【精品文献】血清胸腺因子（FTS）对荷瘤小鼠干扰素、白介素-2分泌的影响

【精品文献】血清胸腺因子（FTS）对荷瘤小鼠干扰素、白介素-2分泌的影响 论文范文 题目:血清胸腺因子,FTS,对荷瘤小鼠干扰 素、白介素-2分泌的影响 编辑:司马小 【摘要】 目的 观察 FTS对提高荷瘤动物干扰素,IFN-ν,、白介素- 2,IL-2,分泌的影响。方法 对荷瘤动物皮下注射不同剂量的FTS后, 取其血清～测定血清中IFN-ν的含量～并测定其脾细胞在ConA刺激 下分泌IL-2的含量。结果 与对照组比～ FTS 2.5mg/kg、1.25mg/kg 能够使荷瘤小鼠血清中的干扰素含量显著提高,P<0.01,～同时也使 脾细胞分泌IL-2的能力提高。结论 FTS能够刺激机体提高分泌细胞因 子的能力～对抗肿瘤有着积极的作用。 【关键词】 血清胸腺因子 干扰素 白介素-2 抗肿瘤 【Abstract】 Objective Observation the FTS to enhance the Dutch lump animal IFN-ν～IL-2 secretion influence.Methods After Dutch lump animal hypodermic injection different dosage of FTS, takes its blood serum, in the determination blood serum IFN-ν the content, and determines its spleen cell to secrete IL-2 under the ConA stimulation the content. Results With the control group compared to, FTS 2.5 mg/kg, 1.25 mg/kg can cause in the Dutch lump mouse in blood serum of the interferon content remarkable enhancement ,P< 0.01,, simultaneously also causes the spleen cell to secrete IL-2 ability enhancement. Conclusion FTS can stimulate organism enhancement secretory cell factor ability, the resistance tumor has the positive function. 【Key words】 FTS; IFN; IL - 2; anti-tumor 据报道～血清胸腺因子,Thymulin,FTS,来源于胸腺组织～其氨基酸 序列为NH2/Glu-Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Ser-Asn～是一类小分子肽 ,1,～对参与获得性和先天免疫的细胞FTS都能产生作用,2,～在 鸡模型中～FTS能参加IL-2R的表达～特别对CD4+ 细胞～它也影响人 IFN-ν受体的表达～使细胞更易被细胞因子刺激,3,～本文通过研究 FTS对荷瘤动物分泌IFN及IL-2的影响～了解FTS对免疫低下机体的 细胞因子的作用～从而为国内进一步研究FTS在抗肿瘤方面的应用打 下良好的基础。 1 材料与方法 1.1 药物与试剂 血清胸腺因子,FTS, ～批号060821～由深圳市翰宇 生物有限公司提供,其纯度为>96%,冻干粉末,冷冻保存～临用前取 FTS 1mg～加1ml消毒生理盐水稀释为1mg/ml的原液～供皮下注射 用。阳性对照药为胸腺肽～冻干粉末～200mg/支,黑龙江迪龙药业有限 公司提供,批号20061001,小鼠干扰素-γELISA试剂盒～晶美生物工 程有限公司提供,批号20060529,刀豆蛋白A,ConA,～SIGMA公司提 供～浓度为10μg/ml和30μg/ml,MTT～SIGMA公司提供～使用浓度 为5mg/ml～20μl/孔。 1.2 瘤株 小鼠H22～取接种于小鼠的腹腔第7天的瘤株,配成106/ml 瘤细胞悬液～接种于小鼠前肢腋窝皮下0.2ml/鼠。 1.3 动物 实验用体重18，20g的SPF级雄性昆明小鼠,C57 BL/6小 鼠～6，8W 雄性～动物合格证号:SCXK京,2005-2006,～均由中国药 品生物制品检定所实验动物中心提供。饲养观察2天后使用。实验动物室为无菌空气二级过滤～人工日光灯12h自动照明～恒温、恒湿送风～温度22，24?～相对湿度40%，45,。鼠笼具为塑料盒,不锈钢丝盖。 1.4 荷瘤动物模型 用18，20g的昆明小鼠皮下注射H22瘤株～24h后小鼠随机分组用于实验。 1.5 给药方法 分别取荷瘤小鼠～健康动物及免疫缺陷型动物各50只～均分为5组～分别按高、中、低3个剂量注射FTS～对照组注射NS～用胸腺肽做阳性对照～均皮下注射给药～每日给药1次～共给药14天。 