反相高效液相色谱法分离和测定氢醌、叔丁基氢醌、2，5—二叔丁基氢醌

<食品研究与开发)2001年 12月第22卷增刊 59 5 其他作用 葱头所含甲磺丁脲有降血糖作用．可防治糖尿 病；葱头汁提取物对变应原引起的豚鼠及病人哮喘 有抑制作用；葱头含较多的半胱氮酸，能推迟细胞 老化，具有抗衰老作用；葱头所含有的活性成分可 促进钠盐排泄和水分排出，有利尿作用，可治疗小 便不畅；新鲜葱头汁或捣泥外用可治疗刨伤、挫伤、 溃疡、牙痛、头痛，减轻烧伤灼伤；鲜葱头汁与食醋 混合含嗽可治咽喉炎，与芥子油混合外用可治风湿 病，与等量食醋煮开候温内服可治赤痢：葱头煎水 内服可治胸脘痞闷、咳嗽多痰。 总之，葱头的药用活性成分多，应用广泛，有待 于我们进一步开发、挖掘它的药用价值，造福于人类。 参 考 文 献 1 江苏新 医学 院 册)1719 2 中国压科大学 卷)1803—1805 中药大辞典 上海科学技术出版杜 ，2000(下 中药辞海 中国医药科技出版杜，1996(第二 3 屠用利 ．常见病的果蔬汁调理 ．中国轻工业出版杜，2000．35 4 孟庆轩、陈国珍 食物养生 金盾出版杜，1997．66 5 棚光隆、李融等 ．高血压病食物疗法 ．上海科学技术出版杜 2000，11 收稿日期：2001．08-18 反相高效液相色谱法分离和测定氢醌、叔丁基氢醌、 2，5一二叔丁基氢醌 杜淑霞 刘庆峰 陈 弘 张坤梅 广东省食品工业研究所 广州 510315 捕 要 利用反相高效液相色谱法，一次进样 同时测定氢醌、叔丁基氢醌、2，5一二叔丁基氯醌的舍量。以 Lichrospher 125—4；RP一18e( ITt)为分离柱 甲醇+水(pH：4)=65+35(V／V)为流动相，在 278nm进行紫外 检测，整十分离过程在 6rain内完成。曲线在 0 005g／mL～0 5mg／mL浓度范围内均呈现良好的线，陛关系。样 品的加标回收率为 96．5％～102．2％。变异 系数为 0 90％～2 49％(n=6)。该简便、快速、曼敏，非常适合于日 常监督检测。 关键词 反相高效液相色谱 抗氧化剂 氢醒 叔丁基 氯醌 2，5一-z-~T基氢醌 叔丁基氢醌(TBHQ)是一种有空间位阻的酚类 自由基吸收剂，其应用范围广，可应用于各种食用 油脂和含油量大的食品中作为抗氧化剂“】+亦可应 用于 日化和饲料工业等其它领域作抗氧化剂。同 时，TBHQ具有优良的抗菌作用，对黄曲霉等食用 油制品中常见致病菌有很强的抑制作用，一剂多 能。 叔丁基氢醌可由叔丁醇及氢醌在催化剂作用 下烷基化反应而制得。反应过程中往往有副产物 2． 5一二叔丁基氢醌生成。如果反应条件控制的不好， 不但影响到叔丁基氢醌的产率，且往往有少量氢醌 (原料)和 2，5一二叔丁基氢醌残留在产品里面。因 此，无论是在生产过程为了随时掌握反应进行的程 度，控制转化率，监测产品纯度，还是在实际应用检 测抗氧化剂的用量，都需要建立一种简便、快捷的 分离和测定氢醌、叔丁基氢醌及2+5一二叔丁基氢 醌的方法。 氢醌、叔丁基氢醌及 2，5一二叔丁基氢醌的含 量可分别用容量法和气相色谱法来测定 1121，由于 容量法只能测定出含氢醌式结构物质的总量，而不 能同时测出三种物质的单独含量，需要采用气相色 谱法来协助完成测定，该方法操作繁琐，费时、费 力。目前，同时测定几种抗氧化剂的方法很多，如分 光光度法⋯；色谱法如薄层色谱、凝胶渗透色谱、气 一 液色谱等 】。但未见采用高效液相色谱法同时测 定上述三种物质含量的报道。由于高效液相色谱法 同时具备分离效率高、灵敏度高和重现性好等优点 应该是上述三种物质的理想方法。本文建立了 一 种采用反相高效液相色谱法同时分离和测定氢 醌、叔丁基氢醌、2，5一二叔丁基氢醌，一次进样同时 测定三个化合物的含量。该方法’陕速(Omin可全部 测完)、简便，且灵敏度、准确度均较好。在生产实践 维普资讯 http://www.cqvip.com 60 <食品研究与开发)2oo1年 12月第22卷增刊 中应用效果良好。 1 实验部分 1 1 仪器 高效液相色谱系统 (HPll00)，包括： 高压溶剂输送泵、自动进样器、可变渡长检测器 (可 调渡长 190～600rim)、手动控制器、HP3395积分 仪；超声清洗仪(溶剂脱气用)；微孔滤膜(0．4 m)； 酸度计。 1．2 试剂 甲醇 (色谱纯，天津科密欧化学试剂开发中 心)。 氢醌、叔丁基氨醌，2，5一二叔丁基氢醌标准品 均为日本生产。 氢醌标准溶液：准确称取 0 1000g，甲醇定容至 lOOmL．此溶液浓度为 1．00mg／mL。 叔丁基氨醌标准溶液：准确称取 0．1O00g，甲醇 定容至 lOOmL，此溶液浓度为 1．00mg／mL。2，5一 二叔丁基氢醌标准溶液：准确称取0．