齐墩果酸和熊果酸的人肝微粒体代谢研究（可编辑）

齐墩果酸和熊果酸的人肝微粒体代谢研究（可编辑） 齐墩果酸和熊果酸的人肝微粒体代谢研究 猿 远 愿 摇 军 事 医 学 摇 圆园员圆 年 缘 月 第 猿远 卷 第 缘 期 摇 酝 蚤 造 酝 藻 凿 杂糟 蚤 , 灾 燥 造 猿远 , 晕 燥 缘 , 酝 葬 赠 , 圆园员圆 摇 齐墩果酸和熊果酸的人肝微粒体代谢研究 员 , 圆 圆 猿 猿 圆 王 亚 平 , 胡 摇 园 , 董 瑞 华 , 刘 泽 源 , 刘 皈 阳 [ 摘 要 ] 摇 目 的 摇 研究齐墩果酸和熊果酸的体外代谢差异, 对参与熊果酸 代谢的细胞色素 孕 源 缘 园 酶 进 行 鉴 定 。 方 法 摇 考 察 齐墩果酸在人肝微粒体孵育体系中的代谢稳定 性; 采用 怨 种 细 胞 色 素 孕 源 缘 园 ( 悦 再 孕 ) 选择性抑制剂和 员 源 种 人 重 组 悦 再 孕 单酶分别与熊果酸共孵育, 利用高效液相法检测熊果酸及代谢产物的含 量, 并且测定相关动力学参数 运 和 皂 灾 。 结 果 摇 齐墩果酸在人肝微粒体中不代谢 , 熊果酸在人肝微粒体和人重组 悦 再 孕 单酶中的动力学行为符合米氏 皂 葬 曾 动 力 学 行 为 , 悦 再 孕 猿 粤 源 和 悦 再 孕 圆 悦 怨 参与了熊果酸的代谢。 结 论 摇 本研究阐述了齐墩果酸和熊果酸的体外代谢规 律, 尤其是熊果酸的细胞色素 孕 源 缘 园 代谢酶, 丰富了五环三萜类化合物的药物代谢研究。 [ 关 键 词 ] 摇 齐 墩 果 酸 ; 熊 果 酸 ; 体 外 代 谢 ; 悦 再 孕 猿 粤 源 ; 悦 再 孕 圆 悦 怨 [ 中 图 分 类 号 ] 摇 砸 怨 远 怨 援 员 [ 文 献 标 志 码 ] 摇 粤 [ 文 章 编 号 ] 摇 员 远 苑 源 鄄 怨 怨 远 园 ( 圆 园 员 圆 ) 园 缘 鄄 园 猿 远 愿 鄄 园 缘 陨 灶 增蚤 贼 则 燥 皂 藻贼 葬遭 燥造 蚤 泽 皂 燥枣 燥造 藻葬灶 燥造 蚤 糟 葬糟蚤 凿 葬灶 凿 怎 则泽 燥造 蚤 糟 葬糟蚤 凿 蚤 灶 澡 怎 皂 葬灶 造 蚤 增藻则 皂 蚤 糟则燥泽 燥皂 藻泽 员 , 圆 圆 猿 猿 圆? 宰 粤 晕 郧 再 葬 鄄 责蚤 灶早 , 匀 哉 再 怎葬灶 , 阅 韵 晕 郧 砸 怎蚤 鄄 澡怎葬 , 蕴陨 哉 在 藻 鄄 赠怎葬灶 , 蕴陨 哉 郧 怎蚤 鄄 赠葬灶早 ( 员 援 匀 藻 遭 藻 蚤 晕 燥 则 贼 澡 哉 灶 蚤 增 藻 则 泽 蚤 贼 赠 , 在 澡 葬 灶 早 躁 蚤 葬 噪 燥 怎 , 匀 藻 遭 藻 蚤 园 苑 缘 园 园 园 , 悦 澡 蚤 灶 葬 ; 圆 援 阅 藻 责 葬 则 贼 皂 藻 灶 贼 燥 枣 孕 澡 葬 则 皂 葬 糟 藻 怎 贼 蚤 糟 葬 造 悦 葬 则 藻 , 悦 澡 蚤 灶 藻 泽 藻 孕 蕴 粤 郧 藻 灶 藻 则 葬 造 匀 燥 泽 责 蚤 贼 葬 造 , 月 藻 蚤 躁 蚤 灶 早 员 园 园 愿 缘 猿 , 悦 澡 蚤 灶 葬 ; 猿 援 阅 藻 责 葬 则 贼 皂 藻 灶 贼 燥 枣 悦 造 蚤 灶 蚤 糟 葬 造 孕 澡 葬 则 皂 葬 糟 燥 造 燥 早 赠 , 粤 枣 枣 蚤 造 蚤 葬 贼 藻 凿 匀 燥 泽 责 蚤 贼 葬 造 , 粤 糟 葬 凿 藻 皂 赠 燥 枣 酝 蚤 造 蚤 贼 葬 则 赠 酝 藻 凿 蚤 糟 葬 造 杂 糟 蚤 藻 灶 糟 藻 泽 , 月 藻 蚤 躁 蚤 灶 早 员 园 园 园 苑 员 , 悦 澡 蚤 灶 葬 ) ? 悦 燥 则 则 藻 泽 责燥 灶凿蚤 灶早 葬 怎贼 澡燥 则 , 栽 藻 造 : 园员园 鄄 远远愿远苑园愿员 , 耘 鄄 皂 葬 蚤 造 : 造 蚤 怎早 怎蚤 赠 岳 早 皂 葬 蚤 造 援 糟 燥 皂 [ 粤 遭 泽 贼 则 葬 糟 贼 ] 摇 韵 遭 躁 藻 糟 贼 蚤 增 藻 摇 栽 燥 糟 燥 皂 责 葬 则 藻 贼 澡 藻 皂 藻 贼 葬 遭 燥 造 蚤 泽 皂 燥 枣 燥 造 藻 葬 灶 燥 造 蚤 糟 葬 糟 蚤 凿 葬 灶 凿 怎 则 泽 燥 造 蚤 糟 葬 糟 蚤 凿 , 葬 灶 凿 贼 燥 糟 澡 葬 则 葬 糟 贼 藻 则 蚤 扎 藻 贼 澡 藻 澡 怎 皂 葬 灶 造 蚤 增 鄄 藻 则 糟 赠 贼 燥 糟 澡 则 燥 皂 藻 泽 孕 源 缘 园 藻 灶 扎 赠 皂 藻 泽 则 藻 泽 责 燥 灶 泽 蚤 遭 造 藻 枣 燥 则 贼 澡 藻 皂 藻 贼 葬 遭 燥 造 蚤 泽 皂 燥 枣 怎 则 泽 燥 造 蚤 糟 葬 糟 蚤 凿 援 酝 藻 贼 澡 燥 凿 泽 摇 栽 澡 藻 皂 藻 贼 葬 遭 燥 造 蚤 泽 皂 泽 贼 葬 遭 蚤 造 蚤 贼 赠 燥 枣 燥 造 藻 葬 灶 燥 造 鄄 蚤 糟 葬 糟 蚤 凿 蚤 灶 澡 怎 皂 葬 灶 造 蚤 增 藻 则 皂 蚤 糟 则 燥 泽 燥 皂 藻 泽 憎 葬 泽 贼 藻 泽 贼 藻 凿 援 哉 则 泽 燥 造 蚤 糟 葬 糟 蚤 凿 葬 灶 凿 蚤 贼 泽 皂 藻 贼 葬 遭 燥 造 蚤 贼 藻 泽 憎 藻 则 藻 凿 藻 贼 藻 则 皂 蚤 灶 藻 凿 遭 赠 匀 孕 蕴 悦 葬 枣 贼 藻 则 蚤 灶 糟 怎 遭 葬 贼 蚤 燥 灶 憎 蚤 贼 澡 泽 藻 造 藻 糟 