癌基因与涎腺多形性腺瘤相关性研究

白从而达到减毒增效的目的。现有的动物实验结果 显示 ,靶向细胞因子是一种非常有前途的新型抗肿 瘤制剂 3 。 噬菌体文库展示技术从最初建立到现在 ,已经 在生命科学研究的许多领域中得到广泛应用 ,如分 析细胞因子拮抗剂和激动剂 ,筛选酶抑制剂 ,分析未 知抗原位、疫苗研制和导向肽的发现等 4 。随着 噬菌体展示多肽库技术的发展 ,可以从中筛选出与 任意大分子特异高效结合的多肽 ,作为导向性药物 的载体 ,这一新型的导向性药物具有更低的免疫原 性 ,在体内较容易到达肿瘤组织深部 ,更好的发挥 “弹头分子”杀伤作用。 利用基因工程手段 ,将噬菌体展示肽库中筛选 并合成出能特异性在肺毛细血管内皮富集的多肽 GFE - 1 (CGFECVRQCPERC) ,是由 13 个氨基酸组成 的短肽 ,实验显示用未选择多肽噬菌体在小鼠肺、肾 和脑均为低表达 ,而选择 GFE - 1 噬菌体在肺内呈 高表达 ,比肾、脑组织明显高表达 ,GFE - 1 在肺组织 中能特异性富集 5 。应用基因重组的将其与 IFN -α 2a 导向肺组织血管 ,乃至肿瘤组织新生血 管 ,进一步提高 IFN - α 2a 的量效比 ,降低毒副反 应 ,从而降低 IFN - α 2a 全身用药量 ,减少毒副反 应。同时应用小分子量的肽段作为导向性物质 ,使 这一新型的导向性药物具有更低的免疫原性 ,在体 内较容易到达肿瘤深部更好地发挥 IFN -α2a 抑制 肿瘤作用。由于 IFN -α2a - GFE - 1 具有特异性作 用于肺新生血管的优点 ,所以 ,在应用中抗瘤谱更广 泛 ,而且不易产生耐药性 ,希望开发出一种新型高效 低毒 ,具有导向性作用于肺肿瘤组织新生血管的生 物制品 ,使 IFN 具有更广泛的临床应用。 4 　参考文献 1 　Darnowaki JW ,Davol P ,Goulette FA. Human recombinant in2 terferon -α 2a plus - 3 - azido - 3 - deoxythmidine ; Syner2 gistic growth inhibition with evidence of impaired DNA repair in human colon adenocarcinoma cells. Biochem Pharmacol , 1997 ,53 :571 2 　Eric J ,Frank GH. Interferon in oncological practice ;review of interferon biology ,clinical applications ,and toxicities. The on2 cologist ,2001 ,6 :34 - 55 3 　Xiang J . Targeting cytokines to tumors to induce active antitu2 mor immune responses by recombinant fusion proteins. Hu Antibodies ,1999 ,9 :23 4 　Krook M. Selection of a cylin monapeptide inhibitor to alpha - otrypsin using a phage display peptide. Mol Divers ,1998 ,3 (3) :149 - 150 5 　Daniel R ,Wadin A ,Martin H et al . Molecular heterogeneity of the vascular endothelium revealed loy in vivo phage dis2 play. Clin invest J ,1998 ,102(2) :430 - 437 ( 2003 - 03 - 21 收稿 ,责任编辑 　董 　兵) 作者简介 :蒋书勤 ,女 ,1971 年出生。硕士研究生学历 ,主治医 师。主要从事涎腺肿瘤的研究工作。 癌基因与涎腺多形性腺瘤相关性研究 蒋书勤1 　王育强2 　李淑萍3 　(武警医学院附属医院 :1 五官科 ;2 内科 ;3 中医科 ,天津 300162) 摘 　要 　目的 　探讨涎腺多形性腺瘤与 c - erbB - 2 ,H - ras ,p53和 bcl - 2 基因的关系。方法 　采用免疫组织化学染色和 HE染色观察 21 例多形性腺瘤和 24 例恶性多形性腺瘤癌基因 c - erbB - 2 ,H - ras ,p53和 bcl - 2 表达情况 ,分析 c - erbB - 2 ,H - ras ,p53 和 bcl - 2 基因与涎腺多形性腺瘤的相关性。结果 　c - erbB - 2 与 p53 和 bcl - 2 基因呈正相关 ( P < 0105) ,p53 与 bcl - 2 基因呈正相关 ( P < 0105) ,多元回归分析结果表明 ,用 c - erbB - 2 ,H - ras ,p53和 bcl - 2 基因对涎腺多形性腺瘤进行判别 , bcl - 2 基因意义最显著。