左卡尼汀口服液稳定性的研究

左卡尼汀口服液稳定性的研究 文章编号 1006,814,72013,05-0424-03 论 著 左卡尼汀口服液稳定性的研究 刘 青 ，王姿婧，戴学文，杨金荣，房志仲 (天津医科大学药学院药剂学教研室，天津市临床药物关键技术重点实验室，天津 300070) 摘要 目的:研究左卡尼汀口服液的稳定性，并预测其在室温下的有效期。方法:采用 HPLC法测定口 服液中左卡尼汀的含量， 用经典恒温法预测其有效期。结果:左卡尼汀口服液的降解过程符合一级动力学过程;经典恒温法测得左卡尼汀口服液在 25 ? 的分解速度常数 K=9.190 49E-05，在 25 ?下存放其有效期 t=3.19年 。结论:左卡尼汀口服液有效期暂定为 3.0 年。25 ?0.9 关键词 左卡尼汀口服液;经典恒温法;稳定性;有效期 文献标志码 A中图分类号 R927.11 Study of the stability of L-carnitine oral liquid LIU Qing, WANGZi -jing, DAI Xue-wen, YANG Jin-rong, FANGZhi -zhong (Department of Pharmacy, College of Pharmacy, Tianjin Medical University, Tianjin Key Laboratory on Technologies Enabling, Develop ment ofClinica l Therapeutics and Diagnostic(Theranostics)s，Tianjin 300070,Chin a) Abstract Objective: To investigate the stabilityL -ofcarnitin e oral liquid and to forecast its expiration indate storage at roomtemper a, ture. Methods: The contents ofL- carnitine were determined by HPLC. The expiration date was tested byl constan classicat-temperature method. Results: The pyrolytic degradationkinetic s of Lcarnitine oral liquid was corresponded with the firstorder kinetics. The value of -- constantK determined by the classical constant temperature method was 9.19049 E05 at 25? . The calculated time for 1disintegr0% a,-- tion was 3.19 yearCons.c lusion: The expiration date Lfor-carnitin e oral liquidmay tentatively set on 3.0 .year sKey words L-carnitine oral liquid; classical constant-temperature method; stability; expirationdate 左卡尼汀是哺乳动物能量代谢中必需的体内μm，P/N:9118204)5;Anasart 色谱工作站;2DY-II-I IKVA 型高精度单相交流稳压电源 (国营启动电讯 天然物质，其主要功能是协助细胞中的长链脂肪酰 厂);SYC,15 型超级恒温水浴 (南京桑力电子设备 辅酶 A 穿过线粒体内膜而进入线粒体基质内进行 厂);SWQ 智能数字恒温控制器(南京桑力电子设备 β 氧化而产生能量，与机体的器官、组织代谢密切相 厂);酸度计 PHS,25(数显)pH 计(上海精密科学仪 [1]器有限公司)。 关。左卡尼汀的缺乏会导致能量供应障碍及脂肪 1.1.2 试药 酒石酸左旋肉碱原料药 (郑州安诚生 物酸代谢的各种中间产物累积中毒，出现心肌病变、 [2]科技有限公司，批号:120102AC);左卡尼汀注射 液 心律失常、机体疲劳等症状。由于其正常剂量内不 对 照 品 (意 大 利西格马生物制药公司，批号: 良反应少、安全性高的特点，现临床上得到了广泛 11159)5;阿 斯 巴 甜(日 本 味 之素株式会社 ，批号: [3]的应用。目前临床上使用的主要剂型有注射剂和 T06X22003);甲醇(天津市风船化学试剂科技有限 公 司，纯，批号:2012101)8;磷酸二氢钾(天津 市风口服剂，但室温下贮存期应多长时间为有效，尚未 船化学试剂 科技有限公司，分析纯，批号: 见相关报道。为此，笔者对左卡尼汀口服液的稳定 2010010)8;磷酸(天津市化学试剂三厂，分析纯，批 号:2009010)8;重蒸水(自制)。 性进行科学考察。本文采用经典恒温加速试验法对 1.2 方法 左卡尼汀口服液的稳定性进行试验，为制定其有效 1.2.1 色谱条件 色谱柱:Kromasil C(200 mm×4(6 18 期提供依据。 ,1 mm，5 μm);流动相:0.05 molL磷酸二氢钾溶液 ?1 材料与方法 (80,磷酸调节 pH 至 2(4)?甲醇,95?5，流速:0(5 mL? ,11.1 仪器与试药 min，检测波长:225 nm，柱温:室温，进样量:20 μL。 ALC-210.4 型电子天平(北京赛多利1.1.1 仪器 1.2.2 供试液的配制 供试药液 I:精密量取左卡 斯系统仪器有限公司);KQ-100B 型超声波清洗器 尼汀对照品适量，加流动相制成每 1 mL 中约含有 (昆山市超声仪器有限公司 ); 美国高效液相色谱 左卡尼汀 2 mg的溶液 ，即得。 