贼 蚤 增 藻 糟 赠 贼 燥 糟 澡 则 燥 皂 ( 藻 悦 再 孕 ) 蚤 灶 澡 蚤 遭 蚤 贼 燥 则 泽 蚤 灶 澡 怎 皂 葬 灶 造 蚤 增 藻 则 皂 蚤 糟 则 燥 泽 燥 皂 藻 泽 燥 则 澡 怎 皂 葬 灶 糟 阅 晕 粤 鄄 藻 曾 责 则 藻 泽 泽 藻 凿 悦 再 孕 藻 灶 扎 赠 皂 藻 泽 援 栽 澡 藻 噪 蚤 灶 藻 贼 鄄 蚤 糟 责 葬 则 葬 皂 藻 贼 藻 则 泽 运 葬 灶 凿 灾 憎 藻 则 藻 葬 造 泽 燥 糟 葬 造 糟 怎 造 葬 贼 藻 凿 援 砸 藻 泽 怎 造 贼 泽 摇 韵 造 藻 葬 灶 燥 造 蚤 糟 葬 糟 蚤 凿 糟 燥 怎 造 凿 灶 燥 贼 遭 藻 皂 藻 贼 葬 遭 燥 造 蚤 扎 藻 凿 遭 赠 糟 赠 贼 燥 糟 澡 则 燥 皂 藻 泽 孕 源 缘 园 皂 皂 葬 曾 藻 灶 扎 赠 皂 藻 泽 援 悦 再 孕 猿 粤 源 葬 灶 凿 悦 再 孕 圆 悦 怨 憎 藻 则 藻 蚤 凿 藻 灶 贼 蚤 枣 蚤 藻 凿 葬 泽 贼 澡 藻 皂 葬 躁 燥 则 藻 灶 扎 赠 皂 藻 泽 则 藻 泽 责 燥 灶 泽 蚤 遭 造 藻 枣 燥 则 贼 澡 藻 皂 藻 贼 葬 遭 燥 造 蚤 泽 皂 燥 枣 怎 则 泽 燥 造 蚤 糟 葬 糟 蚤 凿 援 悦 燥 灶 糟 造 怎 泽 蚤 燥 灶 摇 栽 澡 藻 皂 藻 贼 葬 遭 燥 造 蚤 泽 皂 燥 枣 燥 造 藻 葬 灶 燥 造 蚤 糟 葬 糟 蚤 凿 葬 灶 凿 怎 则 泽 燥 造 蚤 糟 葬 糟 蚤 凿 , 藻 泽 责 藻 糟 蚤 葬 造 造 赠 贼 澡 藻 皂 藻 贼 葬 遭 燥 造 蚤 泽 皂 燥 枣 糟 赠 贼 燥 糟 澡 则 燥 皂 藻 孕 源 缘 园 藻 灶 扎 赠 皂 藻 泽 燥 枣 怎 则 泽 燥 造 蚤 糟 葬 糟 蚤 凿 , 葬 则 藻 糟 造 葬 则 蚤 枣 蚤 藻 凿 蚤 灶 贼 澡 蚤 泽 泽 贼 怎 凿 赠 泽 燥 贼 澡 葬 贼 贼 澡 藻 责 澡 葬 则 皂 葬 糟 燥 噪 蚤 灶 藻 贼 蚤 糟 泽 贼 怎 凿 赠 燥 枣 责 藻 灶 贼 葬 糟 赠 糟 造 蚤 糟 贼 则 蚤 贼 藻 则 责 藻 灶 藻 泽 蚤 泽 枣 葬 糟 蚤 造 蚤 贼 葬 贼 藻 凿 援 [ 运 藻 赠 憎 燥 则 凿 泽 ] 摇 燥 造 藻 葬 灶 燥 造 蚤 糟 葬 糟 蚤 凿 ; 怎 则 泽 燥 造 蚤 糟 葬 糟 蚤 凿 ; 蚤 灶 增 蚤 贼 则 燥 皂 藻 贼 葬 遭 燥 造 蚤 泽 皂 ; 悦 再 孕 猿 粤 源 ; 悦 再 孕 圆 悦 怨 摇 摇 齐 墩 果 酸 ( 燥造 藻葬灶燥造 蚤 糟 葬糟蚤 凿 ) 和 熊 果 酸 ( 怎则 泽 燥造 蚤 糟 药代动力学及药物代谢方面的研究相对较少。 人 肝 [ 员 员 ] 葬糟蚤 凿 ) 是 一 对 同 分 异 构 体 , 属 于 五 环 三 萜 类 化 合 物 , 微粒体体外代谢试验研究 发 现 , 齐墩果酸可抑制 细 胞 色 素 孕 ( 悦 再 孕 ) 员 粤 圆 和 悦 再 孕 猿 粤 源 的 活 性 , 熊 果 酸 广泛存在于白 花 蛇 舌 草、 连 翘 、 冬 凌 草 、 女 贞 子 等 药 [ 员 , 圆 ] [ 猿 ] 可 抑 制 悦 再 孕 圆 悦 员怨 的 活 性 , 至 于 它 们 是 否 通 过 悦 再 孕 用 植 物 中 , 具有多种生物 学 活 性, 如 保 肝 、 抗 [ 源 ] [ 缘 , 远 ] [ 苑 ] [ 愿 ] 酶代谢, 尚未见文献报道。 炎 、 抗 肿 瘤 、 抗 匀 陨 灾 、 抗 糖 化 作 用 、 抗 氧 [ 怨 ] 为了深入了解齐墩果酸和熊果酸的代谢性 质, 化 等 。 由于它们的结 构 类 似, 仅 存 在 耘 环 的 甲 基 本研究对齐墩果酸和熊果酸在人肝微粒体孵育液中 异构, 因此常常 将它们放在一起进行比较研 究。 目 的代谢稳定性、 代谢酶及其动力学参数进行了测定。 前国内外对二者的研究主要集中在植物化 学、 药 理 [ 员 园 ] 作 用 机 制 、 药理活性和构效关系等方面 , 有 关 其 员 摇 材 料 与 方 法 员 援 员 摇 仪 器 和 试 剂 [ 作 者 简 介 ] 摇 王 亚 平 , 女 , 硕 士 研 究 生 。 研 究 方 向 : 药 理 学 。 栽 藻 造 : 高 效 液 相 色 谱 仪 ( 宰 葬贼 藻则 泽 圆远怨园 系 列 , 置 员愿苑园员缘圆缘缘圆怨 , 耘 鄄 皂 葬 蚤 造 : 憎 葬 灶早 赠 葬 责蚤 灶早 员园园怨 岳 员远猿 援 糟 燥 皂 [ 作 者 单 位 ] 摇 员 援 河 北 北 方 学 院 , 河 北 张 家 口 摇 园苑缘园园园 ; 圆 援 解 放 军 总 宰 葬贼 藻则 泽 怨怨远 二极管阵列检测器, 美国沃特斯公 司 ) , 医 院 药 品 保 障 中 心 , 北 京 摇 员园园愿缘猿 ; 猿 援 军事医学科学院附属医院 临 床 运 则 燥泽 皂 葬蚤 造 员园园 鄄 缘 悦 员愿 型 色 谱 柱 ( 圆缘园 皂 皂 伊 源 援 远 皂 皂 , 药 理 室 , 北 京 摇 员园园园苑员 万方数据 缘 皂 , 迪 马 科 技 公 司 ) , 猿 鄄 员愿 运 型高速冷冻离心机 [ 通 讯 作 者 ] 摇 刘皈阳, 栽 藻 造 : 园 员 园 鄄 远 远 愿 远 苑 园 愿 员 , 耘 鄄 皂 葬 蚤 造 : 造 蚤 怎 早 怎 蚤 赠 岳 早 皂 葬 蚤 造 援 糟 燥 皂 μ 书 书猿 远 怨 摇 军 事 医 学 摇 圆园员圆 年 缘 月 第 猿远 卷 第 缘 期 摇 酝 蚤 造 酝 藻 凿 杂糟 蚤 , 灾 燥 造 猿远 , 晕 燥 缘 , 酝 葬 赠 , 圆园员圆 摇 分 别 加 入 不 同 的 悦 再 孕 特 异 性 抑 制 剂 。 