口蹄疫干粉制剂论文：口蹄疫干粉制剂 鼻黏膜免疫 豚鼠 牛

口蹄疫干粉制剂论文：口蹄疫干粉制剂 鼻黏膜免疫 豚鼠 牛 口蹄疫干粉制剂论文:口蹄疫干粉制剂对动物鼻黏膜免疫效果研究 【中文摘要】黏膜免疫是动物机体防御传染病的第一道屏障,而鼻黏膜是许多病原微生物进入机体的必经之路,因此,鼻黏膜免疫对预防动物的传染病具有重要的意义。为了研究鼻黏膜的免疫效果,本研究首先对灭活口蹄疫病毒抗原进行浓缩纯化、冷冻干燥后,与相应的黏膜保护剂混合制成干粉,经筛筛选颗粒大小后,运用电子扫描显微镜、TG-DSC同步热仪等对粉末进行理化特性分析。结果表明:制备的干粉制剂颗粒大小易于雾化,喷雾过程中能附着于鼻黏膜表面,且在一定温度和湿度范围内稳定性良好,适于进行鼻黏膜部位的免疫。采用喷鼻途径对实验豚鼠和牛进行黏膜免疫,通过液相阻断和间接ELISA对黏膜分泌液及血清进行特异性抗体检测,来评价其黏膜特定部位免疫反应和全身性体液免疫应答水平;通过淋巴细胞增殖试验、流式细胞术检测CD4+和CD8+细胞含量等,来评价其全身性细胞免疫应答水平。结果表明:首次免疫后的实验豚鼠和牛,在第7天检测,均出现了不同程度的特异性IgA抗体水平,随后在血清中出现特异性IgA及IgG抗体水平。进行二次免疫后,抗体水平明显高于首次免疫,且抗体产生快,维持时间长。但是,与常规灭活疫苗相比,鼻黏膜免疫抗体水平较低,维持时间略短。淋巴... 【英文摘要】Mucosa immunization was the first barrier of defense infectious diseases in animals’. The nasal mucosa was the only way that many pathogenic microbes into the organism. Therefore, the nasal mucosa immunity had the important significance to prevent infectious disease.The purpose of this research was to prepare a dry powder formulation of inactivated Foot-and-Mouth Disease (FMD) virus and a mucoadhesive compound suitable for nasal delivery.Powders containing FMDV, trehalose and chitosan were produced by l... 【关键词】口蹄疫干粉制剂 鼻黏膜免疫 豚鼠 牛 【英文关键词】formulation of Dry Powder FMD Nasal mucosa immunization guinea pig bovine 【目录】口蹄疫干粉制剂对动物鼻黏膜免疫效果研究 摘要 5-6 Abstract 6 第一章 序言 12-19 1.1 鼻黏膜 免疫 12-14 1.1.1 鼻黏膜免疫的优点 12-13 1.1.2 鼻 黏膜免疫的缺点 13-14 1.2 壳聚糖微球作为鼻黏膜免疫载体 的研究进展 14-17 1.2.1 壳聚糖微球的理化特性 14-15 1.2.2 黏膜载体颗粒 15-16 1.2.3 壳聚糖微球 在鼻黏膜免疫中的作用 16 1.2.4 甘露糖基化壳聚糖微球的鼻 黏膜免疫 16-17 1.3 研究目的及意义 17-19 第二章 新 型口蹄疫干粉制剂的制备 19-27 2.1 材料与 20-23 2.1.1 材料 20-21 2.1.2 146S 抗原的浓缩、纯 化及含量测定 21 2.1.3 146S 抗原的冷冻干燥 21-22 2.1.4 冻干抗原粉末的研磨 22 2.1.5 抗原粉末 颗粒大小的筛选 22 2.1.6 黏膜粘着剂的混合 22-23 2.2 结果 23-24 2.2.1 146S 抗原颗粒的 D259nm 值标准曲线 23 2.2.2 146S 颗粒含量的分析 23-24 2.2.3 抗原粉末颗粒的研磨与筛选 24 2.3 讨论 24-27 第三章 口蹄疫干粉制剂的理化特性研究 27-32 3.1 材料与方法 28 3.1.1 主要仪器及设备 28 3.1.2 粉末颗粒大小及形态分析 28 3.1.3 差示扫 描量热法(DSC) 28 3.1.4 热重量分析(TGA) 28 3.1.5 粉末的吸潮性分析 28 3.2 结果 28-31 3.2.1 粉末颗粒 大小及形态分析 28-29 3.2.2 差示扫描量热法(DSC) 29-30 3.2.3 热重量分析(TGA) 30 3.2.4 粉末的吸潮 性分析 30-31 3.3 讨论 31-32 第四章 口蹄疫干粉制剂 对豚鼠鼻黏膜免疫的效果研究 32-42 4.1 材料与方法 32-36 4.1.1 实验动物，免疫干粉制剂 32-33 4.1.2 主 要试剂 33 4.1.3 主要仪器及设备 33 4.1.4 实验动物 免疫 33 4.1.5 实验动物检测样品的采集 33-34 4.1.6 FMDV 特异性抗体的检测 34 4.1.7 豚鼠T 淋巴细胞增殖试验 34-35 4.1.8 豚鼠白介素4(IL-4)及γ-干扰素(γ-IFN)的 测定 35-36 4.2 结果 36-40 4.2.1 FMDV 特异性抗体的 检测 36-39 4.2.2 豚鼠T 淋巴细胞增殖试验 39 4.2.3 豚鼠白介素4(IL-4)、γ-干扰素(γ-IFN)的测定 39-40 4.3 讨论 40-42 第五章 口蹄疫干粉制剂对牛鼻黏膜免疫的效果研究 42-54 5.1 材料与方法 43-45 5.1.1 实验动物，免疫干粉制剂 43 5.1.2 主要试剂 43 5.1.3 主要仪器及设备 43 5.1.4 实验动物免疫 43-44 5.1.5 实验动物检测样品的采集 44 5.1.6 FMDV 特异性抗体的检测 44-45 5.1.7 牛外周血淋巴细胞增殖试验 45 5.1.8 流式细胞术检测牛抗凝血中 CD4~+、CD8~+水平 45 5.2 结果 45-52 5.2.1 FMDV 特异性抗体的检测 45-48 5.2.2 牛外周血淋巴细胞增殖试验 48 5.2.3 流式细胞术检测实验牛抗凝血中 CD4~+、CD8~+水平 48-52 5.3 讨论 52-54 第六章 全文结论 54-55 参考文献 55-62 致谢 62-63 作者简历 63