HPLC测定复方氨酚苯海拉明片中对乙酰氨基酚和咖啡因含量

HPLC测定复方氨酚苯海拉明片中对乙酰氨基酚和咖啡因含量 HPLC测定复方氨酚苯海拉明片中对乙酰 氨基酚和咖啡因含量 两北药学杂志2006年10月第21卷第5期 2.2溶液的配制 2.2.1对照品溶液的制备精密称取维生素Bz对 照品适量,加流动相溶液制成每lmL含0.1mg的 溶液,即得. 2.2.2供试品溶液的制备取本品,研细,取约0.5 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入醋酸钠溶液 l0mL,超声处理30min,放冷,再称定质量,用醋酸 钠溶液补足减失的质量,摇匀,滤过,即得. 2.3空白干扰试验按处方组成量依工艺及制法制 成缺维生素B的空白样品,同供试品溶液制备方法 制得空白对照进样.结果空白对照溶液在与对照品 溶液色谱保留时问相应的位置上无其它色谱峰出现, 说明其它成分,对维生素B无干扰. 2.4线性关系考察取维生素B对照品溶液 (0.12g?L一)适量,分别精密吸取l,2,4,6和8mL 置l0mL量瓶中,分别加流动相溶液稀释成质量浓 度为0.0l2,0.024,0.048,0.072和0.096g?L标 准溶液,依法测定,以维生素B峰面积(y)对进样浓 度(X)进行回归,得回归方程:Y—1.64×l0X— l5606.195l,r一0.9995,维生素Bz在0.012, 0.096g?I,范围内呈良好的线性关系. 2.5稳定性试验取同一批供试品(产品批号: 050101)溶液,分别在0,l,4,8和10h注入液相色谱 仪测定峰面积,结果RSD1.9,明供试品溶液在 10h内稳定. 2.6精密度试验取维生素B对照品溶液30.2 mg?L溶液各l0L,连续5次注入液相色谱仪, 测定峰面积,结果RSD1.7,说明仪器的精密度较 好. 2.7重现性试验同一批供试品(050101)6份按含 量测定方法测定,RSD1.8%,说明方法的重现性好. 2.8加样回收试验精密称取维生素B对照品适 量,加入已知含量的样品(约为测定方法中样品的半 量)中,按含量测定方法测定,计算回收率,结果见表 1,说明本方法回收率较好,方法可行. 表1回收率试验结果 宇号翟测'mgc含量mg品量/mg()率(),… 2.9样品测定依法对3批复方锌铁钙颗粒中维生 素B:测定,结果见表2. 表23批复方锌铁钙颗粒中维生素B含量测定结果 3结论与讨论 ?根据维生素B的紫外线吸收图谱,维生素B 在276,375与444nm波长处均有最大吸收,为避免 其他组分的干扰,所以选用紫外光区中接近375nm 的358nm作为检测波长. ?维生素B在水中不溶而溶于稀碱溶液,但在 稀碱溶液中不稳定,参考文献]维生素B片溶出度 测定法,选择醋酸钠溶液作为维生素B的溶剂. ?维生素B的性质不稳定,故选择其溶剂与甲 醇系统作为流动相.通过调整其溶剂与甲醇比例,使 样品峰保留时间合理,其他组分不干扰.确定醋酸钠 溶液(用冰醋酸3mL和40g?L.的氢氧化钠l8mL 加水至600mL)一甲醇(65:35)为流动相. ?本方法测定复方锌铁钙颗粒中维生素B的含 量,简便易行,可作为控制该制剂质量的方法. 参考文献: [1]中国药典2000年版[S].二部.2000.786—787. (收稿日期:2005—12-22) HPLC测定复方氨酚苯海拉明片中 对乙酰氨基酚和咖啡因含量 郑琰,李荣华,王继玉(1.辽宁省朝阳市药品检验 所;2.辽宁省朝阳市第二医院,辽宁朝阳122000) 摘要:目的建立高效液相色谱法测定复方氨酚苯海 拉明片中对乙酰氨基酚和咖啡因的含量.方法采 用KromasilCl8色谱柱(4.5mm×l50mm,5um),流 动相为甲醇一水(30:70),流速为1.0mL?min,检 测波长为280nm,柱温为室温,进样体积为20"L. 结果对乙酰氨基酚和咖啡因的线性范围分别为80 , 320mg?L(r一0.9997,一7)和l0, 30mg?L(r一0.9997,一5);高中低3种浓度的 平均回收率分别为100.7(RSD一0.69), 101.3(RSD一0.53),一9.