高效液相色谱法测定洁安洗液中蛇床子素的含量.doc

高效液相色谱法测定洁安洗液中蛇床子素的含量.doc 高效液相色谱法测定洁安洗液中蛇床子素的含量 作者:肖引，陈江，强烈应，刘凯 【关键词】高效液相色谱法;洁安洗液;蛇床子素 1实验资料 高效液相色谱仪(美国Shimadzu公司)，色谱泵LC10ATVP，检测器SPDM10AVP，CR6A数据处理机.蛇床子素品(中国药品生物制品检定所)，甲醇(美国Fisher公司)，水为自制三蒸水，其余试剂均为分析纯.洁安洗液(本院制剂，批号:000209，000325，000509). ODS柱150.0mm×4.6mm;检测波长322nm;流动相:甲醇水体积比(70?30);流速:0.8mL・min-1;进样量5μL，在此色谱条件下，蛇床子素的保留时间为10.5min.理论塔板数按蛇床子素峰计算不低于3500.精密称取蛇床子素的对照品，加甲醇制成每25mg・L-1的溶液(避光放置)，即得.精密量取蛇床子药材煎煮液20mL，加氯仿振摇提取6次，每次30mL，合并氯仿提取液，水浴蒸干，加甲醇溶解并定容至5mL量瓶中，滤过，精密量取续滤液1mL，置10mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，即得.精密称取蛇床子素的对照品，加甲醇制成每70mg・L-1的对照品溶液，取1，2，3，4和5μL，按上述色谱条件测定峰面积，以峰面积(A)对浓度(C)列表，并进行线性回归.得线性回归方程A,957064C，4261.5，r=0.9998(n=5).表明蛇床子素在浓度7,35μg范围内与峰面积线性关系良好，取对照品溶液(70mg・L- 1)重复进样6次，每次2μL，测定峰面积，计算RSD为0.48%，精密度良好. 取批号为000209样品，按含量测定法测定，重复6次测定含量，计算RSD为0.46%，重现性良好.取已知含量的批号为000325样品，精密吸取各10mL，加入0.8mg蛇床子素对照品，按含量测定方测定,表明本回收率良好(96.5%)，方法可行.按处方量制备不含蛇床子素的样品，照含量测定方法，取空白样品溶液注入高效液相色谱仪，(在蛇床子素相应位置无干扰收峰)，结果表明空白无干扰.取三批样品供试品各20mL，用氯仿提取后，蒸干，用甲醇溶解并定容至5mL，再精密吸取滤液1mL,置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，作为供试品溶液.另取含蛇床子素25mol・L-1 的对照品溶液，各吸取5μL，注入高效液相色谱仪，按外标法计算含量，三批样品含量(n=3)分别为0.058，0.059和59mg・L-1;RSD分别为2.99%，2.30%，2.49%. 2讨论 选用ODS柱，甲醇,水作为流动相，主峰与杂峰能达到基线分离，效果满意.经样品含量测定提取次数考察，供试品处理时用氯仿提取6次，可使蛇床子素基本提取完全,1-4,.采用HPLC法测定洁安洗 液中蛇床子素的含量，方法准确、快速、简便、重现性好,5-8,. 【