怨 种 主 要 悦 再 孕 的选择 性抑制剂及其浓度分别 为: 员 鄄 氨 基 苯 并 三 唑 ( 缘 园 园 μ 皂 燥 造 辕 蕴 , 悦 再 孕 广 谱 抑 制 剂 鄄 悦 再 孕 泽 ) , 呋 拉 茶 碱 ( 员 园 μ 皂 燥 造 辕 蕴 , 抑 制 悦 再 孕 员 粤 圆 ) , 甲 氧 沙 林 ( 圆 援 缘 μ 皂 燥 造 辕 蕴 , 抑 制 悦 再 孕 圆 粤 远 ) , 槲 皮 素 ( 员 园 皂 燥 造 辕 蕴 , 抑 制 悦 再 孕 圆 悦 愿 ) , μ 磺 胺 苯 吡 唑 ( 员 园 皂 燥 造 辕 蕴 , 抑 制 悦 再 孕 圆 悦 怨 ) , 奎 尼 丁 μ 图 员 摇 齐 墩 果 酸 ( 粤 ) 和 熊 果 酸 ( 月 ) 的 结 构 式 ( 员 园 皂 燥 造 辕 蕴 , 抑 制 悦 再 孕 圆 阅 远 ) , 氯 美 噻 唑 ( 缘 园 皂 燥 造 辕 蕴 , μ μ 抑 制 悦 再 孕 圆 耘 员 ) , 克 拉 霉 素 ( 员 园 μ 皂 燥 造 辕 蕴 , 抑 制 ( 德 国 杂蚤 早皂 葬 公 司 ) , 酝 杂 鄄 员园园 型 恒 温 混 匀 仪 ( 杭 州 奥 悦 再 孕 猿 粤 源 ) 及 奥 美 拉 唑 ( 抑 制 悦 再 孕 圆 悦 员 怨 , 员 园 μ 皂 燥 造 辕 蕴 ) 。 盛 仪 器 公 司 ) 。 员 鄄 氨 基 苯 并 三 唑 、 呋 拉 茶 碱 , 甲 氧 沙 林 , 是 基 于 机 制 齐 墩 果 酸 、 熊 果 酸 、 员 鄄 氨 基 苯 并 三 唑 ( 员 鄄 葬皂 蚤 灶燥鄄 [ 员 猿 耀 员 缘 ] 的 抑 制 剂 , 与 人 肝 微 粒 体 、 缓 冲 液 和 晕 粤 阅 孕 匀 遭藻灶扎 燥贼 则 蚤 葬扎 燥造 藻 , 粤 月 栽 ) 、 呋 拉 茶 碱 ( 枣 怎则 葬枣 赠造 造 蚤 灶藻 ) 、 甲 氧 沙 产 生 体 系 在 猿苑 益 孵 育 圆园 皂 蚤 灶 后, 加入熊果酸起始反 林 ( 愿 鄄 甲 氧 补 骨 脂 素 皂 藻贼 澡燥曾泽 葬造 藻灶 , 愿 鄄 皂 藻贼 澡燥曾赠责泽 燥则 鄄 应 。 以未加入抑制剂的孵育样品中熊果酸的产物生 葬造 藻灶 ) 、 槲 皮 素 ( 择怎藻则 糟藻贼 蚤 灶 ) 、 磺 胺 苯 吡 唑 ( 泽 怎造 枣 葬鄄 成 量 记 为 员园园 豫 , 计 算 怨 种抑制剂对熊果酸代谢的 责澡藻灶葬扎 燥造 藻 ) 、 奎 尼 丁 ( 择怎蚤 灶蚤 凿蚤 灶藻 ) 、 克 拉 霉 素 ( 糟造 葬则 蚤 贼 澡则 燥鄄 抑 制 率 。 皂 赠糟蚤 灶 ) 、 氯 美 噻 唑 ( 糟造 燥皂 藻贼 澡蚤 葬扎 燥造 藻 ) 、 奥 美 拉 唑 ( 燥皂 藻鄄 员 援 圆 援 猿 摇 人 重 组 悦 再 孕 泽 酶与熊果酸的反应 摇 采 用 的 责则 葬扎 燥造 藻 ) 、 阅 鄄 葡 萄 糖 鄄 远 鄄 磷 酸 ( 阅 鄄 早造 怎糟燥泽 藻 鄄 远 鄄 责澡燥泽 责澡葬贼 藻 , 悦 再 孕 亚 型 包 括 悦 再 孕 员 粤 员 、 悦 再 孕 员 粤 圆 、 悦 再 孕 圆 粤 远 、 郧 鄄 远 鄄 孕 ) 、 葡 萄 糖 鄄 远 鄄 磷 酸 脱 氢 酶 ( 早造 怎糟燥泽 藻 鄄 远 鄄 责澡燥泽 责澡葬贼 藻 悦 再 孕 员 月 员 、 悦 再 孕 圆 月 远 、 悦 再 孕 圆 悦 愿 、 悦 再 孕 圆 悦 怨 、悦 再 孕 圆 悦 员愿 、 责凿藻澡赠凿则 燥早藻灶葬泽 藻 , 郧 鄄 远 鄄 孕 阅 匀 ) 、 氧 化 性 辅 酶? (β 鄄 灶蚤 糟燥鄄 悦 再 孕 圆 悦 员怨 、 悦 再 孕 圆 阅 远 、 悦 再 孕 圆 耘 员 、 悦 再 孕 猿 粤 源 、 悦 再 孕 猿 粤 缘 、 垣 贼 蚤 灶葬皂 蚤 凿藻 葬凿藻灶蚤 灶藻 凿蚤 灶怎糟造 藻燥贼 蚤 凿藻 责澡燥泽 责澡葬贼 藻 , 晕 粤 阅 孕 ) 均 悦 再 孕 猿 粤 苑 。所采用的 孵育体系与人肝 微 粒 体 孵 育 体 购 自 杂蚤 早皂 葬 公 司 。 混 合 人 肝 微 粒 体 ( 澡怎皂 葬灶 造 蚤 增藻则 皂 蚤 鄄 系 基 本 相 同 , 但 体 积 减 少 一 半 为 员 园 园 造 的 孵 育 体 系 , μ 糟则 燥泽 燥皂 藻泽 , 匀 蕴 酝 泽 ) , 糟阅 晕 粤 人 重 组 达 悦 再 孕 员 粤 员 、 包 括 运 匀 孕 韵 鄄 运 韵 匀 缓 冲 液 ( 责 匀 苑 援 源 , 员 园 园 皂 皂 燥 造 辕 蕴 ) , 圆 源 悦 再 孕 员 粤 圆 、 悦 再 孕 圆 粤 远 、 悦 再 孕 员 月 员 、 悦 再 孕 圆 月 远 、 悦 再 孕 圆 悦 愿 、 晕 粤 阅 孕 匀 产 生 体 系 , 各 个 重 组 悦 再 孕 亚 型 ( 圆园 责皂 燥造 悦 再 孕 圆 悦 怨 、 悦 再 孕 圆 悦 员愿 、 悦 再 孕 圆 悦 员怨 、 悦 再 孕 圆 阅 远 、 悦 再 孕 圆 耘 员 、 悦 再 孕 辕 皂 造 ) 和 缘园 皂 燥造 辕 蕴 熊 果 酸 。 