丁香油抑菌效果与抑菌成分的研究

⑥ ． ／ t品-素 每食品添加剂、辅料特辑／食品添加刑 摘 要 研究表明：丁香的押茴成分富集于丁香油中； 丁香、丁香油、丁香酚、丙三醇、单硬脂酸甘油醋 丁香油对食品中常见的庸败菌和产毒素茴的生长均有 1．2 供试菌种 不同程度的抑制作用；丁香油的抑菌成分为丁香酚。 黄曲霉 r却 er 鲫 J、烟曲霉 r山p 加嘲 关键词 ：! 塑堕塾墨塞曼堕盟 了番西秀 zmJ、产黄青霉fPm mm&,ysog~man)、桔青霉rPen． Ab stract The results showed that antinficrobial co面osl— cittia~O、粘红酵母fRhodotonda J、枯草芽孢杆 tion of lilac is enriched in clove 0il，the clove oil C[111 inhibit 菌 fBacillus subtills)、金黄色葡萄球菌 f． np 1 ∞口∞w in different degreesthe gTowthof common septic andtoxin— aureus)、福 氏痢疾杆 菌 f如 flam J、鼠伤寒抄门 producing microorganisi~ in foods，and that antimicroblal 氏苗 f Saimone／／a帅 栅 肿 大肠杆菌 rEsch~richia composition of clove oil is engeno1． ∞“ 。 由本院食品微生物学实验室提供。 Keywords clove oil antimic∞blal effect food pre- 1．3 培养基 sel've CA用于培养青、曲霉；PDA用于培养酵母菌 ：营养 前 言 琼脂 用于培养细菌。所有培养基均符台 GB~789．28一 食品在储存过程中．极易受微生物的污染而导致 94标准。 腐败 ，采用 防腐剂来延缓腐败是储存食品的有效手段 1．4 供试菌孢子或菌悬液制备 之一。但在使用过程 中，人们逐渐发现有不少化学防 将上述各种供试菌种用适宜斜面培养基活化 ，以 腐剂影响人体的健康 ，因此，开发食品天然防腐剂已成 无菌生理盐水制成 1 一lO~cfu／ml的孢子或苗悬液。 为当今食品保藏研究 的热点。 1．5 方 法 ’ 丁香油是从丁香树的花蕾、叶子等提取的芳香精 1．5．1 丁香组分的分离 油 ，为我国 GB2760—86规定允许使用的食用香料。针 利用水中蒸馏法将丁香分成两部分：丁香油和残 对我国丁香资源比较丰富以及丁香在食用香料中良好 留物，将两组分做抑菌试验， 确定丁香抑菌成分分布 的抑菌效果 ，本文就丁香油对食品中常见 的腐败菌和 的组分。 产毒素菌的抑制作用进行了较深入的研究。 1．s．2 丁香油最低抑菌浓度(MIC)的测定 1． 材料与方法 将丁香油用丙三醇稀释 ，以不同浓度(以培养基量 1．1 试 剂 lOOml为标准 ，加 0 02ml、0．04ml、0 06ml、0．08ml、0 lnd ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ ⋯ 3．7 姜黄色素的耐还原性 4． 结 论 配制 Na 2SO 3浓 度 分 别为 0．012、0．06、0．25、 0 5mg／ 的色素溶液，一定时间后，测定其在425~ma 处的吸光度值 (表 2)。 由表可见 ，色素溶液随时间的 延长 ，吸光度值明显 降低．说明该色素的耐还原性较 差 。 表 2 耐还原性试验 吸 光 度 时间(h) № s0 3加^量(rag／~) O．O】2 0．06 O 25 O 5 O O 827 0 847 0 741 O 87 1 0．68 O 53 0 395 0．34 22 0．5B2 0 176 0．205 0．164 70 0．542 O 】68 0 212 0 166 4．1 柠檬 酸、维生素 C对色素的吸收峰有一定程度 的衰减，溶掖颜色变浅，所 上述添加剂对姜黄色素的 稳定性有一定程度 的影响。 4．2 苯甲酸铺、磷 酸钠对姜黄色素的吸收峰有一定 程度的增加，溶液颜色加深，所 上述掭加剂对姜黄色 素的稳定性具有保护作用。 4．3 蔗糖对姜黄色素稳定性元明显影响。 4．4 姜黄色 素有较好的耐氧化性，但耐还原性较差， 应避免与还原性较强的物质共存 。 参考文献 【1]蔺定运编著：《食用色素的识别与应用》，中国食品 出版社 ，1987。 [2]马银海等，萝 h红色素的稳定性研究，食品科学． 1997，18(11)：34—37。