结论本方法简便, 准确,灵敏,回收率高. 关键词:HPLC;对乙酰氨基酚;咖啡因;含量测定 中图分类号:R927.2文献标识码:A 文章编号:l004—2407(2006)05—0l99—03 8 ? l 9 ?8 9 ;iO ;} ..1.. O ;i ;; ;{3 il ????,?;; ii 10lnl020 ????'? ; ii ;i ????,? ;i 1l0:?一^^b 200西北药学杂志2006年10月第21卷第5期 复方氨酚苯海拉明片原名咳喘感冒片,是一种解 热镇痛药,现被收载于《国家药品》化学药品地方 标准上升国家标准)第十一册,对乙酰氨基酚及咖啡 因含量均采用紫外吸收法,其中咖啡因还需用氯仿提 取. 笔者参考有关资料,建立HPLC法,在该复方制 剂中.同时分离和测定对乙酰氨基酚和咖啡因两种成 分,方法简便,准确,灵敏度高,重现性好. 1仪器与试药 1.1仪器美国Spectra—Physics公司高效液相色 谱仪(SP8810LCpump;Spectra100UV—VisDetec— tor;N2010色谱工作站);紫外一可见分光光度计;上 海SP2200超声仪;微孔滤膜(0.45m);电子天平: (万分之一,DF160A,十万分之一,BP211D). 1.2试药对乙酰氨基酚对照品(批号10018— 20017,中国药品生物制品检定所);咖啡因对照品 (批号1215—0104,中国药品生物制品检定所);复方 氨酚苯海拉明片(批号040301,吉林辽源亚东药业 股份有限公司;批号20030501,吉林银河制药厂;批 号030701,通化鸿淘茂药业有限公司);甲醇为色谱 纯,其它试剂为纯,水为重蒸馏水. 2方法与结果 2.1色谱条件色谱柱:KromasilC184.5mm× 150mm,5m(天津特纳科学仪器有限公司);进样 造20L(7125i型六通阀定量管进样器);流动相:甲 醇一水(30:70);流速:1.0mL?min'.;检测波长:280 tim;柱温:室温;检测灵敏度:0.01AUFS. 2.2线性范围 2.2.1对乙酰氨基酚标准曲线取105?干燥至恒 重的对乙酰氨基酚对照品0.2g,精密称定,置100 mL量瓶中,加(9—1000)盐酸液70mL,超声5min, 溶解并稀释至刻度,摇匀,作贮备液.精密量取1.0, 1.5,2.0,2.5,3.0,3.5和4.0mL,分别置25mL量 瓶中,用(9—1000)盐酸液稀释至刻度,摇匀,依次进 样20L,按上述色谱条件,测定峰面积,以峰面积 (A)与对乙酰氨基酚质量浓度(C)进行线性回归,得 【_J]归方程为A一2402.125C,1552r=0.9997,对 乙酰氨基酚在80,320mg?L质量浓度范围呈良 好线性关系. 2.2.2咖啡因标准曲线取105?干燥至恒重的咖 啡因对照品50mg,精密称定,置100mL量瓶中,加 (9—1000)盐酸液70mL,超声5min,溶解并稀释至 刻度,摇匀,作贮备液.精密量取1.0,1.5,2.0,2.5 和3.0mI,分别置50mL量瓶中,用(9—1000)盐酸 液稀释至刻度,摇匀,依次进样20L,按上述色谱条 件,测定峰面积,以峰面积(A)与咖啡因质量浓度(C) 进行线性回归,得回归方程为A一45831+ 7817.88Cr一0.9997,咖啡因在10,30mg?L. 质量浓度范围呈良好线性关系. 2.3精密度试验精密量取对乙酰氨基酚对照品贮 备液5mL和咖啡因对照品贮备液2mL,置50mL 量瓶中,用(9—1000)盐酸液稀释至刻度,摇匀,进样 2OL,重复进样6次,按上述色谱条件及方法分别计 算峰面积,对乙酰氨基酚RSD为0.36,咖啡因 RSD为0.068. 2.4专属性按片剂处方比例取相应的盐酸苯海拉 明,盐酸麻黄碱及辅料,按照2.7项下方法制备阴性 溶液,取20L测定.结果表明阴性溶液在此条件 下,对对乙酰氨基酚及咖啡因无干扰,色谱图见图1. ' 九 ——— , !.