在 猿苑 益 孵 育 猿 皂 蚤 灶 μ 悦 再 孕 猿 粤 源 、 悦 再 孕 猿 粤 缘 、 悦 再 孕 猿 粤 苑 均 购 自 美 国 月 阅 郧 藻灶贼 藻泽 贼 后 , 加 入 晕 粤 阅 孕 匀 产生体系起始反 应。 孵 育 圆园 皂 蚤 灶 公 司 。 其余试剂为色谱纯或分析纯。 后 , 加 入 乙 腈 ( 缘园 造 ) 终 止 反 应 。 源 益 下 , 圆园 园园园 伊 早 μ 员 援 圆 摇 实 验 方 法 离 心 员园 皂 蚤 灶 , 取 上 清 液 缘园 μ 造 进 行 匀 孕 蕴 悦 分 析 , 计 算 员 援 圆 援 员 摇 孵 育 体 系 及 样 品 的 匀 孕 蕴 悦 分 析 摇 孵 育 体 系 其代谢产物的生成速率。 ( 圆园园 造 ) 包 括 运 匀 孕 韵 鄄 运 韵 匀 缓 冲 液 ( 责匀 苑 援 源 , μ 圆 源 员 援 圆 援 源 摇 熊 果 酸 的 动 力 学 分 析 摇 在混合人肝微粒体 员园园 皂 皂 辕 蕴 ) 、 还 原 性 辅 酶? ( 晕 粤 阅 孕 匀 ) 产 生 体 系 中, 熊 果酸的代谢产物在 园 援 猿 皂 早 辕 皂 造 的 微 粒 体 蛋 白 垣 ( 员 皂 皂 辕 蕴 晕 粤 阅 孕 , 员园 皂 皂 辕 蕴 郧 鄄 远 鄄 孕 , 员 哉 辕 皂 造 郧 鄄 远 鄄 浓 度 和 孵 育 圆园 皂 蚤 灶 的时间仍在线性区间 内, 因 此, 孕 阅 匀 , 源 皂 皂 辕 蕴 酝 早悦 造 ) 、 肝 微 粒 体 ( 园 援 缘 皂 早 辕 皂 造 ) 、 圆 在动力学分析时, 微粒 体蛋白浓度采用 园 援 猿 皂 早 辕 皂 造 , 缘园 皂 辕 皂 造 底物 ( 齐墩果酸或熊果 酸 ) 。 底 物 预 溶 于 μ 孵 育 时 间 选 用 圆园 皂 蚤 灶 。 熊 果 酸 ( 缘 , 员园 , 员缘 , 圆园 , 圆缘 , 甲醇, 并保持体系中甲醇终浓 度 低 于 员 豫 ( 增 辕 增 ) 。 底 缘园 , 员园园 , 圆园园 , 源园园 皂 燥造 辕 蕴 ) 与 人 肝 微 粒 体 ( 园 援 猿 皂 早 辕 μ 物 溶 液 在 猿苑 益 孵 育 猿 皂 蚤 灶 后 , 加 入 晕 粤 阅 孕 匀 产 生 体 皂 造 ) 孵 育 圆园 皂 蚤 灶 计 算 动 力 学 参 数 运 和 灾 。 对 重 皂 皂葬 曾 系 开 始 反 应 , 继 续 孵 育 圆园 皂 蚤 灶 后 , 加 入 乙 腈 ( 员园园 组单 酶进行动力学分 析, 熊果酸 ( 缘 , 员园 , 员缘 , 圆园 , μ 造 ) 终 止 反 应 。 体 系 在 源 益 下 , 圆园 园园园 伊 早 离 心 员园 圆缘 , 缘园 , 员园园 , 圆园园 , 猿园园 μ 皂 燥造 辕 蕴 ) 分别与重组单酶 皂 蚤 灶 , 取 上 清 液 缘园 μ 造 进 行 匀 孕 蕴 悦 分 析 。 熊 果 酸 及 代 [ 员 圆 ] 悦 再 孕 猿 粤 源 ( 圆园 责皂 燥造 辕 皂 造 ) , 悦 再 孕 圆 悦 怨 ( 圆园 责皂 燥造 辕 皂 造 ) 孵 育 谢产 物的色谱条件如下 : 进 样 量 缘园 造 , 柱 温 μ 圆园 皂 蚤 灶 获取酶的动力学参数 运 和 灾 。 皂 皂葬 曾 猿缘 益 , 流 动 相 为 乙 腈 鄄 园 援 员 豫 甲 酸 ( 愿缘 辕 员缘 ) , 流 速 员 援 园 员 援 圆 援 缘 摇 数 据 分 析 摇 所有的孵育实验平行两份 , 结 果 皂 造 辕 皂 蚤 灶 , 检 测 波 长 圆员园 灶皂 。齐墩果酸色谱条件与熊 取 平 均 值 。 熊果酸在肝微粒体和重组单酶中的表观 果 酸 相 同 。 熊果酸和齐墩果酸的酶代谢实验分为实 动 力 学 参 数 灾 和 运 用 韵 则 蚤 早蚤 灶造 葬遭 愿 援 园 软 件 通 过 米 皂葬 曾 皂 验 组 和 对 照 组 , 实 验 组 加 入 晕 粤 阅 孕 匀 产 生 体 系 启 动 氏 方 程 ( 酝 蚤 糟澡藻葬造 蚤 泽 鄄 酝 藻灶贼 燥灶 藻择怎葬贼 蚤 燥灶 , 酝 酝 )ν 越 ( 灾 伊 反 应 , 对 照 组 不 加 晕 粤 阅 孕 匀 产生体系启动反应。 皂葬 曾 [ 杂 ] ) ( 辕 运 垣 [ 杂] ) 对实验数据进行拟和求 得。ν 是 员 援 圆 援 圆 摇 熊果酸化学抑制研究 皂 底 物 浓 度 为 [ 杂 ] 时的反应速率, 灾 是 反 应 的 最 大 速 为鉴别 参与熊果酸代谢的 悦 再 孕 亚 型 , 熊 果 酸 皂葬 曾 万方数据 率 , 运 是反应速率达到最大反应速率一半时的底物 ( 缘园 皂 燥造 辕 蕴) 孵育体系在加入 晕 粤 阅 孕 匀 产 生 体 系 前 μ 皂猿 苑 园 摇 军 事 医 学 摇 圆园员圆 年 缘 月 第 猿远 卷 第 缘 期 摇 酝 蚤 造 酝 藻 凿 杂糟 蚤 , 灾 燥 造 猿远 , 晕 燥 缘 , 酝 葬 赠 , 圆园员圆 摇 浓 度 。 体外内在清除率 悦 蕴 越 灾 辕 运 。 