回 维普资讯 http://www.cqvip.com 食品添加剂、辅料特辑／食品添加剂 唯品-素 丁香油)加入相应培养基 (标准 pH值)，灭菌、冷却至 45℃后加入培养皿 (事先已加入 lml供试菌的孢子或 菌悬液)，混匀 ，适温适时培养 ，观察结果 ，以完全没有 菌生长的最低丁香油维度为丁香 油对某菌的 MIC值。 1．5．3 丁香油组分分离及各组分的抑苗试验 1．5．3．1 丁香油组分的分离 称取硅胶 G234后加入 2～3倍水，放于研 钵 中研 磨至粘稠 ，倒人涂布器 中制成薄板 ，活化 、烘干后点样 ， 放于展开剂中展开 ，于波长 2537nm紫外光下观察。 1．5．3．2 丁香 油各组分的抑菌试验 孢子或菌悬液与相应培养基混匀制成平板 ，在平 板中央放置直径 10mm的滤纸片，将 丁香油各组分滴 在滤纸 中央，以不加组分的为空白对照，定温、定时培 养后观察 并测量抑菌圈大小 。 2． 结果与讨论 2．1 丁香组分的分离 利用水中蒸馏法从丁香中提取丁香油，经计算，产 油率为 13 4％，用蒸馏后的残留物对供试菌种进行抑 制实验，表明残留物对供试菌种无抑制作用，说明丁香 的抑菌成分富集于丁香油中。 2．2 丁香油最低抑菌浓度 (MIC)的测定 本实验选用 的 lO个供试菌种是食品 中常见 的腐 败菌和产毒 素菌 ，因此 ，以它们作为研究对象有一定的 代表性 。 丁香油对供试菌种的最低抑菌浓度 (MIC)如表 1 所示 ，从表中可以看 出，丁香油对大多数的供试菌最低 抑制浓度为 0 04ml／100ml。 丁香油用于食品特别是饮料 、汤料等非油性液体 或半固体食 品需事先乳化。本实验按常规方法乳化 ， 测定不同浓度的丁香油的乳化液的 MIC，结果显示 ，经 单硬脂酸甘油酯乳化的丁香油的MIC值显著降砥，对 大多数供试菌最低抑制浓度为 0．02mlt 100m]，抗菌能 力增加一倍 ，这可能与丁香油的分散度提高有关。 表 1 丁香油的最低抑菌浓度(单位 ：mlll00m1) 供 试茼种 l两三醇乳化 单硬脂酸甘油酯乳化 黄曲霉 0 04 0．02 烟曲 窑 0．04 0．02 产黄青霉 0．04 O 02 桔青霉 0．04 O．02 粘缸酵母 0 04 0 02 枯草 芽袍杆茵 0 08 0．06 叠黄 色葡萄球茵 0 02 0．01 福氏痢疾杆苗 0．04 0 02 鼠伤寒沙门氏茵 0．02 0 01 走肠杆菌 0．02 0．01 2．3 丁香油组分分离及各组分的抑菌试验 丁香油为混合物 ，可通过薄层层析法将各组分分 离 ，分离得到的各组分对供试菌种进行抑制试验，得到 丁香油的有效抑菌成分。 2．3．1 丁香油的薄层层析 丁香油在硅胶薄层板上点样，在展开剂(氯仿 ：石 油醚 =1：1)展开后 ，于波 长 2537nm紫外光下观察， 如图 1所示 ，从图中可以 看 出，丁香油的薄层板上 有三条谱带 (I、Ⅱ、Ⅲ)， 其 中Ⅲ带组分含量最多 ， 且 值与标准丁香酚相 同。将丁香油薄层板上的 各层析谱带连同硅胶分别 刮下，各组分角无水乙醚 提取 ，得到各组分 丁香油 丁香酚 图 1丁香油的薄层层析图 2．3．2 丁香油各组分的抑菌试验 ’ 将薄层层析分离得到的丁香油三个组分分别对黄 曲霉、产黄青霉 、粘红酵母和大肠杆菌进行抑制试验 ， 如表 2所示 ，结果表明 ，只有 ⅡI组分有明显的抑菌圈， 而其余两组分无抑菌圈，故Ⅲ组分 (即丁香酚)是丁香 油 的有效抑菌成分。 丁香酚 ，其化学名称为 2一甲氧基 一4一烯丙基苯 酚 ，即有芳香环而且芳香环上有极性基团，它能与菌的 某些酶的活性基团结合 ，破坏正常的代谢功能，从而影 响 了微生物的生长。 黄曲霉 产黄青霉 粘缸酵母 走肠杆菌 0 O O O Ⅱ 0 0 0 O Ⅲ 38 42 32 30 空 白对照 O 0 O 0 注：表中数值表示抑茵圈的直径(单位：mm)，数值 越 大，抑茵效果越好。 3． 结 论 3．1通过对丁香组分的分离 ，发现丁香蒸馏后的残 留 物对供试菌种无抑制作用，丁香的抑菌成分富集于丁 香油中。 3．2 丁香油对食品上常见 的腐败 菌和产毒素菌的最 低抑制浓度 (MIC)，大多为 0．04mlt100m]，经乳化剂单 硬脂酸甘油酯乳化后的丁香油乳化液 MIC值明显降 低，即抗菌效果明显增强。 3．3 经薄层层析法分离 ，确认 丁香油的有效抑菌成 分为丁香酚。 3．4 丁香油在食用浓度范围 内安全无毒 ，且具 有天 然食品防腐作用 ，它不但是调味科，对需要辛辣调味的 食品，不失为 良好的天然防腐剂。 参考文献 (略)回 维普资讯 http://www.cqvip.com