结论 　涎腺多形性腺瘤是多种癌基因共同作用的结果 ,c - erbB - 2 ,H - ras ,p53和 bcl - 2 基因可作为 良恶性涎腺多形性腺瘤诊断参考指标。 关键词 　涎腺多形性腺瘤 　c - erbB - 2 　H - ras 　p53 　bcl - 2 Association of c2erbB22 , H2ras ,p53 and bcl22 oncogene with pleomorphic adenoma JIANG Shuqin , WANG Yuqiang ,and LI Shuping. Department of Otorhinolaryngology , Affiliated Hospital , Medical College of Chinese People’s Armed Police Forces , Tianjin 300162 , China Abstract 　Objective 　To explore the relationship between c2erbB22 ,H2ras ,p53 and bcl22 genes with pleomorphic adenoma. Methods 　 c2erbB22 , H2ras , p53 and bcl22 were detected by immunohistochemical staining in 21 patients with pleomorphic adenoma and 24 patients with malignant pleomorphic adenoma. Results 　c2erbB22 was correlated with 364武警医学 (Medical Journal of the Chinese People’s Armed Police Forces) Vol. 14 No. 08 2003 - 08 出版 W w w . C a i y i f a . C o m p53 ,and bcl22 ( P < 0105) ,and p53 was correlated with bcl22 ( P < 0105) . multiple regression analysis showed that bcl22 gene plays an im2 portant role in pleomorphic adenoma. Conclusions 　Several onco genes jointly cause salivary gland tumors. Examination of c2erbB22 ,H2ras , p53 and bcl22 is useful for distinguishing benign and malignant salivary gland tumors. Key words 　Pleomorphic adenoma 　c2erbB22 　H2ras 　p53 　bcl22 　　癌基因和抑癌基因的相继发现大大加深了人们 对肿瘤发病机制的认识 ,现已发现多种癌基因和抑 癌基因的异常与涎腺肿瘤的发生有关 1 22 。本文采 用免疫组织化学染色和 HE 染色对 21 例多形性腺 瘤和 24 例恶性多形性腺瘤癌基因 c - erbB - 2 ,H - ras ,p53 和 bcl - 2 进行观察 ,分析 c - erbB - 2 , H - ras ,p53 和 bcl - 2 基因与涎腺多形性腺瘤的相关性。 1 　材料和方法 111 　标本 　21 例多形性腺瘤和 24 例恶性多形性腺 瘤均来自天津医科大学口腔医学院口腔病理科临床 外检存档资料。所有标本经 10 %甲醛固定 ,石蜡包 埋 ,作 5μm 厚的连续切片。置 60 ℃烤箱内烤 6 h。 112 　免疫组化染色 　染色前用微波炉进行抗原修 复 ,然后用 ABC 法进行免疫组化染色 ,实验中每组 均设阴阳性对照染色 ,以 Tris - HCl 代替第一抗体作 为阴性对照 ;用已知阳性切片作为阳性对照。 113 　染色结果判断 　按照阳性细胞占观察视野中 肿瘤细胞的百分率分 4 级 :未见阳性细胞为 ( - ) ; < 30 %阳性细胞为弱阳性 ( + ) ;30 %～60 %阳性细胞 为中度阳性 ( 6 ) ; > 60 %阳性细胞为强阳性 ( 7 ) 。 114 　统计学处理 　结果采用相关分析及多元回归 分析进行统计学处理。 2 　结果 211 　涎腺多形性腺瘤中 c - erbB - 2 ,H - ras ,p53 和 bcl - 2 蛋白阳性表达率比较 　良性多形性腺瘤中 c - erbB - 2 , H - ras ,p53 和 bcl - 2 的表达率分别为 29 % ,48 % ,19 %和 19 % ;恶性多形性腺瘤中 c - erbB - 2 , H - ras ,p53 和 bcl - 2 的表达率分别为 58 % , 37 % ,50 %和 54 %。见表 1。 