【doc】口腔鳞癌及癌前病变上皮棘细胞的体视学分析

【doc】口腔鳞癌及癌前病变上皮棘细胞的体视学分析 口腔鳞癌及癌前病变上皮棘细胞的体视学 分析 ? 360 2一j占弓 中华口腔医学杂志1994年11月第29卷第6期 E1腔鳞癌及癌前病变上皮棘 细胞的体视学分析 高山刘蜀洗子华彭隆祥7;尸..弓 摘要作者利用图像分析仪对口腔鳞癌及其他几种牯膜病变上皮耩细胞进行了体视学研究分 析.结果显示,嵌趺由正常组,牯膜下纤维性变组,白斑组,不典型增生组至鳞癌组.细胞核的体积密 度,面积密度逐渐递增(P<O.01),细胞质体积密度逐渐递减(P<0.D1)t癌组与其他4组比鞍均有显 着性差异(P<o.05).客观地反映了由正常一病变一癌细胞核异常增生的量变,质变特征l细胞核圆 球度在各组间具有显着性差异(P<0.01),显示了癌细胞核的多形性改变.细胞平均体积及平均直径 在各组I百I的差异(P<O.0j),提示三维参数鞍二维参数更有效地反映恶变过程中的细胞形态变化.结 果明,体视学参数能较好地反映肿瘤发生过程中的生物学及形态学特征t并能鞍好地将口腔癌与非 癌病变鉴别.… 关镑词堕,鳞状细胞理曾皇f忡螽馥套氧 随着图像分析技术的发展,使形态学定性 描述定量化,二维图像三维化成为可能.体视学 在医学中的应用日趋广泛.本研究利用体 视学方法对口腔鳞癌及几种粘膜病变上皮棘细 胞分析,旨在使图像分析仪的形态定量分析结 果得到进一步完善],进而揭示口腔鳞癌发生 过程中的生物学及形态学特征,同时使正常一 病变一癌渐变过程中细胞核的量变质变特征得 以解释 材料与方法 一 ,标本的选择与病理学诊断 选择存档蜡块鳞癌(SCC)11例,不典型增生 (DYS)9例,白斑(LK)8倒,牯膜下纤维性变(OSF)16 例,正常粘膜(NOR)4例(取自健康志原者),常规制成 厚4mHE切片,详见高山等报道_1]; 二,标本的图像分析 选择德国OPTON的IBAS—II图像分析仪.对每 张切片分析80,100十棘细胞及其棱t得到每个细胞 及其细胞棱的面积(AC及AN),周长(PC及PN),等 效圆直径(DC及DN). 三,体视学参数计算及数据处理 1公式:(1)细胞核体积密度(Volumedensity){ VvNVN/VC—AN/AC{ (2)细胞质体积密度:VvCY—VeY/VC—ACY/ AC一(AC—AN)/AC; (3)细胞棱面积密度(Sur|acedensity){SvN=4 ?PN/3.14l59?AC; (4)细胞核比表面(Specificsur(ace):SsN—SvN/ VvN一4?PN/3.14l59?AN{ (5)细胞核等效球比表面(speeifiesurfaceof equivalentsphere)!SsE一3?3.1415/2?PNl (6)细胞棱圆球度(Sphericity):SpN—SsE/SsN一 3?3.14159.?AN/8?PN0; (7)细胞平均直径:MDC—n?3—14159/2?(1/ DC+I/DC?+I/DCn)l(1,2…n分别为每张切片测 量的细胞及细胞核序数.n为总数,以下同) (8)细胞平均体积jMvc一3,14159?(AC1一AC …ACn)/2?(1/DClT1/DN2…+1/DNn)} (9)细胞棱平均直径:MDN—n?3.14159/2?(1/ DN+1/DN?"+1/DNn); (10)细胞攘平均体径:MVN=3.14159?(AN?+ AN2…ANn)/Z?(1/DNI+1/DN2…+I/DNn). 2.数据处理以Basi~自编程序完成t得到每个标 本各参数的均值. 作者单位:900070关律医学院附属口腔医院口腔内科 (高山)l湖南医科大学附属一院口腔科(刘蜀凡,沈于华)t 胡南医科大学电镜室(彭隆样) 中华口睦医学杂志l鲫4年11月第29卷第6塑 四,统计学分析 使用商品化的医用统计软件包,对每个参数在各 组间行方差齐性检验,方差齐则行多样本均数比较及 两两比较,方差不齐刚行变量转换使方差齐再行方差 分析. 