圆 援 猿 摇 熊果酸的化学抑制剂研究 蚤 灶 贼 皂葬 曾 皂 采 用 怨 种 主 要 悦 再 孕 的 选 择 性 抑制剂来确定参 圆 摇 结 果 与 代 谢 熊 果 酸 的 悦 再 孕 酶 亚 型 。 如 图 缘 所 示 , 粤 月 栽 抑 圆 援 员 摇 齐墩果酸和 熊果酸在人肝微粒体中的代谢稳 制 员园园 豫 的熊果 酸 代 谢; 而磺胺苯吡唑和克拉霉素 定 性 抑 制 了 猿园 豫 以 上 的 熊 果 酸 代 谢 , 呋 拉 茶 碱 、 槲 皮 素 齐墩果酸和熊果酸在人肝微粒体中的代谢如图 和氯美噻唑对熊果酸代 谢的抑制率约为 圆园 豫 , 其 他 员 所 示 。 可 以 看 出 齐 墩 果 酸 在 含 有 晕 粤 阅 孕 匀 和 不 含 抑制剂对熊果酸代谢 的 抑 制 率 小 于 圆园 豫 , 不 具 有 显 晕 粤 阅 孕 匀 产 生 体 系 的 匀 蕴 酝 泽 孵 育 液 中 均 不 代 谢 , 而 熊 著 意 义 。 这 些 结 果 表 明 悦 再 孕 猿 粤 源 和 悦 再 孕 圆 悦 怨 主 要 参 果 酸 在 含 有 晕 粤 阅 孕 匀 产生体系的孵育体系中转化率 与 熊 果 酸 的 代 谢 , 悦 再 孕 员 粤 圆 、 悦 再 孕 圆 悦 愿 和 悦 再 孕 圆 耘 员 可 约 为 源园 豫 , 在 未 加 晕 粤 阅 孕 匀 产生体系的样品中没有 能参 与其代谢, 最终结果需要结合熊果酸的重组单 代 谢 。基于此实验的结果, 以下的实验中只研究了 酶 实 验 确 认 。 熊 果 酸 在 悦 再 孕 酶中代谢通路。 摇 图 缘 摇 悦 再 孕 源缘园 特 异 性 抑制剂对熊果酸在人肝微粒体 中代谢的抑制作用 图 圆 摇 齐墩果酸和熊 果 酸在人肝 微粒体中的代谢 稳 定性 圆 援 源 摇 人 的 重 组 悦 再 孕 酶与熊果酸的反应 圆 援 圆 摇 熊果酸的代谢产物初步鉴定 为进一步验证参与 熊 果 酸 代 谢 的 悦 再 孕 亚 型 , 考 比较加入与未 加 入 晕 粤 阅 孕 匀 产生体系的熊果酸 察 了 员源 种 人 的 重 组 悦 再 孕 亚型代谢熊果 酸 的 活 性 样 品 色 谱 图 ( 图 猿 ) , 并 对 熊 果 酸 浓 度 ( 曾 ) 和 对 应 的 ( 图 远 ) 。 悦 再 孕 猿 粤 源 、 悦 再 孕 圆 悦 怨 中可以分别检测到熊果 酝 峰 峰 面 积 ( 赠 ) 进行相关性分 析, 得相关系数 则 为 酸 的 代 谢 速 率 ( 灾 ) 为 缘 援 员员 、 猿 援 远苑 灶皂 燥造 ( 辕 皂 蚤 灶 ? 灶皂 燥造 ) 园 援 怨源员源 ( 图 源 ) , 综 合 以 上 两 点 , 我 们 判 定 酝 峰 为 熊 孕 源缘园 。 其 他 的 悦 再 孕 亚型中均未检测到熊果酸 的 显 果酸的代谢产物峰。 著 代 谢 。 结 合 抑 制 剂 实 验 结 果 可 知 , 悦 再 孕 猿 粤 源 、 悦 再 孕 圆 悦 怨 参与了熊果酸的代谢。 图 猿 摇 熊 果 酸 ( 哉 粤 ) 及 其 代 谢 产 物 ( 酝 ) 的 色 谱 图 图 远 摇 悦 再 孕 源缘园 重 组 酶 对 熊 果 酸 的 代 谢 圆 援 缘 摇 熊果酸的动力学分析 在 人 混 合 肝 微 粒 体 中 , 熊 果 酸 在 园 援 猿 皂 早 辕 皂 造 的 微粒体蛋白浓度和孵育时间 圆园 皂 蚤 灶 仍 在 线 性 区 间 摇 图 源 摇 熊 果 酸 生 成 的 代 谢 产 物 酝 峰 峰 面 积 ( 赠 ) 与 加 内 。因此, 在动力学分析 时, 微粒体浓 度 采 用 入 熊 果 酸 浓 度 ( 曾 ) 的 线 性 关 系 园 援 猿 皂 早 辕 皂 造 , 反 应 时 间 采 用 圆园 皂 蚤 灶 。 熊果酸在肝微粒 万方数据 体 和 重 组 悦 再 孕 酶中的动力学行为均符合米氏动力猿 苑 员 摇 军 事 医 学 摇 圆园员圆 年 缘 月 第 猿远 卷 第 缘 期 摇 酝 蚤 造 酝 藻 凿 杂糟 蚤 , 灾 燥 造 猿远 , 晕 燥 缘 , 酝 葬 赠 , 圆园员圆 摇 [ 员 怨 ] 学 行 为, 在人混合 肝微粒体和重组单酶中的表观动 的 个 体 差 异 , 而 悦 再 孕 圆 悦 怨 基因的遗传多态性亦会 [ 圆 园 ] 力 学 参 数 运 和 灾 见 表 员 。 导致酶活性的差异 , 从而药物代谢会有种族和个 皂 皂葬 曾 体 差 异 。 所 以 , 熊 果 酸 在 与 悦 再 孕 猿 粤 源 或 悦 再 孕 圆 悦 怨 的 表 员 摇 熊 果 酸 在 不 同 孵 育 体 系 中 悦 再 孕 代 谢 的 动 力 学 参 数 诱导剂或抑制剂合用时可能会影响自身的代 谢, 尤 运 (μ 皂 燥 造 辕 蕴 ) 灾 [ 灶 皂 燥 造 ( 辕 皂 蚤 灶 ? 责 皂 燥 造 ) 孕 源 缘 园 ] 悦 蕴 ( 皂 造 辕 皂 蚤 灶 ) 酶 皂 皂 葬 曾 蚤 灶 贼 其在基因变异程度高的个体 , 这种影响将更加明显。 