表 1 　涎腺多形性腺瘤中 c - erbB - 2 ,H - ras ,p53和 bcl - 2 蛋白阳性表达比较 肿瘤 性质 n c - erbB - 2 - + 6 7 H - ras- + 6 7 p53- + 6 7 bcl - 2- + 6 7 良性 21 15 6 0 0 11 10 0 0 17 4 0 0 17 4 0 0 恶性 24 10 5 6 3 15 3 3 3 12 4 6 2 11 5 5 3 表 2 　c - erbB - 2 ,H - ras ,p53和 bcl - 2 基因的 多元回归分析结果 变量 回归系数 误 标准化 回归系数 c - erbB - 2 - 0. 110 0. 0881 - 0. 2059 H - ras - 0. 0294 0. 0802 - 0. 0517 p53 - 0. 1064 0. 0909 - 0. 1880 bcl - 2 - 0. 1359 0. 0863 - 0. 2521 212 　涎腺多形性腺瘤与 c - erbB - 2 ,H - ras ,p53 和 bcl - 2 的相关性 　c - erbB - 2 与 p53 呈正相关 ,相 关系数为 01493 ;c - erbB - 2 与 bcl - 2 呈正相关 ,相 关系数为 01437 ;p53 与 bcl - 2 呈正相关 ,相关系数 为 01421。c - erbB - 2 ,H - ras ,p53 和 bcl - 2 间未见 相关关系。 213 　多元回归分析 　多元回归分析结果显示 :c - erbB - 2 ,H - ras ,p53 和 bcl - 2 共 4 种癌基因在涎腺 多形性腺瘤判定中 ,bcl - 2 意义最显著 ,其次为 c - erbB - 2 ,p53 ,H - ras。这表明在涎腺多形性腺瘤中 bcl - 2 表达率越高则发展为恶性肿瘤的可能性越 大 ,它为涎腺多形性腺瘤病理诊断提供参考。见表 2。 3 　讨论 　 现在不少学者提出了多基因协同作用假说 ,认 为单独 1 个癌基因可引起细胞增殖和永生化 ,但不 一定引起肿瘤的发生 ,至少有两个或两个以上癌基 因共同作用才引起肿瘤的发生。本文结果显示 ,c - erbB - 2 与 p53 和 bcl - 2 呈正相关 ,且随着涎腺多形 性腺瘤恶性程度的增高 ,c - erbB - 2 基因表达率也 明显增高 ,p53 和 bcl - 2 蛋白表达也呈明显增强趋 势 3 。此结果表明 ,可能是由于 c - erbB - 2 基因被 激活后 ,其蛋白产物大量增殖 ,激活细胞内酪氨酸激 酶 ,使细胞大量增殖 ,从而形成肿瘤 ;而当此种增殖 不能被机体的拮抗机制 (如抑癌基因或凋亡调控基 因)所制约 ,或在其他激活的癌基因协同作用下肿瘤 进一步恶性转化 ,而致恶性多形性腺瘤的发生。因 此临床可用 c - erbB - 2 基因作为涎腺多形性腺瘤 良恶性诊断的一个参考指标。 464 武警医学 (Medical Journal of the Chinese People’s Armed Police Forces) Vol. 14 No. 08 2003 - 08 出版 W w w . C a i y i f a . C o m 大多数作者认为 ,野生型 p53 基因在维持细胞 正常生长 ,抑制恶性增殖过程中起着重要作用 4 25 。 突变型 p53 基因对于细胞凋亡有抑制作用。野生型 p53 蛋白半衰期短 ,不能在细胞内积聚 ,故经免疫组 化方法检出的均为突变型 p53 蛋白。本实验结果显 示 ,p53 和 bcl - 2 基因在涎腺多形性腺瘤中变化较 少 ,提示很可能它们是良恶性多形性腺瘤转化中的 主要制约因素之一。且随着涎腺多形性腺瘤恶性程 度的增高 ,p53 和 bcl - 2 表达也明显增强 ,两者呈正 相关 ,说明两者有协同作用。这也说明在涎腺多形 性腺瘤中 ,野生型 p53 基因可能仍具有一定的抑癌 及诱导细胞凋亡的作用 ,bcl - 2 基因也未大量表达 , 故未显示明显抗凋亡作用。而当 p53 和 bcl - 2 基因 发生异常表达时 ,则促使肿瘤细胞恶性转化。表明 p53 和 bcl - 2 基因对涎腺多形性腺瘤的良恶性诊断 有重要的临床参考价值。 本文通过多元回归分析显示 ,c - erbB - 2 , H - ras ,p53 和 bcl - 2 这 4 种癌基因在涎腺多形性腺瘤 判定中 ,bcl - 2 意义最显著 ,这也说明在涎腺多形性 腺瘤中 bcl - 2 表达率越高则发展为恶性肿瘤的可 能性越大 ,它为涎腺多形性腺瘤的病理诊断提供参 考。 