结果 如附表和图l,3所示,由正常到粘膜下纤 维性变,白斑,不典型增生至鳞癌,细胞核的体 积密度与面积密度是逐渐递增的(P<0.0lJ, 胞质体积密度逐渐递减(P<0.O1),细胞平均 体积和平均直径也逐渐减小(P<0.05),胞核 圆球度在各组间也有显着性差异(P<o.O1): 而细胞核比表面,等效球比表面,细胞核平均体 积及平均直径,在各组间无显着性差异(P> 0.05) 样本间两两比较.癌组与其他4组比较核 体积密度,胞质体积密度,棱面积密度,核圆球 度,均具有显着性差异(P<0.05或P<O.O1); 而细胞平均直径及平均体积无显着性差异(P >0.05).其他4组间比较各参数均无显着性差 异(P>0.05). 附表各体枧学参数在各组间的比较 注1.2,3,4,5分别代表正常牯膜,牯膜下纤维性变,白斑,不典型增生,鳞癌I*代表5 与2t5与1比较时P<OOlI代表 5与4比较时P<Oo5??代表方差不齐,经(1gx+l0)对数变换后方差齐再进行方差 分析 图1各组棱体积密度直备图图2各组棱面积密度直备图 工I____===二二=u ^_=?m 洲叫? 州…兰! 图3各组胞质体积密度直条图 讨论 体视学即二维图像的三维懈释或二维空间 的三维推断..自8o年代以来,体视学开始在 医学上得到广泛应用,使经典的形态学观察方 法由平面走向立体,实现了细胞形态定性研究 向定量发展的过渡.随着电子计算机及图像分 析技术的发展,体视学更加受到人们的关注.作 者在对口腔鳞癌及几种粘膜病变进行细胞形态 定量分析的基础上一,将体视学分析方法引入 口腔癌及癌前病变的研究. 本研究全部(10个)体视学参数中,6个参 数在各组间具有显着性差异.本研究结果表明 随病变恶性程度的提高,核在细胞中所占体积 比例增加,同时伴有核膜表面积更明显的增大, 自然胞质的体积比例减小,这正是癌细胞迅速 生长时有丝分裂增多且核异常增大等生物学及 形态学特征的体视学表现].由上述样本间两 两比较的结果,则进一步表明由正常到病变至 癌,细胞核异常增大是一个由量变到质变的过 程,在细胞形态研究中,膜面积的大小及其在不 同情况下的变化对细胞功能的分析很有意义; 本文核面积密度在各组间的明显变化,说明在 细胞核增生产生形态改变的同时必然伴有功能 改变,其生物学特征即表现为分化不良[. 细胞核平均直径与体积呈现无显着性的减 小趋势,这似乎与上述癌细胞核异常增生相矛 盾;但细胞平均直径与体积逐渐减小并具有显 中华口腔厦学杂志1994年11月第29卷第6期 着性差异,说明细胞核与细胞变化在各病变组 中的不同一性,最终仍导致核浆比例的改变,表 现为核体积密度增大,胞质体积密度减小.这与 Franklin等动物实验研究结论是一致的.细 胞平均体积与直径在各组间两两比较均无显着 性差异,这与二维参数面积,周长等相比.似 乎削弱了细胞参数在各组间的差异,但从另一 方面考虑,却相对突出了细胞核变化在恶变过 程中的意义,所以立体的三维参数能更好地反 映肿瘤发生中一些特征变化. 颗粒与圆球相差韵程度为圆球度.本研究 中核圃球度在各组间比较具有显着性差异,说 明各病变组中核形状变化趋势是不尽相同的. 两两比较时癌组与其他4组间均具有显着性差 异(P<o.01或P<0.05),反映出癌细胞核在 增生过程中有异型性的出现.尽管在其它4组 间比较无显着性差异,但癌组与病变的不典型 增生组间的差异小于与其他3组的差异,这提 示细胞多形性改变在恶变过程中的渐进性. 比表面即某一成分的面积密度与体积密度 之比.本文中核比表面及等效球比表面在各组 间无显着性差异,但有增大趋势,即核膜表面积 变化大于核体积的变化,这是否提示细胞核在 恶变过程中核膜性结构改变先于体积变化,尚 需进一步探讨. 总之,体视学参数能客观地反映肿瘤发生 过程中的生物学及形态学特征,解释了细胞核 由正常到病变至癌的量变质变过程,从而能较 好地将癌与非癌病变鉴别开,提示体视学分析 与形态定量分析在口腔癌及癌前病变研究中的 应用前景. (本研究工作中承湖南医科大学病理解剖教研室, 解放军国防科技大学图像分析仪室,天津化工情报研 究所等单位有关同志的协助与指导,特此志谢) 参考文献 l高山,刘蜀凡,沈子华,等口腔粘膜下纤维性变,白斑及 鳞癌棘细胞形态定量分析中华口腔医学杂志t1992?27t 145- 2Weibe],ER.Stereologica[princlplesformorphometryin ? j 中华口腔医学杂志1994年11月第29卷第9期 electronmicroscopecytology.1ntRevCytol,1969,26; 235. 