6 粗纤维的含量测定

和实中润饲料有限公司羽毛粉项目技术部 作业指导书 文件编号: HSZR-12-08 第1版 第0次修订 粗纤维的含量测定 颁布日期:2012.08.09. 六 饲料中粗纤维的含量测定 1适用范围 本方法适用于粗纤维含量大于10g/kg的饲料。本方法还适用于谷物和豆类植物。 2 原理 用固定量的酸和碱，在特定条件下消煮样品，再用醚、丙酮除去醚可溶物，经高温灼烧扣除矿物质的量，所余量为粗纤维。它不是一个确切的化学实体，只是在公认强制规定的条件下，测出的概略成分，其中以纤维素为主，还有少量半纤维素和木质素。 3 试剂 3.1 水至少应为GB/T 6682规定的三级水； 3.2 盐酸溶液c(HCl)=0.5mol/L； 3.3 硫酸溶液c(H2SO4)=(0.13±0.005)mol/L； 3.4 氢氧化钾溶液：c(KOH)=(0.23±0.005)mol/L； 3.5 丙酮； 3.6 滤器辅料：海沙，或硅藻土，或质量相当的其它材料。使用前，海沙用沸腾盐酸[c(HCl)=4mol/L)]处理，用水洗至中性，在500℃±25℃下至少加热1h； 3.7 防泡剂：如正辛醇； 3.8 石油醚：沸点范围40℃~60℃。 4 仪器设备 实验室常用设备，特别是下列各件。 4.1 粉碎设备：能将样品粉碎，使其能完全通过筛孔为1mm的筛； 4.2 分析天平：感量0.1mg； 4.3 滤埚：石英的、陶瓷的或硬质玻璃的，带有烧结的滤板，滤板板径40μm-100μm（按ISO7493：1980孔隙度P100）； 在初次使用前，将新滤埚小心地逐步加温，温度不超过525℃±25℃下保持数分钟，也可使用具有同样性能特性的不锈钢坩埚，其不锈刚筛板的孔径为90μm。 4.4 陶瓷筛板； 4.5 灰化皿； 4.6 烧杯或锥形瓶：容量500mL，带有一个适当的冷却装置，如冷凝器或一个盘； 4.7 干燥箱：用电加热，能通风，能保持温度130℃左右； 4.8 干燥箱：盛有蓝色硅胶干燥剂，内有厚度为2mm～3mm的多孔板，最好由铝或不锈钢制成。 4.9 高温炉：用电加热，加以通风，温度可调控，在475℃～525℃条件下，保持滤埚周围温度准至±25℃。高温炉的高温读数不总是可信的，可能发生误差，因此对高温炉中的温度要定期检查。 因高温炉的大小及类型不同，炉内不同位置的温度可能不同。当炉门关闭时，必须有充足的空气供应。空气体积流速不宜过大，以免带走滤埚中物质。 4.10 冷提取装置，附有： ——一个滤埚（4.3）支架； ——一个装有至真空和液体排出孔旋塞的排放管； ——连接滤埚（4.3）的连接环。 4.11 加热装置（手工操作方法）：带有一个适当的冷却装置，在沸腾时能保持体积恒定； 4.12 加热装置（半自动操作方法）：用于酸和碱消煮。 5 分析步骤 5.1 手工操作法分析步骤 5.1.1前处理 5.1.1.1预先脱脂（DDGS、全脂米糠、柠檬酸渣、菜籽、膨化大豆等高脂肪原料） 称取约1g试样装移至一滤埚，试样用石油醚脱脂3次，每次用石油醚30mL，每次洗涤后抽吸干燥残渣，将残渣装移至一500mL高脚烧杯。按照5.1.2处理。 5.1.1.2除去碳酸盐（蛋鸡料） 称取1g样品与500mL烧杯中，将100mL盐酸倾注在试样上，连续振摇5min，小心将此混合物倾入一滤埚，滤埚底部覆盖一薄层滤器辅料。用水洗涤两次，每次用水100mL。 将滤埚内容物转移至原来的烧杯中并按5.1.2处理。 5.1.1.3其他饲料（除了上述两种情况之外的试样） 直接称取1g样品按照5.1.2处理 5.1.2酸消煮 将200mL硫酸（0.108mol/L）和1滴正辛醇倾注在试样上。2min之内沸腾，并保持微沸状态30min。微沸期间不断补充热蒸馏水保持硫酸的浓度不变。 5.1.3第一次过滤 当消煮结束时，将液体通过一个搅拌棒引流至滤埚中，真空抽滤，把烧杯中的溶液全部转移到滤器中。如果滤器堵塞，则用一个搅拌棒小心地移去覆盖在滤器辅料上的粗纤维。残渣用热水洗涤5次，每次约用l0mL水。停止抽真空，加一定体积的丙酮，刚好能覆盖残渣，静置数分钟后，使慢抽滤排出丙酮，继续抽真空，使空气通过残渣，使之干燥。 5.1.4碱消煮 将残渣定量转移至酸消煮用的同一烧杯中。加150mL氢氧化钾溶液，尽快使其沸腾，保持沸腾状态30min±1min，微沸期间不断补充加热蒸馏水保持溶液的体积为150mL。 