4 　参考文献 1 　Deguchi H ,Hamano H ,Heyashi Y. C - myc ,ras 21 and p53 expression in pleomorphic adenoma and its malignant form of the human salivary glands. Acta Pathola Jap ,1993 ,43 :413 - 414 2 　Xue H ,Situ Z ,Wang D et al . Overexpression and amplication of C - myc and C - Ha - ras oncogenes in pleomorphic sali2 vary adenoma. Chin Med J ,1993 ,106(1) :22 - 23 3 　蒋书勤 ,侯芝艳 ,孙保存 1 涎腺良性多形性腺瘤和恶性 多形性腺瘤中 c - erbB - 2 和 bcl - 2 蛋白产物的表达及 其意义 1 中国肿瘤临床 ,1998 ,25(5) :354 - 356 4 　Lamb P ,Crauford L. Characterization of humen p53 gene. Mol Cell Biol ,1986 ,6 :1 379 - 381 5 　Levine AJ ,Momand J , Finlay A. The p53 tumor suppressor gene. Nature ,1991 ,351 :453 - 455 ( 2003 - 03 - 21 收稿 ,责任编辑 　徐 　烨) 作者简介 :刘　莉 ,女 ,1973 年出生。本科学历 ,主治医师。主 要从事心血管内科的临床工作。 卡维地洛和科素亚对高血压左室肥厚 和 QT离散度的影响 刘 　莉1 　李 　卉2 　(1 武警云南总队医院内一科 ,昆明 650111 ;2 武警总医院干一科 ,北京 100039) 摘 　要 　目的 　观察卡维地洛联合科素亚对高血压病 ( EH) 左室肥厚和 QT离散度 (QTd) 的影响。方法 　84 例患者随机 分为L、B 两组 ,L 组口服科素亚 50 mg/ d ;B 组科素亚 50 mg/ d 合用卡维地洛 20 mg/ d。治疗前及治疗后 6 个月分别进行标准 12 导联心电图和心脏超声检查 ,测量 QT间期及有关心血管参数。结果 　L 组治疗后左心室重量指数 (LVMI) 减低 ( P < 0105) 、 QTd 缩短 ( P < 0105) ;B 组治疗后LVMI减低 ( P < 0101) 、QTd 缩短 ( P < 0101) ,两组间比较 LVMI 和 QTd 差异有显著性意义 ( P < 0105) ;治疗前后 QTd 与 LVMI呈正相关 (r = 0. 62 , P < 0105) 。结论 　科素亚和卡维地洛合用 ,有协同逆转左室肥厚并能 显著降低 QTd。 关键词 　高血压 　卡维地洛 　科素亚 　左心室肥厚 　QT离散度 Clinical efficacy of carvedilol and losartan in left ventricular hypertrophy and QT dispersion in essential hypertension LIU Li ,and LI Hui. The First Department of Internal Medicine ,Yunnan Provincial Corps Hospital , Chinese People’s Armed Po2 lice Forces , Kunming 650111 , China Abstract 　Objective 　To investigate the clinical efficacy of carvedilol combined with losartan in left ventricular hypertrophy and QT dis2 persity(QTd) in patients with essential hypertension. Methods 　Eighty2four patients with essential hypertension( EH) were randomly divided into two groups :group L and group B. Group L took losartan (50 mg/ d) and group B took losartan (50 mg/ d) plus carvedilol (20 mg/ d) . QT intervals (QT) were measured by using standard 12 - lead electrocardiagrams ,and cardiovascular parameters were determined by using Doppler echocardiography before treatment and 6 months after treatment. Results 　Left ventricular mass index (LVMI) declined in group L ( P < 0105) and group B ( P < 0101) . OTd decreased in group L ( P < 0105) and group B ( P < 0101) . Between groups L and B existed signigicant 564武警医学 (Medical Journal of the Chinese People’s Armed Police Forces) Vol. 14 No. 08 2003 - 08 出版 W w w . C a i y i f a . C o m