匀 蕴 酝 圆 远 援 员 园 员 援 缘 园 缘 苑 援 源 苑 悦 再 孕 猿 粤 源 圆 缘 援 缘 园 缘 圆 援 愿 园 圆 园 苑 园 援 缘 愿 综上所述, 本实验对比研究了同分异构体齐墩 悦 再 孕 圆 悦 怨 员 愿 援 圆 愿 缘 圆 援 源 愿 圆 愿 苑 园 援 愿 怨 果酸和熊果酸在人肝微粒体中代谢行为的差 异, 发 猿 摇 讨 论 现 了 齐 墩 果 酸 不 通 过 悦 再 孕 酶代谢并初步分析了原 因, 阐明了参与熊果酸代谢的 悦 再 孕 源缘园 酶 是 悦 再 孕 猿 粤 源 悦 再 孕 源 缘 园 酶 主 要 存 在 于 肝 脏 中 , 是 最 重 要 的 相 Ι 和 悦 再 孕 圆 悦 怨 , 丰富了同类化合物的药物代谢研究。 代谢酶, 在外源性和内源性物质的代谢中起着非常重 要 的 作 用 。 悦 再 孕 源 缘 园 酶系是一组由许 多同工酶组成的 【 参 考 文 献 】 超 基 因 大 家 族 。人体内与药物代谢密 切 相 关 的 酶 有 [ 员 ] 摇 李 开 泉 , 陈 摇 武 , 熊 筱 娟 援 乌 索 酸 的 化 学 、 药 理 及 临 床 应 用 进 悦 再 孕 员 粤 圆 、 悦 再 孕 圆 粤 远 、 悦 再 孕 圆 悦 怨 、 悦 再 孕 圆 悦 员 怨 、 悦 再 孕 圆 阅 远 、 展 [ 允 ] 援 中 药 材 , 圆园园圆 , 圆源 ( 怨 ) : 苑园怨 原 苑员员 援 悦 再 孕 猿 粤 源 、 悦 再 孕 圆 耘 员 等 , 临 床 上 大 约 怨园 豫 的 药 物 都 经 [ 圆 ] 摇 刘 摇 颖 , 刘 登 科 , 刘 摇 默 , 等 援 齐墩果酸的药理 作 用 和 结 构 修 [ 员 远 ] 过 悦 再 孕 源缘园 酶 代 谢 。 饰 [ 允 ] 援 中 草 药 , 圆园园怨 , 源园 ( 员 ) : 圆员 原 圆猿 援 齐墩果酸和 熊果酸的代谢差异来自结构不 同, [ 猿 ] 摇 杂葬 则 葬 增 葬 灶葬 灶 砸 , 灾 蚤 泽 憎 葬 灶葬 贼 澡葬 灶 孕 , 孕 怎早 葬 造 藻 灶凿蚤 运 灾 援 孕 则 燥 贼 藻 糟 贼 蚤 增 藻 藻 枣 枣 藻 糟 贼 燥 枣 怎则 泽 燥 造 蚤 糟 葬 糟 蚤 凿 燥 灶 藻 贼 澡葬 灶燥 造 鄄 皂 藻 凿蚤 葬 贼 藻 凿 藻 曾 责藻 则 蚤 皂 藻 灶贼 葬 造 造 蚤 增 藻 则 凿葬 皂 葬 早 藻 蚤 灶 则 葬 贼 泽 二者唯一的差异是 耘 环 的 甲 基 异 构 , 齐 墩 果 酸 的 耘 [ 允 ] 援 蕴 蚤 枣 藻 杂糟 蚤 , 圆园园远 , 苑愿 ( 苑 ) : 苑员猿 原 苑员愿 援 环 甲 基 取 代 都 在 圆园 位 悦 上 , 而 熊 果 酸 的 耘 环 员怨 和 [ 源 ] 摇 月 葬 则 蚤 糟 藻 增 蚤 糟 阅 , 杂燥 泽 葬 杂 , 阅 藻 造 造 葬 蕴 燥 早 早 蚤 葬 砸 , 藻 贼 葬造 援 栽 燥 责蚤 糟 葬 造 葬 灶贼 蚤 鄄 蚤 灶枣 造 葬 皂 鄄 圆园 位上各有一个甲基取代 基, 取 代基的位置不 同, 皂 葬 贼 燥 则 赠 葬 糟 贼 蚤 增 蚤 贼 赠 燥 枣 杂葬造 增 蚤 葬 燥 枣 枣 蚤 糟 蚤 灶葬造 蚤 泽 蕴 援 造 藻 葬 增 藻 泽 : 贼 澡藻 则 藻 造 藻 增 葬 灶糟 藻 燥 枣 影响了两者的空间结构, 最终导致了两者的代谢行 怎则 泽 燥 造 蚤 糟 葬 糟 蚤 凿 [ 允 ] 援 允 耘 贼 澡灶燥 责澡葬 则 皂 葬 糟 燥 造 , 圆园园员 , 苑缘 ( 圆 原 猿 ) : 员圆缘 原 员猿圆 援 [ 员 苑 ] 为 差 异 。 杂藻灶贼 澡蚤 造 等 对比研究了齐墩果酸和熊果 [ 缘 ] 摇 杂澡葬 燥 允 宰 , 阅 葬 蚤 再 悦 , 载 怎藻 允 孕 , 藻 贼 葬造 援 陨 灶 增 蚤 贼 则 燥 葬 灶凿 蚤 灶 增 蚤 增 燥 葬 灶贼 蚤 糟 葬 灶糟 藻 则 葬 糟 贼 蚤 增 蚤 贼 赠 藻 增 葬 造 怎葬 贼 蚤 燥 灶 燥 枣 怎则 泽 燥 造 蚤 糟 葬 糟 蚤 凿 凿藻 则 蚤 增 葬 贼 蚤 增 藻 泽 [ 允 ] 援 耘 怎则 允 酝 藻 凿 酸对局部心肌缺血的大鼠心肌的保护作 用, 同样发 悦 澡藻 皂 , 圆园员员 , 源远 ( 苑 ) : 圆远缘圆 原 圆远远员 援 现 由 于 耘 环的甲基异构, 熊果酸对心肌的保护作用 [ 远 ] 摇 匀 怎 葬 灶 早 阅 , 阅 蚤 灶 早 再 , 蕴 蚤 再 , 藻 贼 葬 造 援 粤 灶 贼 蚤 鄄 贼 怎 皂 燥 则 葬 糟 贼 蚤 增 蚤 贼 赠 燥 枣 葬 猿鄄 燥 曾 燥 凿 藻 则 蚤 增 鄄 明 显 强 于 齐 墩 果 酸 。 结合本文研究结果可 知, 齐墩 葬 贼 蚤 增 藻 燥 枣 燥 造 藻 葬 灶 燥 造 蚤 糟 葬 糟 蚤 凿 [ 允 ] 援 悦 葬 灶 糟 藻 则 蕴 藻 贼 贼 , 圆 园 园 远 , 圆 猿 ( 猿 圆) : 圆 愿 怨 原 圆 怨 远援 果酸和熊果酸结构的微小差异, 使得两者的代谢和 [ 苑 ] 摇 酝 葬 悦 , 晕 葬 噪葬 皂 怎则 葬 晕 , 酝 蚤 赠 葬 泽 澡蚤 则 燥 匀 , 藻 贼 葬造 援 陨 灶澡蚤 遭蚤 贼 燥 则 赠 藻 枣 枣 藻 糟 贼 泽 燥 枣 药效都发生了变化, 这其中的内在规律还需要进一 糟 燥 灶泽 贼 蚤 贼 怎藻 灶贼 泽 枣 则 燥 皂 悦 赠 灶燥 皂 燥 则 蚤 怎皂 泽 燥 灶早葬则 蚤 糟 怎皂 葬 灶凿 则 藻 造 葬 贼 藻 凿 贼 则 蚤 贼 藻 则 责藻 灶藻 凿藻 则 蚤 增 葬 贼 蚤 增 藻 泽 燥 灶 匀 陨 灾 鄄 员 责则 燥 贼 藻 葬 泽 藻 [ 允 ] 援 悦 澡藻 皂 孕 澡葬 则 皂 月 怎造 造 , 员怨怨怨 , 源苑 步 探 索 。 ( 圆 ) : 员源员 原 员源缘 援 为了鉴定参与熊果 酸 代 谢 的 悦 再 孕 亚 型 , 我 们 采 [ 愿 ] 摇 宰 葬 灶早 在 匀 , 匀 泽 怎 悦 悦 , 匀 怎葬 灶早 悦 晕 , 藻 贼 葬造 援 粤 灶贼 蚤 鄄 早 造 赠 糟 葬 贼 蚤 增 藻 藻 枣 枣 藻 糟 贼 泽 燥 枣 取了化学抑制剂研究和人重组单酶代谢相结合的方 燥 造 藻 葬 灶燥 造 蚤 糟 葬 糟 蚤 凿 葬 灶凿 怎则 泽 燥 造 蚤 糟 葬 糟 蚤 凿 蚤 灶 噪蚤 凿灶藻 赠 燥 枣 凿蚤 葬 遭藻 贼 蚤 糟 皂 蚤 糟 藻 [ 允 ] 援 法 , 利 用 怨 种 悦 再 孕 抑 制 剂 和 员源 种 人 重 组 单 酶 筛 选 耘 怎则 允 孕 澡葬 则 皂 葬 糟 燥 造 , 圆园员园 , 远圆愿 ( 员 原 猿 ) : 圆缘缘 原 圆远园 援 参 与 熊 果 酸 代 谢 的 悦 再 孕 酶 。 研 究 结 果 表 明 , [ 怨 ] 摇 宰 葬 灶 早 载 , 再 藻 载 蕴 , 蕴 蚤 怎 砸 , 藻 贼 葬 造 援 粤 灶 贼 蚤 燥 曾 蚤 凿 葬 灶 贼 葬 糟 贼 蚤 增 蚤 贼 蚤 藻 泽 燥 枣 燥 造 藻 葬 灶 燥 造 蚤 糟 葬 糟 蚤 凿 蚤 灶 增 蚤 贼 则 燥 : 责 燥 泽 泽 蚤 遭 造 藻 则 燥 造 藻 燥 枣 晕 则 枣 圆 葬 灶 凿 酝 粤 孕 噪 蚤 灶 葬 泽 藻 [ 泽 允 ] 援 悦 澡 藻 皂 月 蚤 鄄 悦 再 孕 猿 粤 源 的 抑 制 剂 克 拉 霉 素 和 悦 再 孕 圆 悦 怨 的 抑 制 剂 磺 燥 造 陨 灶 贼 藻 则 葬 糟 贼 , 圆 园 员 园 , 员 愿 源 ( 猿 ) : 猿 圆 愿 原 猿 猿 苑 援 胺苯吡唑可以明显抑制熊果酸代谢产物的生成。 熊 [ 员园 ] 摇 蕴 蚤 怎 允 援 韵 造 藻 葬 灶 燥 造 蚤 糟 葬 糟 蚤 凿 葬 灶 凿 怎 则 泽 燥 造 蚤 糟 葬 糟 蚤 凿 : 则 藻 泽 藻 葬 则 糟 澡 责 藻 则 泽 责 藻 糟 贼 蚤 增 藻 [ 泽 允 ] 援 果 酸 在 人 重 组 单 酶 悦 再 孕 猿 粤 源 中 的 运 为 圆缘 援 缘 皂 燥造 辕 μ 皂 允 耘 贼 澡 灶 燥 责 澡 葬 则 皂 葬 糟 燥 造 , 圆 园 园 缘 , 员 园 园 ( 员 原 圆 ) : 怨 圆 原 怨 源 援 蕴 , 灾 为 缘 圆援 愿 灶 皂 燥 造 ( 辕 皂 蚤 灶 ? 责 皂 燥 造 ) 孕 源 缘 园 , 在 单 酶 皂 葬曾 [ 员员 ] 摇 运 蚤 皂 运 粤 , 蕴 藻 藻 允 杂 , 孕 葬 则 噪 匀 允 , 藻 贼 葬造 援 陨 灶澡蚤 遭蚤 贼 蚤 燥 灶 燥 枣 糟 赠 贼 燥 糟 澡则 燥 皂 藻 孕 源缘园 悦 再 孕 圆悦 怨 中 的 运 为 员愿 援 圆愿 μ 皂 燥造 辕 蕴 , 灾 为 缘圆 援 源愿 葬 糟 贼 蚤 增 蚤 贼 蚤 藻 泽 遭赠 燥 造 藻 葬 灶燥 造 蚤 糟 葬 糟 蚤 凿 葬 灶凿 怎则 泽 燥 造 蚤 糟 葬 糟 蚤 凿 蚤 灶 澡怎皂 葬 灶 造 蚤 增 藻 则 皂 蚤 糟 则 燥 鄄 皂 皂葬 曾 泽 燥 皂 藻 [ 泽 允 ] 援 蕴 蚤 枣 藻 杂糟 蚤 , 圆园园源 , 苑源 ( 圆圆 ) : 圆苑远怨 原 圆苑苑怨 援 灶皂 燥造 ( 辕 皂 蚤 灶 ? 责皂 燥造 ) 孕 源缘园 。 上 述 结 果 表 明 , 熊 果 酸 在 [ 员圆 ] 摇 宰 葬 灶早 匀 匀 , 宰 葬 灶早 在 在 , 郧 怎燥 宰 月 援 悦 燥 皂 责葬 则 葬 贼 蚤 增 藻 凿藻 贼 藻 则 皂 蚤 灶葬 贼 蚤 燥 灶 燥 枣 悦 再 孕 中的代谢是一个多酶参与的过 程, 悦 再 孕 猿 粤 源 和 怎则 泽 燥 造 蚤 糟 葬 糟 蚤 凿 葬 灶凿 燥 造 藻 葬 灶燥 造 蚤 糟 葬 糟 蚤 凿 燥 枣 酝 葬糟 则 燥 糟 葬则 责 蚤 怎皂 燥 枣 枣 蚤 糟 蚤 灶葬造 蚤 ( 泽 杂蚤 藻 遭 援 悦 再 孕 圆 悦 怨 均 参 与 其 中 , 且 悦 再 孕 圆 悦 怨 与熊果酸有较强 藻 贼 在 怎糟 糟 援 ) 晕 葬 噪葬 蚤 遭赠 砸 孕 鄄 匀 孕 蕴 悦 [ 允 ] 援 陨 灶凿 悦 则 燥 责 孕 则 燥 凿 , 圆园园愿 , 圆愿 的 亲 和 力 。 ( 猿 ) : 猿圆愿 原 猿猿圆 援 根 据 本 文 的 研 究 结 果 , 我 们 不 难 发 现 悦 再 孕 猿 粤 源 [ 员猿 ] 摇 月 躁 燥 则 灶泽 泽 燥 灶 栽 阅 , 悦 葬 造 造 葬 早 澡葬 灶 允 栽 , 耘 蚤 灶燥 造 枣 匀 允 , 藻 贼 葬造 援 栽 澡藻 糟 燥 灶凿怎糟 贼 燥 枣 蚤 灶 增 蚤 贼 则 燥 葬 灶凿 蚤 灶 增 蚤 增 燥 凿则 怎早 鄄 凿则 怎早 蚤 灶贼 藻 则 葬 糟 贼 蚤 燥 灶 泽 贼 怎凿蚤 藻 泽 : 葬 责澡葬 则 皂 葬 责藻 则 泽 责藻 糟 鄄 及 悦 再 孕 圆 悦 怨 的表达或者活性改变可能会 影 响 熊 果 酸 贼 蚤 增 [ 藻 允 ] 援 阅 则 怎早 酝 藻 贼 葬 遭 阅 蚤 泽 责燥 泽 , 圆园园猿 , 源猿 ( 缘 ) : 源源猿 原 源远怨 援 的 代 谢 。 