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基因组DNA的提取

2013-01-23 1页 doc 14KB 26阅读

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基因组DNA的提取CTAB法提取植物基因组DNA1.取新鲜植物材料10~50mg(具体视植物种类、老幼、部位而定),加液氮研磨。将研磨的材料转入1.5mL离心管中。2.加入600μL2×CTAB溶液(65℃预热),立即颠倒混匀。65℃水浴30min,期间上下颠倒数次。3.振摇5min,加等体积氯仿:异戊醇(24:1)抽提5min,室温条件下12000rpm离心10min。4.取上清于新管,加入等体积的异丙醇,混匀后,4℃沉淀30min。5.12000rpm离心10min收集沉淀。6.加入900μL75%乙醇洗涤沉淀2次,...
基因组DNA的提取
CTAB法提取植物基因组DNA1.取新鲜植物材料10~50mg(具体视植物种类、老幼、部位而定),加液氮研磨。将研磨的材料转入1.5mL离心管中。2.加入600μL2×CTAB溶液(65℃预热),立即颠倒混匀。65℃水浴30min,期间上下颠倒数次。3.振摇5min,加等体积氯仿:异戊醇(24:1)抽提5min,室温条件下12000rpm离心10min。4.取上清于新管,加入等体积的异丙醇,混匀后,4℃沉淀30min。5.12000rpm离心10min收集沉淀。6.加入900μL75%乙醇洗涤沉淀2次,4℃,12000rpm离心5min,弃上清。室温干燥。7.加入ddH2O溶解。RNase37℃消解30min。8.0.8%琼脂糖凝胶检测。(1μLgDNA+3μL10XloadingBuffer)
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