1O00g，甲醇定 容至 lOOmL，此溶液浓度为 1 OOmg／mL。上述溶液 使用时用甲醇稀释。 1 3 色谱条件 色谱柱 ：Lichrospher 125—4 RP一1Be( n) 流动相：甲醇+水(pH=4)=65+35 流速 lmL／min 检测波长：uv一278nm 进样量：10~uL 柱温：温室 1．4 剥定方法 用甲醇溶懈和稀释样品。以保留时间R 定性， 外标法定量。 2 结果与讨论 2．1 流动相比倒的选择：见 1 表 1 流动相比例试验表 固定流动相的流速为 1．0mL／min，改变流动相 中甲醇的含量，测定三者的峰面积和保留值。结果 表明：随着流动相中甲醇比例的减少，叔丁基氢醌 、 2．5一二叔丁基本氨醌的保留值均逐渐增加，其中， 2．5一二叔丁基氢醌增加的幅度更大些。而流动相 中甲醇比例的变化对三者测定的灵敏度影响不大 综台考虑灵敏度和保留值两项指标，由上表可看出 流动相(2)较好。分离效果如下图： (上图中三个峰从左至右分别为氢醌、叔丁基氢 醌、2，5一二叔丁基氨醌。) 2．2 测定波长的选择 对氨醌、叔丁基氨醌、2，5一二叔丁基氢醌进行 紫外光谱扫描 ，结果发现三者均在210nm和 278nm 波长下有两个强吸收峰，为减少干扰，故选择 278nm为三者的测定波长。 2．3 流动相的酸度 考虑到被测物氢醌、叔丁基氢醌、2，5一二叔丁 基氢醌都含有羟基，在溶液中呈弱酸性，需要在酸性 条件下测定才能使其完全以分子形式存在。我们固 定了上述流动相比例，用 1．0mol／L的磷酸调节流 动相的pH值分别为 2．O、3 0、4．0、5．0、6．0，测定三 者的保留值及峰面积，结果表明：在该酸度范围内， pH值的变化对灵敏度和保留值的影响不大。同时 考虑色谱柱对酸度的适应范围，故选择流动相的 pH值为 4．0。 2．4 标准曲线 在上述实验条件下，进含有氢醌、叔丁基氨醌、 2．5一二叔丁基氢醌为0、0．05mg／mL、0．10rag／ mL、0．20mg／mL、0．50rag／mL混台标准使用液各 lOlL．记录各次色谱峰面积，并绘制峰面积一氢醌、 叔丁基氢醌、2，5一二叔丁基氨醌浓度曲线。标准曲 线的回归方程为： 维普资讯 http://www.cqvip.com (食品研究与开发)2001年 12月第 22卷增刊 61 氢醌：r=0．9999 Y=7．99×lffX一49943．1 叔丁基氢醌：r=0．9987 Y=6．73×107x一148234 2，5一二叔丁基氢醌 r= 0．9999 Y=6．29×l盯一12033．5 氢醌、叔丁基氢醌、2，5一二叔丁基氢醌在 0．005～0．5rag／mL范围内均呈现良好的线性关 系。 2．5 方法精密度实验 取同一样品按本方法平行测定六次，氢醌、叔 丁基氢醌、2．5一二叔丁基氢醌测定结果的相对标 准偏差分别为 0．90％，2．00％，2．49％。 表 2 精密度实验表 2．6 回收率实验 向已知浓度的样品中加^一定量的标准溶液， 按上述色谱条件及实验方法测定，计算回收率，结果 见表 3。氢醌的添加回收率为98．4～101．O％；叔丁 基氢醌的添加回收为 97．7％～99．4％；2，5一二叔 丁基氢醌的添加回收率为 96．5％～101．7％。 表 3 回收率实验表 3．7 样品分析 用本法实测了生产叔丁基氢醌的烷基化工反 应液，以选择和控制反应条件 ，效果很好。 参 考 文 献 1 凌关庭 ．食品蒂加剂手册 ．北京 ：化学工业出敝杜．1997： 766～768 2 Food Chemicals Codex(F。cⅣ．1996)，Effective July1 1996： 4O8 3 (JAOCS)．1986．No IOPI~3—1367 4 万素英、赵亚军、季琳、王慧君 ．食品抗氧化捐 北京：中国轻工 业出版杜，1998：189--193 乌梅掺墨汁检测方法研究 卢永香 天津天狮生物发展集团有限公司 天津 301700 收稿日期：2001．07-18 摘 要 丰实验主要是采用气相色谱击．通过选择适宜溶荆二氯甲烷．束比较掺~15ecg~ 掺墨汁乌梅其成分差异 并以茴香醛为内标枷进行乌梅掺撮捡耐。 关键词 乌梅 墨汁 气相色谱 乌梅呈球形，直径 1．5—3cm。表面乌黑色或棕 黑色，皱缩不平，基部有瞬形果梗痕。果核坚硬，椭 圆形．棕黄色，表面有凹点，种子扁卵形，淡黄色，气 徽，味极酸”『。具有食用及药用价值。在乌梅中掺墨 汁可美化其外观，生产厂家利用此法可提高乌梅的 卖价，做为食品原料乌梅被人为的掺上不可食的墨 汁．最后受害的却是广大的消费者。本方法的开发 利于以乌梅为原料的厂家从进货上把关，从而避免 不必要的损失并可以减少对消费者的伤害。 1 材料与方法 l 1 材料 1．1．1 实验用乌梅原料 维普资讯 http://www.cqvip.com