螺旋菌&军团杆菌

STEINER & STEINER 方法 – 螺旋菌& 军团杆菌 目的：螺旋菌是一种螺旋型的细菌，按体职、形状和鞭毛的不同可分为：密螺旋体引起：梅毒，雅司病和品他病；包柔氏螺旋体引起：莱姆关节炎。幽门弯曲杆菌、肺炎军团杆菌和猫爪抓伤症的病菌也能用此技术染色。 原理：细菌能从银溶液中吸收银，在还原剂的作用下，使用银转变成可见的金属形式。 对照：含有螺旋菌或军团菌的组织。 固定：10% 甲醛。 技术：4-5m石蜡切片。 设备：酸清洗玻璃器皿，染色缸，Whatman #4滤纸和微波炉。 试剂： 0.5% 硝酸铀酰: 硝酸铀酰Uranyl nitrate 0.5 gm 蒸馏水Distilled water 100.0 ml 混合溶解，盛于酸清洗过的瓶中。保存期1年。 警告：剧烈的刺激性，腐蚀性，可能致癌。 2% 对苯二酚： 对苯二酚Hydroquinone 0.5 gm 蒸馏水Distilled water 25.0 ml 新鲜配制。 警告：刺激性，可能致癌。 0.5%硝酸银： 硝酸银Silver nitrate 0.5 gm 蒸馏水Distilled water 100.0 ml 混合溶解，盛于酸清洗过的瓶中。保存期1年。 警告：剧烈的刺激性，腐蚀性，可能致癌。 10% 乳香备用液： 乳香Gum mastic 10.0 ml 无水酒精Absolute alcohol 100.0 ml 放置过夜溶解，#1滤纸过滤，存放于密封瓶中。 警告：易燃性。 2.5% 乳香液： 10% 乳香备用液Gum mastic stock 15.0 ml 无水酒精Absolute alcohol 75.0 ml Whatman #4滤纸过滤，保存期6个月。 警告：易燃性。 还原液： 2.5%乳香液gum mastic 15.0 ml 2%对苯二酚 hydroquinone 25.0 ml 0.5%硝酸银silver nitrate 0.6 ml 将乳香液加入对苯二酚，然后加入硝酸银。使用前新鲜配制。溶液为白色，不用过滤。用后丢弃。 警告：刺激性，可能致癌。 安全：穿戴手套、护目镜和白大衣。加热和打开盖的溶液保持在通风橱中。避免接触和吸入染料和化学品。 硝酸铀酰：剧烈的刺激性，高度毒性。影响靶器官为肝、泌尿、循环和呼吸系统，吸入粉尘时有放射危险。 硝酸银：对眼睛和皮肤有剧烈的刺激性。氧化剂，摄入可引起严重的胃肠不适。可能致癌，可疑的致癌因子。 对苯二酚：对眼睛和皮肤有刺激性。侵入途径为吸入和摄入。老鼠的慢性毒性实验可引起膀胱癌。 程序： 1. 脱蜡至蒸馏水。 2. 0.5% 硝酸铀酰，微波 70 power, 30 seconds。 3. 热蒸馏水洗数次。 4. 0.5%硝酸银，微波70 power, 40 seconds. 放置90 seconds，摇动。 5. 热蒸馏水洗数次。 6. 95% 酒精 2 changes. 7. 100% 酒精 2 changes. 8. 2.5%乳香 1 minute. 9. 还原液，微波 40 power, 30 seconds。摇动玻片，微波 40 power, 30 seconds. 放置2 minutes，或直至组织变为黄色或黄褐色。 10. 蒸馏水洗 3 changes。 11. 脱水透明和封固。 结果： 螺旋菌、军团杆菌和弧菌：黑色 背景：黄色 注意： 1. 使用酸清洗玻璃器皿，并确保用蒸馏水清洗过。 2. 1000 ml的蒸馏水微波 Hi power 5 minutes预热蒸馏水洗液。 