5.1.5第二次过滤 烧杯内容物通过滤埚过滤，滤埚内铺有一层定量滤纸，其厚度约为滤埚高度的五分之一，上盖一筛板以防溅起。残渣用热水洗至中性。残渣在真空条件下用丙酮洗涤3次，每次用丙酮30mL，每次洗涤后抽吸干燥残渣。 5.1.6脱脂 试样用石油醚脱脂3次，每次用石油醚30mL，每次洗涤后抽吸干燥。 5.1.7干燥 将滤埚置于表面皿中，灰化皿及其内容物在130℃干燥箱中至少干燥2h。在灰化或冷却过程中，滤埚的烧结滤板可能有些部分变得松散，从而可能导致分析结果错误，因此将滤埚置于灰化皿中。滤埚和灰化皿在干燥器中冷却，从干燥器中取出后，立即对滤埚和灰化皿进行称量（m2），准确至0.1mg。 5.1.8灰化 将滤埚和灰化皿置于高温炉中，在500℃±25℃下灰化至恒重，冷却，然后称量（m3）。准确至0.1mg。 5.1.9空白测定 不加试样，按照上述5.1.2～5.1.8的操作步骤进行操作。灰化引起的质量损失不应超过2mg。 5.2 半自动操作方法的分析步骤 5.2.1前处理 试样的前处理和手动分析中的5.1.1一样处理，但是在最后不要转移至烧杯中。而是（转移）留在原来的滤锅中。 5.2.2酸消煮 将消煮圆筒与滤埚连接，将150mL沸硫酸转移至带有滤埚的圆筒中，如果出现泡沫，则加数滴防泡剂，使硫酸尽快沸腾，并保持剧烈沸腾30min±1min。 停止加热，打开排放管旋塞，在真空条件下通过滤埚将硫酸抽滤出，残渣用热水至少洗涤3次，每次用水30mL，洗涤至中性，每次洗涤后抽吸干燥残渣。 5.2.3碱消煮 关闭排出孔旋塞，将150mL沸腾的氢氧化钾溶液转移至带有滤埚的圆筒，加数滴防泡剂，使溶液尽快沸腾，并保持剧烈沸腾30min±1min。停止加热，打开排放管旋塞，在真空条件下通过滤埚将氢氧化钾溶液滤去，用热水至少洗涤3次，每次用水约30mL，洗至中性，每次洗涤后抽吸干燥残渣。残渣在真空条件下用丙酮洗涤3次，每次用丙酮30mL。 5.2.4干燥 干燥步骤按照手动操作中5.1.7中操作步骤进行。 5.2.5灰化 灰化步骤按照动手操作中5.1.8中操作步骤进行。 5.2.6空白测定 不加试样，按照上述5.2.2～5.2.5的操作步骤进行操作。灰化引起的质量损失不应超过2mg。 6 测定结果的计算和表述 试样中粗纤维的含量（X）以克每千克表示（g/Kg），按式（1）计算： ．．．．．．．．．．．．．．．．（１） 式中：m1 ——试料的质量，单位为克（g）； m2 ——灰化盘、滤锅以及在130℃干燥后获得的残渣的质量，单位为毫克（mg）； m3 ——灰化盘、滤锅以及在500℃±25℃灰化后获得的残渣的质量，单位为毫克（mg）。 结果准确至1g/Kg。也可以质量分数（%）表示。 7 重复性 用同一方法，对相同的试验材料，在同一实验室内，由同一操作人员使用同一设备，在短时间内获得的两个独立的实试验结果之间的绝对差值超过下表中列出的重复性限r的情况不大于5%。 表 重复性限（r）和再现性限（R） 样品 粗纤维含量/(g/Kg) 重复性限（r）/(g/Kg) 再现性限/(g/Kg) 向日葵饼粕粉 223.3 8.4 16.1 棕榈仁饼粕 190.3 19.4 42.5 牛颗粒饲料 115.8 5.3 13.8 玉米谷蛋白饲料 73.3 5.8 9.1 木薯 60.2 5.6 8.8 狗粮 30.0 3.2 8.9 猫粮 22.8 2.7 6.4 8 注意事项 8.1 在加热过程中溶液若有蒸发，应添加煮沸的蒸馏水至锥形瓶的200mL刻度处。 8.2 使用转移溶液时要带上厚棉手套，防止烫伤。 8.3 纤维仪使用要注意消煮圆筒与滤埚要衔接不漏水。 8.4 纤维仪使用时如果抽滤不通畅，建议小心吹气排除滤器堵塞。 8.5粗纤维里面含有的纤维素，半纤维和木质素。注意木质素不属于糖类，木质素是苯丙基衍生物，很难被消解。 9 结果准确度的保证 9.1 加入酸碱的体积要准确。保证纤维仪使用时滤锅不漏液。 9.2 酸碱的浓度要准确，需用盐酸和氢氧化钠标准溶液粗标一次。 9.3 加热时间不能太长，要保持在30±1min，否则引起纤维和半纤维的损失。 9.4 脂肪高于10%时，前处理必须脱脂。脂肪低于10%可以不用脱脂。 9.5 手动操作中，需要把残渣转移干净。 9.6 微沸过程中不要让试样沾在消解器上。 和实中润饲料有限公司羽毛粉项目技术部 HSZR-12-08 _1234567890.unknown