—一—— —— :_一———{一———— 23 ,/131in C 图1高效液相色谱图 A一对照品;B一样品;C-阴性溶液; 卜对乙酰氨基酚;2-咖啡因 2.5重复性试验精密称定040301批号的样品6 份,按照2.7项下方法进行测定,结果对乙酰氨基酚 RSD为0.8,咖啡因RSD为0.9. 2.6回收率试验采用加样回收法,精密称取已知 含量的片剂(批号040301,对乙酰氨基酚含量 98.2,咖啡因含量99.2)细粉适量(约相当于对 乙酰氨基酚150mg)9份,分成3组,分别精密加入一 定量的对乙酰氨基酚和咖啡因,按2.7项下方法进行 试验测定,计算回收率,结果见表1. 西』七药学杂志2006年10月第21卷第5期2O1 表1回收率试验结果(,l:3) 2.7样品测定 2.7.1对照品溶液制备精密量取对乙酰氨基酚对 照品贮备液5mI和咖啡因贮备液2mL,置50mI 量瓶中,用(9—1000)盐酸液稀释至刻度,摇匀. 2.7.2供试品溶液制备取本品10片,精称研细, 精密称定(相当于对乙酰氨基酚200rag)适量,置100 mI量瓶中,加(9—1000)盐酸液70mL,超声5min, 溶解并稀释至刻度,摇匀,滤过,弃初滤液,精密量取 续滤液5m1,置5OmL量瓶中,加(9—1000)盐酸液 稀释至刻度,摇匀. 2.7.3测定量取供试液与对照液各20J上L注入色 谱仪测定,按外标法以峰面积计算含量,同时与《国家 药品标准》中方法进行比较,结果见表2. 表2样品含量测定结果I标示量%,,l一3) 3讨论 ?吸收波长的选择由于复方氨酚苯海拉明片 中咖啡因较对乙酰氨基酚含量低10倍,先用紫外分 光光度计将适当浓度的咖啡因(9—1000)盐酸液在 350,2O0nm波长范围内扫描.结果显示,咖啡因在 274nm处有最大吸收,因此,选择280nm为HPLC 法测定波长,在此波长下检测,提高咖啡因灵敏度. ?按上述色谱条件,对乙酰氨基酚和咖啡因与其 它杂质及组分均能与基线分离,且两峰分离度大于 1.5,理论板数以对乙酰氨基酚计大于7000. ?本方法简便,灵敏,准确,重现性好. 参考文献: [1]伏光华,娄平,孙成秀.HPIC测定复方大青叶片中对 乙酰氨基酚和咖啡因含量EJ3.中国药事,2003,17(2): 116. [2]《国家药品标准》(化学药品地方标准上升国家标准) [s3.第十六册.184. (收稿日期:2005—11-25) 气相色谱法测定蒺藜提取物中的有 机残留量 张静资,张利,郭倩,李芳,白西仓,黄伟 (1.西安天健医药科学研究所,陕西西安710075;2.咸阳市 第一人民医院,陕西咸阳712000) 摘要:目的测定蒺藜提取物中有机残留物正己烷, 苯,甲苯,二甲苯,苯乙烯和二乙烯苯的含量.方法 采用气相色谱法,PEG,20M填充柱(3.0mm×2 m);柱温:100.C;氢火焰检测器(FID),温度:220 ?;载气:氮气;灵敏度:101;进样量:顶空进样1mL. 结果3批样品中6种有机残留量均符合要求.结 论该方法灵敏,准确,可靠,适用于本品有机残留量 的检查. 关键词:气相色谱法;蒺藜提取物;有机残留物;顶空 进样法 中图分类号:R917文献标识码:A 文章编号:1004—2407(2006)05—0201-03 蒺藜提取物为本研究所自行研制的新药,由中药 蒺藜(TribulusterrestrisL.)经提取,加工制成,具有 活血化瘀,行气止痛的功效,用于胸痹心痛,心血瘀阻 证及冠心病心绞痛等证.在其纯化过程中应用了 AB-8型大孑L吸附树脂,由于大孑L吸附树脂是一种高 分子聚合物,其成品中可能残留正己烷,苯,甲苯,二 甲苯,苯乙烯和二乙烯苯等对人体有害的有机物,为 保证本品的安全,可控,笔者采用GC法测定了其限 量,对其残留物加以控制.结果表明该方法分离度 高,结果可靠,可用于蒺藜提取物的质量控制. 1仪器与试药. 日本岛津GC一14A型气相色谱仪;FID检测器; FRANK一2000型汉化色谱工作站(大连瑞丰科技发 展有限公司);Agilent7694E顶空进样器.正己烷, 苯,甲苯,二甲苯,苯乙烯和二乙烯苯,密度分别为: