生长因子和癌基因c2 在涎腺肌上皮肿瘤中的表达

生长因子和癌基因c2 在涎腺肌上皮肿瘤中的达 ?100 ? 中华口腔医学杂志 1999 年 3 月第 34 卷第 2 期 Chin J Stomatol March 1999 Vol 34 No. 2 ?论著?生长因子和癌基因 c2erbB22 在涎腺肌上皮肿瘤 中的表达王丽京 高玉好 杨连甲 【摘要】 目的 恶性肌上皮瘤 中的过度表达及其意义 。 探讨生长因子和癌基因在涎腺良 、 采用免疫组化 方法对 20 例肌上皮瘤和 20 例肌上皮癌表皮生长因子受体 epidermal growth factor β 癌基因 c2erbB22 蛋白的表达进行研 转化生长因子βtransforming growth factorβTGF 、receptor EGFR 、究 。结果 EGFR 、 β在全部标本中均呈过度表 达 表达的程度与肿瘤的良恶性无关 c2erbB22 在 5 TGF例肌上皮瘤和 13 例肌 上皮癌中呈过度表达 且在恶性肿瘤中的表达程度明显增加 。结论 EGFR 与TGF 的协同作用与涎腺肌上皮肿瘤的增殖和分化有密切的关系 同 EGFR 结构相似的 癌基因 c2erbB22 β的激活对刺激肿瘤细胞失控性生长起重要的促进作用 。 【关键 词】 受体 表皮生长因子2尿抑胃素 转化生长因子β 原癌基因蛋白质 c2erbB22 类 涎腺肿瘤 2Significance of expression of epidermal growth factor receptor transforming growth factorβ c2erbB 2oncogene in myoepitheioma of salivary gland WANG Lijing 3 GAO Yuhao YANG Lianjia. 3 Department ofStomatology Lanzhou Medical College Lanzhou 730000 【Abstract】 Objective To explore the effect of expression of epidermal growth factor receptor EGFR transforming growth factor β TGF c2erbB22 oncogene in myoepithelioma and malignant myoepithelioma. βMethods 20 cases of myoepithelioma and 20 cases of malignant myoepithelioma were examined by immunohisto 2 βchemical methods. Results All cases showed overexpressionof EGFR and TGF the intensity of expression 2didn’ associate with the benignity and malignity of tumors. The overexpression of c erbB22 oncoprotein was seen in t5 cases of myoepithelioma and 13 cases of malignant myoepithelioma and the cases of malignant myoepitheliomawere stained more intense than that of myoepithelioma . Conclusion The synergy of EGFR and TGFR had β 2significant relation to the proliferative and differentiation processes of myoepithelial tumor. The activated c erbB22oncogene that is similar with EGFR in structure plays an important promoting role in unrestricted progression ofmalignant myoepitheioma cells. 【 Key words】 Receptor epidermal growth factor2urogastrome Transforming growth fctor beta Proto2oncogene proteins c2erbB22 Salivary gland neoplasms 涎腺肌上皮肿 瘤是近几年才得到关注的新型肿 免疫组化方法研究了 EGFR 、 β 及 c2erbB22 在 40 TGF瘤 关于其生物学行为和病理学特征的研究较少 1 。 恶性肌上皮瘤中的表 达 以探讨它们在肿瘤发 例良 、目前 许多研究资料表明肿瘤的发生是生长因子 、 生 发展中的作用 。 生、长因子受体和癌基因及其蛋白产物间的相互作用失 材料 和方法衡的结果 2 。