Spectra-Physics，检测器 SpectraF ocus100，输液泵 SP8810， 色 谱 柱 Kromasil C(200 mm ×4.6mm ，5 18 作者简介 刘青(1989-)，女，硕士在读，研究方向:药物制剂与质量控 制;通信作者:房志仲，E-mail:fangzhizhong@tijmu.edu.cn。 第 5 期 刘 青，等. 左卡尼汀口服液稳定性的研究 425 1.2.3 曲线的绘制 精密称取酒石酸左旋肉尼汀的回归方程为:C=38 189A+27 72，0r=0.999 8。 -1 碱约 3.6383 g，置 100 mL量瓶中 ，加流动相稀释至 结果明左卡尼汀在 0.50:10.00 mgmL范围内与 ?刻度，摇匀，作为储备液。精密量取此溶液 0.025、 峰面积线性关系良好。 0.05、0.1、0.2、0.3、0.4 和 0.5 mL 分 别 置 10 mL 量 瓶 2.2 精密度 测得左卡尼汀样品溶液的日内精密 度中，加流动相稀释至刻度，摇匀，按照“1.2.1”项下色 谱的相对标准偏差为 0.48%，日间精密度的相对标准偏 差条件进行测定，记录色谱图。 为 0.39%，均小于 2%，方法重现性良好，符合要求。 1.2.4 精密度试验 取供试药液 I，按照“1.2.1”项 下2.3 稳定性 测得左卡尼汀样品溶液稳定性的相 对色谱条件于同一天内平行进样 6 次，计算 RSD 标准偏差为 0.39%，小于 2%，结果表明供试品溶 值，得到日内精密度。连续进样 6 d，计算 RSD 值，得 液在 48 h 内基本稳定。 到日间精密度。 2.4 回收率 测得样品中左卡尼汀的平均回收率 为 100.38%，RSD 为 0.85%，回收率在 98%:102%之 1.2.5 稳定性试验取供试药液 I，按照“1.2.1项” 下色谱条件分别于 0、3、6、9、12、24 和 48 h 进样，计间，相对标准偏差小于 2%，符合规定。结果见表 1。 表 1 左卡尼汀回收率试验结果(n=9) 算 RSD值。 Tab 1 Results of recovery test of L-carnitine( n=9) 1.2.6 回收率试验 精密称取酒石酸左旋肉碱，按 加入 加入 测得 平均 处方量的 80,、100,、120,分别精密加入相应的辅 RSD/% 回收率/% 质量/g 质量/g 回收率/% 百分比 料，加入流动相稀释为 3 种不同浓度的溶液，每组 80% 1.60 1.61 100.34 不同比例各 3 份(共 9 份)，按“1.2.1”项下色谱条件， 测1.60 1.63 101.57 1.60 1.61 100.82 定峰面积(A)，按照外标一点法，计算浓度，并将测 得2.00 2.02 101.01 100% 值与加入值比较，计算回收率。 2.00 2.01 100.49 100.38 0.85 2.00 2.03 101.35 1.2.7 破坏性试验 2.40 2.37 99.22 120% 1.2.7.1 酸破坏:精密称取酒石酸左旋肉碱 3.638 3 g 2.40 2.38 99.30 )1 于 100 mL量瓶中 ，加入 0.1 molLHCl 50 mL，水浴 ? 2.40 2.39 99.31 加热，每隔 30 min取样 2 mL，试验进行 3 h。每个样 2.5 破坏试验 酒石酸左卡尼汀在强酸条件下较 )1 品冷却至室温后，用 0.1 molLNaOH中和 ，过滤， ?稳定，在强碱、氧化破坏时，左卡尼汀均不易与酒石 精密吸取续滤液 0.2 mL于 10 mL量瓶 ，流动相稀释 酸分离，影响测定结果。见图 1~3。 定容，于上述色谱条件进样，测定，记录其色谱图。 0.018 0.016 1.2.7.2 碱破坏:精密称取酒石酸左旋肉碱 3.638 3 g 0.014 )1 于 100 mL量瓶中 ，加入 0.1 molLNaOH 50m L，水 ?0.012 v m/ 0.010 浴加热，每隔 30 min取样 2 mL，试验进行 3 h。每个 积0.008)1 面 样品冷却至室温后，用 0.1 molLHCl 中和，过滤， ?0.006峰 0.004 精密吸取续滤液 0.2 mL于 10 mL量 瓶，流动相稀释 0.002 定容，于上述色谱条件进样，测定，记录其色谱图。 0.000 0 5 10 15 1.2.7.3 氧破坏:精密称取酒石酸左旋肉碱 3.638 3 g 时间 /min )1 于 100 mL量瓶中 ，加入 0.1 molL3% HO50 mL， ?22 图 1 左卡尼汀酸破坏 HPLC 图 Fig 1 HPLC chromatograms of L-carnitine acid destruction 水浴加热，每隔 30 min取样 2 mL，试验进行 3 h。取 出的样品敞口加热，使 HO分解，过滤，精密吸取续 22 0.018 0.016 滤液 0.2 mL于 10 mL量瓶 ，流动相稀释定容，于上 0.014 v述色谱条件进样，测定，记录其色谱图。 .0120m / [4] 0.010积 1.2.8 经典恒温试验将左卡尼汀口服液样品灌 装面 0.008 峰 0006 .于 10 mL安瓿中 ，熔封，分别置于 60、70、80、90 ? 的0.004 恒温水浴中，各温度按试验设计时间取样，每次 0.002 0.000 分别取出 2 支安瓿，自然冷却至室温，按“1.2.2项” 下0 5 10 15 配制成供试品溶液，进样 20 μL 测定。 时间 /min 2 结果 图 2 左卡尼汀碱破坏 HPLC 图 2.1 标准曲线 按“1.2.3”项下条件进行测定，左卡 Fig 2 HPLC chromatograms of e basedestruction L-carnitin