1.6 小鼠IL-2的产生 将给药后的小鼠断颈放血～取脾置于无血清RPMI-1640培养液中去杂质～研磨成单个细胞后用100目筛及200目筛过滤～将滤液1000rpm,5min离心～取上清～除红细胞后～用无血清RPMI-1640培养液洗1次～最终用含10%小牛血清的RPMI-1640培养液配成0.5〓107/ml～加入24孔细胞培养板中500μl/孔～同时加入等体积的ConA,10μg/ml,～37?～5%CO2～培养24h～取出 2500rpm,20min离心～收取上清～除菌后～-20?保存备用。 1.7 小鼠胸腺细胞的制备 将C57 BL/6小鼠断颈放血～取胸腺置于无血清RPMI-1640培养液中去杂质～研磨成单个细胞后用100目筛及200目筛过滤～将滤液1000rpm,5min离心～去上清～除红细胞后～用含5% 小牛血清的RPMI-1640培养液洗二次～最终用含10%小牛血清的RPMI-1640培养液配成1.0〓107/ml。 1.8 小鼠血清的制备 将给药后的小鼠从眼静脉丛取血～待凝固后分离血清～-20?保存备用。 1.9 检测指标 用酶标仪测定各组的OD值～IFN-ν测定用490nm～MTT测定用550nm。实验数据用x〒s表示～组间比较用t检验。 2 结果 2.1 FTS对荷瘤小鼠IFN-ν分泌的影响 将给药后的小鼠血清稀释5倍和10倍～按IFN-νELISA测定试剂盒的要求～测定每个小鼠血清IFN- ν的含量～10倍稀释后的血清比5倍稀释后的血清测定结果要高～结果见表1。表1 荷瘤小鼠血清,10〓,IFN-ν的含量注:与对照组比较～*P<0.05～ **P<0.01,与胸腺肽比～??P<0.01 由表1可见～与NS组比较～FTS 2.5mg/ml、1.25mg/ml可以极显著地增强荷瘤小鼠IFN-ν的分泌,P<0.01,～比胸腺肽的刺激作用强,P<0.01,。 2.2 FTS对荷瘤小鼠IL-2分泌的影响 将含IL-2的样品倍比稀释后加入96孔细胞板～100μl/孔～每稀释度3个复孔～再加入ConA, 30μg/ml,,20μl/孔～同时设ConA对照和培养液对照～培养72h～培养结束前4h加入MTT～按MTT测定法在550nm测OD值～结果见表2。 表2 FTS对荷瘤小鼠IL-2分泌的影响 由表2可见～与NS组比较～FTS 2.5，0.63mg/ml可以极显著地增强荷瘤小鼠IL-2的分泌活性～而胸腺肽与对照组比差异有显著性～但是比FTS要弱。 3 结论 生物反应调节剂是继三大常规手段,手术、放疗、化疗,治疗恶性肿瘤后的又一新的手段,4,～细胞因子是生物反应调节剂中最活跃的一群～大量资料表明～干扰素和白介素-2能够促进NK细胞的杀伤活性～抑制肿瘤细胞生长～是重要的抗肿瘤细胞因子,5,。从本文实验结果中看出～通过给荷瘤小鼠注射血清胸腺因子,FTS,～可以提高机体分泌干扰素、白介素-2的能力,P<0.01,～从而加强了机体的抗肿瘤能力。胸腺肽是目前常用的免疫增强剂～大量用于肿瘤病人术后的治疗中,6,～从本文的实验中可以看出～FTS对细胞因子的激活能力比胸腺肽要强得多,P<0.01,～但有效剂量要小52倍～所以将FTS开发成抗肿瘤新药是很有发展前景的～生物治疗已成为21世纪肿瘤治疗的主要方向和潮流～无疑可以在肿瘤综合治疗中发挥更重要的作用。 【参考文献】 1 Kohda Y, Kawai Y, Iwamoto N,et al. Serum thymic factor, FTS, attenuates cisplatin nephrotoxicity by suppressing cisplatin- induced ERK activation. Biochem Pharmacol～ 2005,70,9,:1408-1416. 2 D Chandratilleke, GA Marsh.The effect of thymulin on avian IL-2 receptor expression. Int J Immunopharacol,2000, 22:887-896. 3 PG Merlino,JA Marsh. The enhancement of avian NK cell cytotoxicity by thymulin is not mediated by the regulation of IFN-γ production. Dev Com Immunol, 2002,26,1,:103-110. 4 左增艳～柳钟勋～李健蕊～等.新型生物反应调节剂、当归多糖 ,ASDP,抗肿瘤作用及对荷瘤小鼠免疫功能的影响.中国免疫学杂志～ 2000～16,10,:545-546. 5 徐叔云,卞如濂,陈修. 药理学实验方法学.北京:人民卫生出版社～ 2002,1762-1763. 6 陈奇.中药药理研究方法学.北京:人民卫生出版社～2006,1006- 1012.