现已在多种类型的肿瘤组织中检测到表皮生长因子受体 epidermal growth factor receptor 1. 标本 :40 例标本均选自第四军医大学口腔医 EGFR 、转化生长因子β transforming growth factor β 学院病理科 1974,1995 年间 临床检查的存档蜡块 。TGF 以及癌基因 c2erbB22 的过度表达 并证实与肿 β 所 有标本均依据作者提出的纳入标准进行筛选 3 瘤的恶性程度及预后有关 。有关这 些抗体在涎腺肌 同时经两名高年资病理医生参照 1991 年 WHO 关于上皮肿瘤中 过度表达的研究尚未见报道 。我们采用 《涎腺肿瘤组织病理新分类》 标准重新确 诊 并经免 疫组化 Ck218 、 Actin 抗体染色结果均为双阳性表达 作者单 位 :730000 兰州医学院口腔系 王丽京 第四军医大学口 所证实 。依据肿瘤细胞 分化程度分为 20 例肌上皮 杨连甲腔医学院 高玉好 、 瘤和 20 例肌上皮癌 同时依据细胞形态分为上皮细 中华口腔医学杂志 1999 年 3 月第 34 卷第 2 期 Chin J Stomatol March 1999 Vol 34 No. 2 ?101 ?胞型 、 浆细胞样细胞型和透明细胞型 4 梭形细胞型 、 图 4 表达程度在肌上皮癌中明显增强 。组织学型 。全部标本均经中性福尔马林液固定 常规石蜡 观察阳性细胞呈区域性聚集分布 主要为上皮细胞 μ包埋 。5 m 连续切片 4 张 1 张 HE 染色 其余分别 和透明细胞 在肿瘤组织接近包膜的区域常可见阳进行 EGFR 、 β及 c2erbB22 抗体染色 。 TGF 性细胞数目增多及染色强度增加的趋势 。 2. 试剂 : 兔抗人 EGFR 、2erbB22 多抗分别为美 c 讨 论 β国 Santa Cruz 和丹麦 Dako 公司产品 鼠抗人 TGF 单抗为美国 Oncogene Science 公司产品 。ABC 试剂盒 β EGFR 及 TGF 均为多肽类生长因子 是较强的为美国 Vector 公司产品 。 细胞增殖和分化的调节剂 一种或几种生长因子或 3. 方 法 : 采 用 常 规 ABC 法 工 作 浓 度 分 别 为 受体的表达异常 常可导致细胞的增殖和恶变 2 。 c2EGFR 1 :50 、 β 1 :100 、 erbB22 1 :25 。在正常血清 TGF EGFR 是相对分子质量为 170 000 的跨膜糖蛋白 它封闭前 将切片浸于饱和的硫氰酸铅溶液中微波处 的胞外部分结合表皮生长因子或转化生长因子 α c2理 10 min 以恢复抗原性 。EGFR 、 erbB22 的阳性结 α TGF 而被激活 激活后的 EGFR 可促进多种类型果为细胞膜上出现棕黄色颗粒 部分瘤细胞胞浆中 的细胞尤其是上皮细胞的增殖和分化 4 。目前已在 β也可出现 TGF 的阳性结果为胞浆中出现棕黄色颗 胃癌等多种肿瘤中检测到 EGFR 蛋白的过 乳腺癌 、粒 。深棕色为强阳性 、 浅棕色为弱阳性 、介于两者之 度表达及 mRNA 的水平增高 且与肿瘤的分化程度间为阳性 。 及预后有密切关系 5 。Mori 等 6 也观察到 在多种 4. 对照组设置 : 以 2 例腮腺组织作为正常对照 良、恶性涎腺肿瘤中均有 EGFR 蛋白的过度表达 但2 例乳腺浸润性导管癌的阳性病例作为阳性对照 β 与肿瘤的恶性程度无明显关系 。TGF 是具有刺激以 PBS 液代替一抗作阴性对照 。 细胞从贴壁依赖性生长转变为贴壁非依赖性生长的 一类物质 相对分子质量为 25 000 它作用于靶细胞 结 果 β β 的 TGF 受体而发挥其生理作用 。TGF 对细胞的作 梭形 1. 病理形态观察 : 肌上皮瘤有上皮细胞型 、 用主要取决于细胞的类型和状态 。它对上皮组织来 浆细胞样细胞型和透明细胞型 4 个亚型 。细胞型 、 源的细胞有较明显的抑制作用 对间叶组织来源的各型均以某种形态的瘤细胞为主构成 瘤细胞弥漫 细胞却表现为刺激 还有免疫抑制及促进血管内皮分布或呈束状 、结节状排列 细胞间有大量均匀红染 β 细胞增生的作用 。TGF 作为前列腺癌 、 乳腺癌的生 红染 透明细胞胞浆呈空的物质 瘤细胞胞浆丰富 、 物学标志已得到广泛研究 它与肿瘤的转移和浸润网状 。肌上皮癌中 4 种形态的癌细胞均可见到 但 β 密切相关 7 。有关 TGF 在涎腺肿瘤中表达的报道以上皮细胞型和透明细胞型为多 胞浆红染或透明 较少 结果也不一致 。有学者报道涎腺转移性导管弥漫排列或成簇状 细胞及核的异型性明显 可见癌 β 癌中 TGF 的表达明显低于非转移癌 但在细胞培巨细胞和病理性核分裂像 并可见癌细胞浸润包膜 β 养中却比非转移癌更能逃避 TGF 的生长抑制作用和骨组织 。 而大量增生 。本研究中 EGFR 、 β 在良 、 8 TGF 恶性 2. 腮腺和乳腺癌中 3 种抗体的表达 : 2 例腮腺 恶性肿瘤 肌上皮瘤中均呈过度表达 说明它们在良 、组织的分泌管和闰管上は赴种抗体均呈阳性 发展中均起重要作用 。EGFR 的过 度表达 的发生 、表达 图 1 腺泡细胞则为阴性 肌上皮细胞仅对 α 可能是肿 瘤自泌或旁泌生长因子受体和 TGF 大量 βTGF 呈弱阳性表达 。乳腺浸润性导管 癌对 3 种抗 增多并共同作用于 EGFR 使 EGFR 大量激活从而刺体均呈强阳性 表达 。阴性对照结果为阴性 。 激肿瘤增殖 。EGFR 在浆细胞样细胞和透明细胞 中 3. 良恶性肌上皮瘤中 3 种抗体的表达 : 40 例 呈强阳性表达 说明它的表达与 肿瘤细胞类型有关 。良、恶性肌上皮瘤对 EGFR 、 β均呈阳性到强阳性 TGF β β TGF 的过度表达可能是肿瘤自泌或旁泌 TGF 刺激表达 图 2 3 仅少数呈弱阳 性表达 。肿瘤的浆细 肿瘤细胞自身大量增生和刺激肿瘤间质及血管形胞样细胞型 和透明细胞型对 EGFR 呈明显的强阳 β 成 也可能是肿瘤细胞逃避了 TGF 的生 长抑制作性 。鳞状化生区域也呈阳性表达 。肿瘤的纤维间 用 造成肿瘤的失控性 生长 。总之 EGFR 、 β 可 TGF质、 β 血管内皮细胞对 TGF 呈阳性表达 。5 例 肌上皮 恶性肌上皮瘤的特殊标记物 但不能作 作为涎腺良 、瘤和 13 例肌上皮癌 对癌基因 c2erbB22 呈阳性表达 恶性的有效指标 。 为判断肿瘤良 、 ?102 ? 中华 口腔医学杂志 1999 年 3 月第 34 卷第 2 期 Chin J Stomatol March 1999 Vol 34 No. 2 c2erbB22 又称 HER22/ neu 是一种细胞来源的 concepts of histology and classification : a light and electron microscopic study. Ultrastruct Pathol 1989 13 :1872224.癌基因 它与 EGFR 的跨膜区和胞内部分极其相似 2 Aaronson SA. Growth factors and cancer. Science 1991 254 : 11462它的免疫组化阳性产物与 EGFR 一样是在细胞膜 1153. 3 王丽京 朱任之 杨连甲 . 涎腺肌上皮瘤的临床病 理分型和免疫上 所以被称为生长因子受体型癌基因 9 。它在正 组化研究 . 实用 口腔医学杂志 1997 13 :24226.常情况下处于非激活状态 当受到体内外某些因素 4 Stoscheck CM K ing LE Jr. Role of epidermal growth factor in carcinogenesis. Cancer Res 1986 46 :103021037.作用后其结构和表达调控失常而被激活 引起癌 细 5 Bast RC Jr Boyer CM Jacobs I et al . Cell growth regulation in胞的失控性增 殖 。许多研究表明 癌基因 c2erbB22 epithilial ovarian cancer. Cancer 1993 71 4 Suppl : 159721601. 6 Mori M Naito R Tsukitani K et al . Immunochistochemical distribution的过度表达与肿瘤的分化程度有关 10 作者在以往 of human epidermal growth factor in salivary gland tumors. Vivchows对肌上皮肿瘤的研究中也证实了这一 点 11 。研究 Arch A Pathol Anat Histopathol 1987 411 :4992507. 7 Dalal BI Keown PA Greenberg AH. Immunocytochemical localization发现 EGFR 的过度表 达常伴有癌基因 c2erbB22 的基 of secreted transforming growth factor2beta 1 to the advancing edges of因扩增 有作者在细胞培养中观察到这两种抗体在 promary tumors and to lymph node metastases of human mammary carcinoma. Am J Pathol 1993 143 :3812389.涎腺腺癌细胞系中呈联合表达 但 c2erbB22 在肿瘤 8 Axuma M Yuki T Tamatani T et al . Lach of expression of细胞向恶性转化中起着更重要 的作用 12 。 transforming growth factor2beta type II receptor associated with malignant progression in human salivary gland cell clones. Int J Cancer 1996 66 : 有 学者提出某种肿瘤的分化程度 、 生长速度及 8022805.某些生物学行为很可能是多 个生长因子及其受体相 9 李景泰 主编 . 临床医学分子生物学现状和未来 . 北京 : 中国科学 技术出版社 1993. 87290. 相互制约的结果 2 。我们选用了 3 种不同互 平衡 、 .