9Baad]PAManualofquantitativepathologyincancerdiog nosisandprognosis.Berlin:SDringerVer]ogt1991:33— 99. 363 4FranklinCD,SmithCJStereo[ogicalanaJysls0histo[ogi一 ~alparameter~inexperlmenta[premaOgnanthamstercheek poachepith~Jium.JPatho[,1980,130:201. (收稿t1993—12—25修回:1994—09—15) 用KH—RTV型硅橡胶制作牙列阴模 朱明太张丽君 口腔科教学需要制作太量石膏模型'近年来.作者 试用KHRTV型模具专用硅橡胶(北京科化化学新 技术公司出品)制作牙列阴模.取得了较满意的效果. 现介绍如下. 一 ,材料的性能特点 1.KHRTV是一种室温固化型硅橡胶,由流动 的糊啦基料和催化剂两组分掏成.基本成分为:?基 质:端羟基聚二甲基硅氧烷,分子量3,6万?填料: SiO.f@交联剂;硅酸己酯}?催化剂:二月挂酸二丁基 锡 2.材料特点:?流动性好,固化收缩率低,仿真性 与尺寸稳定性很好.故复制精度高.?室温下即可固化 且不发热,不与模型材料牯合,不污染,损伤摸型因此 不需棘分离剂.?固化后具有良好的弹性和脱模性? 操作简单.可调节操作与固化时间.@制成的阴模稳定 性,弹性和抗撕裂性好,可长期使用 KH—RTV硅橡胶分为1,4四种剂型,其中2 与3适宜制作牙列阴模.而3的拉伸强度,伸长率,抗 撕强度和固化收缩率均比2要好,但其价格较高.KH — RTV硅橡胶本身为乳白色.加入适量油溶性颜料, 即可调合成浅绿,天蓝,粉红等颜色.应注意少甩粉状 颜料,如铬黄粉等,否则会降低阴模的弹性 二,阴模的制作 1.选取合适的上,下牙列模型(全口牙列,无牙领 及牙列局部缺失模型).以牙科人造石灌制的模型最 宜,以保证精确度. 2.制作围框.可用自凝塑料或石膏制作.要确保围 框内缘与模型外缘有5mm以上的空隙,模型最高处距 围框上缘也需约10mm的间距.使灌注戚型后的硅橡 胶阴模有足够的厚度.确保其良好的抗撕裂性. 3.将人造石牙列模型用粘蜡粘固于玻璃板上.放 好围框围框与模型之间的空隙要均匀,然后将围框用 粘蜡或石膏固位. 4.调和硅橡胶.用普通药物天平,按比倒(基料: 催化剂为100:1.2,2.0)将基料与催化剂称好,置于 同一害器中,用不锈锕谓l刀充分调匀. ' 5.如有条件,可将调和好的硅橡胶,置于2, 25rhmHg真空压力下.15分钟,排除气泡. 6.灌注阴模时.将腔液缓缓倒叭装有模型的围框 中着事先未抽真空捧气泡,此过程可在震荡器上完 成.灌好后继续茬蔼30分钟. 7:灌满围框,完或震荡后,在围框顶部盖一块玻璃 扳.为了节约胶斟及灌注石膏后便于脱模,可将阴模的 背后(即上颉腭盖处或下颌舌部)做成空腔.空腔的大 小,形状视具体模型而定.用蜡或石膏做成空腔的阳 型,粘固在玻璃板上.然后盖在圈框顶部即可. 8.脱模灌模后,置于室温下24小时,待硅橡胶完 全凝固后,取出阳模.硅橡胶阴模应放置3天后再使 用f若在50~70'C中加温4,6小时.当即可使用. 三,操作注意事项 操作l申应注意r?催化剂用量应适当.催化剂太 少,硅橡胶不凝固或凝固时间过长+催化剂太多,凝固 过快,不仅影响操作并使固化后阴模的弹性下降?调 和必须均匀.否则影响固化?催化荆有一定的刺激 性,操作时应注意通风及防护. 硅橡胶阴模翻制石膏模型时,要待石膏完全凝固 后,轻巧地将阴模与阳模边缘分离,然后将拇指放于硅 橡胶阴模底部的空腔中向上顶,再取出阳模.不可用力 拉撕阴模边缘.只要使用得当,阴模可长期使用. (收稿I1994—05—24) 作者单位:100081北京医科大学13"腔医学院修复科