悦 再 孕 猿 粤 源 和 悦 再 孕 圆 悦 怨 是 悦 再 孕 源缘园 酶 系 较 为 [ 员源 ] 摇 匀 怎 葬 灶 早 杂 酝 , 栽 藻 皂 责 造 藻 砸 , 栽 澡 则 燥 糟 噪 皂 燥 则 贼 燥 灶 阅 悦 , 藻 贼 葬 造 援 阅 则 怎 早 蚤 灶 贼 藻 则 葬 糟 贼 蚤 燥 灶 重要的两个亚型 , 底物非常广泛 , 已知许多药物是它 泽 贼 怎 凿 蚤 藻 泽 : 泽 贼 怎 凿 赠 凿 藻 泽 蚤 早 灶 , 凿 葬 贼 葬 葬 灶 葬 造 赠 泽 蚤 泽 , 葬 灶 凿 蚤 皂 责 造 蚤 糟 葬 贼 蚤 燥 灶 泽 枣 燥 则 凿 燥 泽 蚤 灶 早 [ 员 愿 ] 们 的 抑 制 剂 或 诱 导 剂 。 近年来又发现它们具有 葬 灶 凿 造 葬 遭 藻 造 蚤 灶 [ 早 允 ] 援 悦 造 蚤 灶 孕 澡 葬 则 皂 葬 糟 燥 造 栽 澡 藻 则 , 圆 园 园 苑 , 愿 员 ( 圆 ) : 圆 怨 愿 原 猿 园 源 援 万方数据 基 因 多 态 性 , 悦 再 孕 猿 粤 源 基因在肝脏的表达具有 源园 倍 ( 下 转 第 猿 愿 源 页 )猿 愿 源 摇 军 事 医 学 摇 圆园员圆 年 缘 月 第 猿远 卷 第 缘 期 摇 酝 蚤 造 酝 藻 凿 杂糟 蚤 , 灾 燥 造 猿远 , 晕 燥 缘 , 酝 葬 赠 , 圆园员圆 摇 表 缘 摇 克拉霉素靶点区结构和呋喃唑酮 靶 蛋白 结构 比 对 晶体结构 数据, 所以无法进行比 较。 呋 喃 唑 酮 作 用 靶 蛋 白 模 型 片 段 起 片 段 终 相 似 性 哉 灶 蚤 责 则 燥 贼 数 据 库 的靶标蛋白和其他 猿 种药物无共同药靶蛋 白, 预测 链 孕 阅 月 编 号 编 号 始 位 点 止 位 点 分 值 编 号 的靶标区结 构虽然同原靶点有较高的相似 性, 但是 圆 载 云 韵 员 粤 员 员 远 员 圆 苑 园 援 怨 员 远 远 苑 粤 韵 云 月 赃 匀 哉 酝 粤 晕 同 其 他 猿 种药物的靶标相 比, 靶点区结构上已有所 圆 月 运 猿 员 粤 员 员 园 员 圆 员 园 援 怨 员 远 远 苑 粤 韵 云 月 赃 匀 哉 酝 粤 晕 员 杂 圆 再 员 粤 员 员 园 员 圆 员 园 援 怨 员 远 远 苑 粤 韵 云 月 赃 匀 哉 酝 粤 晕 改 变 。 也就是说这两组药 物 可 能 针 对 的 是 幽 门 螺 杆 圆 载 云 哉 员 粤 员 员 园 员 圆 员 园 援 怨 员 远 远 苑 粤 韵 云 月 赃 匀 哉 酝 粤 晕 菌的不同靶点结构区。 也 正 是 幽 门 螺 杆 菌 的 变 异 导 猿 在 再 载 员 粤 员 员 远 员 圆 苑 园 援 怨 员 远 远 苑 粤 韵 云 月 赃 匀 哉 酝 粤 晕 致靶点结构 发生微变, 致使针对同一靶标结构开发 员 杂 圆 匝 员 粤 员 员 园 员 圆 员 园 援 怨 员 远 远 苑 粤 韵 云 月 赃 匀 哉 酝 粤 晕 圆 悦 苑 圆 员 粤 员 员 缘 员 圆 远 园 援 怨 员 远 远 苑 粤 韵 云 月 赃 匀 哉 酝 粤 晕 的药物集体产生耐药性。 而 呋 喃 唑 酮 和 阿 莫 西 林 是 员 韵 允 悦 员 粤 员 员 园 员 圆 员 园 援 怨 员 远 远 苑 粤 韵 云 月 赃 匀 哉 酝 粤 晕 针 对 与 前 猿 种不同的靶标开发的药 物, 靶点区在结 圆 悦 苑 韵 员 粤 员 员 园 员 圆 员 园 援 怨 员 远 远 苑 粤 韵 云 月 赃 匀 哉 酝 粤 晕 员 韵 允 阅 员 粤 员 员 园 员 圆 员 园 援 怨 员 远 远 苑 粤 韵 云 月 赃 匀 哉 酝 粤 晕 构 上 较 前 猿 种 有 所 变 化 。可 能 本 身 结合的是幽门螺 员 郧 韵 杂 员 粤 员 员 员 员 圆 圆 园 援 怨 员 远 远 苑 粤 韵 云 月 赃 匀 哉 酝 粤 晕 杆菌蛋白比较稳定的结 构 区 域, 匀 责 的变异并未在此 圆 月 运 源 员 粤 员 员 园 员 圆 员 园 援 怨 员 远 远 苑 粤 韵 云 月 赃 匀 哉 酝 粤 晕 靶点结构上有所体现 , 所以 此 两 种 药 物 敏 感 度 较 好。 圆 载 悦 郧 员 粤 员 员 缘 员 圆 远 园 援 怨 员 远 远 苑 粤 韵 云 月 赃 匀 哉 酝 粤 晕 圆 灾 在 圆 员 粤 员 员 园 员 圆 员 园 援 怨 员 远 远 苑 粤 韵 云 月 赃 匀 哉 酝 粤 晕 本文从分子结 构 水 平 对 匀 责 抗生素耐药机制的形成 圆 灾 砸 酝 员 粤 员 员 远 员 圆 苑 园 援 怨 员 远 远 苑 粤 韵 云 月 赃 匀 哉 酝 粤 晕 做出了解释, 为研究细菌的耐药性提供了一个新的 圆 月 再 月 员 粤 员 员 远 员 圆 苑 园 援 怨 员 远 远 苑 粤 韵 云 月 赃 匀 哉 酝 粤 晕 圆 悦 远 远 员 粤 员 员 远 员 圆 苑 园 援 怨 员 远 远 苑 粤 韵 云 月 赃 匀 哉 酝 粤 晕 思 路 。 圆 灾 缘 在 员 粤 员 员 远 员 圆 苑 园