参考文献： Churukian C, Dept Patho, University of Rochester Medical Center, Rochester, NY 14642, 1989 Crookham,J, Dapson,R, Hazardous Chemicals in the Histopathology Laboratory, 2nd ED, 1991, Anatech 程序卡 STEINER & STEINER 方法 – 螺旋菌& 军团杆菌 对照：含有螺旋菌或军团菌的组织。 技术：4-5m石蜡切片。 程序： 1. 脱蜡至蒸馏水。 2. 0.5% 硝酸铀酰，微波 70 power, 30 seconds。 3. 热蒸馏水洗数次。 4. 0.5%硝酸银，微波70 power, 40 seconds. 放置90 seconds，摇动。 5. 热蒸馏水洗数次。 6. 95% 酒精 2 changes. 7. 100% 酒精 2 changes. 8. 2.5%乳香 1 minute. 9. 还原液，微波 40 power, 30 seconds。摇动玻片，微波 40 power, 30 seconds. 放置2 minutes，或直至组织变为黄色或黄褐色。 10. 蒸馏水洗 3 changes。 11. 脱水透明和封固。 结果： 螺旋菌、军团杆菌和弧菌：黑色 背景：黄色 0.5% 硝酸铀酰: 硝酸铀酰Uranyl nitrate 0.5 gm 蒸馏水Distilled water 100.0 ml 混合溶解，盛于酸清洗过的瓶中。保存期1年。 警告：剧烈的刺激性，腐蚀性，可能致癌。 0.5%硝酸银： 硝酸银Silver nitrate 0.5 gm 蒸馏水Distilled water 100.0 ml 混合溶解，盛于酸清洗过的瓶中。保存期1年。 警告：剧烈的刺激性，腐蚀性，可能致癌。 2% 对苯二酚： 对苯二酚Hydroquinone 0.5 gm 蒸馏水Distilled water 25.0 ml 新鲜配制。 警告：刺激性，可能致癌。 还原液： 2.5%乳香液gum mastic 15.0 ml 2%对苯二酚 hydroquinone 25.0 ml 0.5%硝酸银silver nitrate 0.6 ml 将乳香液加入对苯二酚，然后加入硝酸银。使用前新鲜配制。溶液为白色，不用过滤。用后丢弃。 警告：刺激性，可能致癌。 10% 乳香备用液： 乳香Gum mastic 10.0 ml 无水酒精Absolute alcohol 100.0 ml 放置过夜溶解，#1滤纸过滤，存放于密封瓶中。 警告：易燃性。 日期： 技师： 使用限期： 2.5% 乳香液： 10% 乳香备用液Gum mastic stock 15.0 ml 无水酒精Absolute alcohol 75.0 ml Whatman #4滤纸过滤，保存期6个月。 警告：易燃性。 日期： 技师： 使用限期： 还原液： 2.5%乳香液gum mastic 15.0 ml 2%对苯二酚 hydroquinone 25.0 ml 0.5%硝酸银silver nitrate 0.6 ml 将乳香液加入对苯二酚，然后加入硝酸银。使用前新鲜配制。溶液为白色，不用过滤。用后丢弃。 警告：刺激性，可能致癌。 日期： 技师： 使用限期： 0.5% 硝酸铀酰: 硝酸铀酰Uranyl nitrate 0.5 gm 蒸馏水Distilled water 100.0 ml 混合溶解，盛于酸清洗过的瓶中。保存期1年。 警告：剧烈的刺激性，腐蚀性，可能致癌。 日期： 技师： 使用限期： 0.5%硝酸银： 硝酸银Silver nitrate 0.5 gm 蒸馏水Distilled water 100.0 ml 混合溶解，盛于酸清洗过的瓶中。保存期1年。 警告：剧烈的刺激性，腐蚀性，可能致癌。 日期： 技师： 使用限期：