,,,, , , , ,, ,, ( , , , , , , , ,, , , , , , , , , , ; ,, , , , , , , ,, , ,( ， , , , , ,, ,, ,, , , ; , , ,, , , , , , , , ,, , , , , , , , , , , , , , , , ,, ,,, ,,, ,, ,,, ,, ,, ,,, ,, , ,,, , ,,,,, ,,,,, , , , , ,, , , ,, ,, , , , , ; , , ,, , , ,( ,,,, , , ,, , , , , , ,,, ,,, ,, ,, ,,;, , , , ,, ,, , , ,,, , , ; , , , , , , , , , ,, ,, , ？ , ,, ,, , , , , , , , , , (,, , , , , , ,, , , ,, ,,， , , ,, , , ,, , , , , , ; , , ,, —, , ,, ,,(,, , , , , , ,, , ; , , , , , , , , , , , , , , , (,, , , , , ,, , , , , , , , ,,, —， , , , , ,, 一, ,, , , , , , , , , , , , ,, , , , ,, ,,, , , , ,,, ，, , , , , , ,, , ,, ,, , , , , , , , ,,, , , ; , , , , , , ; , , , ,, ,, , , , ,, , , ,, , ,， ,,,, , , ; , , , , , , , , ,, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ( ,( , , ,，, , ,, , , , ,, , , ; ,, , , ,, , , ,; , , , , , , ( , , ,, , , ) , , , , , , ,,, , , , , , , , , ,,, —, , , , ; ,, , ,, , , , , , ,, , ,, , , , ,, ,, ,, , ,, , , ,, , , , , ,,, 一 , , ,,, 一 , ,, , , , , ; ,, , , ,, , , ,, , , , , , , , , , ; , ,, , , ,,, , , , , , ; ,, , , ,,, , , , , , , , , , , ,, , ( ,( , ,,, , , , , ,, ,, , , , , , , , , , , , ,; , , , , , , ( , ,, , , , , ) ,, ; , , , ,, , , , ,, , , , ,, , ,, ,,, , ,; ; ,, , , , , , , ,, ,,， , ,, ,, —, , ,， , , , ,, —, ,,, ,,, , , ,; ,(,, , , ,,,, , ,, ,,,, , ;,,,, , , ,, ,,,, ， , , , , , , , ,, , , , , , , , ,,一 ,— , ,,, , , , , , , ,, , , ,, , ,,， , , , , , ,, ,, , ,, , ;, ( , , , , , ,; ; ,, , ;, , , ,, , , , , ,; , ,; 〔 , , , 】 , , , , , , ; , , ,,, , , ; ,, ,, , , , , ,, ,, ,—, ; , , ,, , ;, , ,;, , , ;, ,, ,, , ; , , ,, , , , , , , , , , , , , ,,, , ,,一, , , , ; , , ,,, , , , , , , , , , ,,,,一 糖 皮 质激 素诱 导 的亮 氨 酸拉 链 蛋 白(,;;, ; , ,, , , ,, , , ,, , ,， , 最初 作 为 一 种 , ,, ,, ;, , ; ,,, , ， , ) 基 金 项 目 : 家 自然 科 学基 金 资助 项 目(, , , , 国 ,,,,) , ,) 对 地塞 米松 ( , 敏 感 的基 因而 从胸 腺 细 胞 ,,, , ,, 作 者 单 位 : ,, , 武汉 ， 中科 技 大 学 同 济 医 学 院 附 属 同 济 医 华 ， ,可 介 导 , 细胞 受 体 消减文 库 中分 离 出来“ 。, ,院 创 伤 外 科 , ;, ,; ,, ， , 的激 活 ， ( ,, ,, ,, , ,) ,, 抑制 淋 巴细 胞 , , 作 者 简介; , , ) 男( ， 白祥 军( , ,一 。 汉族 ) 湖北 省京 山人 ，医学博 ,,和 白细胞介 素一, ， 一, 的表 达 ， 节 ,细 胞 ,, ， ( ) 调 主 士 ， 任医师。 也 , 活 同 的激 活和 凋亡 ， 可抑 制 , , , 性 ， 时参 ?, , , ,年 ,月 第 , 中国危重病急救医学 ,, ,卷 第 ,期 ,,, , , , , ,, ,,, , ， ,, ， ( , , ,, ,,,, ，, , , , ,,,( ,,, , 具与 内皮 细胞 的应 激 。 ， 有广 泛的 免疫 抑制 作用 。近 , ,， ,培 养基 ， 整终 浓 度为 , ,,, 对照 , ,, , 调 , ,,。 ,， ,与 核 转 录 因子一, ,,—, )年来研究显示 ， , ,( , ,， , ,培 养基 培养 , 。 组 加无 血 清 ,, , , ,, (;, ,, ,,,一, ,,一, 之 间有 和激 活蛋 白一, ,, ,, , ,, , , ， ) ( 引 , , , ,中所查 阅 , , 引物 设 计 : 物设 计 参 照 , , , , ,—密切 的联 系 。, ,和 ,,一,是两 个重 要 的促炎 , ,,, 全 长 序 列 ， 用 , , ,, , , , , 的 ,， , ; 应 , , ,, ,,, ( 它们 的激 活 可导致 大量 促炎 因子释放 ，转 录 因子 ， 加 ， 于 引 物 设 计 软 件 设 计 ,， ,基 因 引 物 ， 引 物 上 下 两 , ,, ;重 炎 症反 应 ， 者在 全 身炎 症反 应 综 合征 (, ,,, , ，和 ,, 游 分别 引 入 , ,, ,，酶切 位 点及保 护 性碱 ,,, ,, ,, , ,, , , ,, , , 中起 枢 纽 ,, ,,,,, ,,, , , , , ， ， ,) 基 。上 游 引物 : ,,,,, , ,一, , ,,, , ,,, , ,, ,— 研究 如 何抑 制 ,,—作 用 。因 ,,一,的激 , 下 ,一 ,, ,,,,, — , ,,,,, 此 ， ,和 一, ; 游 引 物 : ,, , , 减 从活 ， 少 促 炎 基 因表 达 ， 而减 轻 组 织 损 伤 和 炎 症 ,, ,, , ,,, 一, ; 增 片段 长 度 , ,, 。 ,,,, , , 扩 , , 反应， ， ,患 者 预后 ， 少 多器 官 功 能 障 以此 改善 , , 减 人 ,, ;, 内参 照 物 ， 游 引 物 :, , 上 , , ,,— ,,, , ,, ,,,, , ,, ， , ,, ,为 ,碍综 合 征 ( ,,,,, ,, ,, ;,??,, ,,, , ,,, ,, ,,, , , ,, 下 ,,,,,, 一 , ; 游 引 物 ; , 的发生 具 有重 要意 义 。 实验 从分 子生 物学 ,,, ) 本 , 一,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,, , : ,水 平 初 步探 讨 ,， ,与 ,,—, ,和 ,, ,的关 系 ， , , 扩增 片段 长 度 , ,, 。引物 由上 海生 工 生物工 程技 ,为 进一 步 了解 ,， ,在炎 症 反应 中所发 挥 的作用 奠 术 服务有 限公 司合成 .