荔枝核对HBsAg和HBeAg的体外抑制作用

科技进展《Advances Science＆Technology} 荔枝核对 HBsAg和 HBeAg硇傩皇 抑制作用 杨 燕 义祥辉 (广西师范大学化学化工系，广西 桂林 541001 陈全斌 谭明雄 *广西玉林师范学院化学系，广西 玉林 537000) 摘要 分别用水(过柱)、95％乙醇、50％乙醇、水(不过柱)提取荔枝棱的药用有效成分 ，应用 EUSA法检测其对 HBsAg (乙型肝炎病毒面抗原)和HBeAE(乙型肝炎病毒 E抗原)的体外抑制作用。结果表明4种药物对HBsAg和 HBeAg均 具有显著的抑制作用。 关键词 荔枝核 HBsAg H~eAz 抑制作用 荔 枝 桉 (Semen Litehi，SL)为 无 患 子 科 (Sapindaceae)植物荔枝(LJtchi chinensis Sonn．)的干燥 表 2 催化剂用■对芥琏酰胺合成的影响 2．2 芥酸酰胺的精制 芥酸酰胺的精制也就是把游离酸、腈、发色体等 杂质除去，精制的方法一般有两种：一种是简单的重 结晶，以95％乙醇为重结晶溶剂。这种方法原理简 单，但要使用太量的有机溶剂，并要求趁热过滤，给太 生产带来操作不便，且精制的效果也不太理想。另一 种是分子蒸馏提纯法，也就是本文中介绍的方法。此 法提纯效果很好，但工艺条件比较苛刻，对设备要求 高，工业生产中适宜选用此法来生产高纯度的芥酸 酰胺 成熟种子。多年来，sL的药理作用研究受到研究者 们的普遍重视。研究发现：SL有高效和长效的降糖 ⋯ 、 、 日 笪 迨 此法制得的芥酸酰胺热稳定性好，含腈量低，游 离酸含量少，可以广泛用于塑料、橡胶、印刷等行业。 据实验结果可得：烷基锡催化台成芥酸酰胺的反应时 间以 10～12 h为宜，反应温度在 160～170℃较佳，通 人氨气的速度为l1．2 L／h，催化剂用在0 5％～1％最 佳，若添加 1％用量的 Na3PO ·12HzO则效果更好。 参考文献 1 柴常哇 ．四川化工，1985，(4)，3O～33 2 魏连吉 ．表面活性剂工业，1985，(4)，1～5 3 CA 60：15816 4 CA 77：139452 g 5 蓝仲薇 化学世界，1990，31(8)，350～351 6 USP 3816483 7 USP 3480655 (恒稿 日期 2001—05一I 7) Synthesis of Erucamide by Alkyltin Catalysis Yuan Jiacheng Liu Changchun lJiagnsu Food CoHeye，ltuaian 223001，China) Abstract In present of olkyhin of new type catalyst，emcamide is synthesited at atmospheric pressure with fhe re。0 ry 0f 95％ ·The efleets of reaction time，reaction temperatllre and quanti【v of catalyst are disc岫sed．The 0Dtimum reaction conditions are determined ． Keywords Erucanride，Alk yltin ， Catalysi8．Svnthesis 维普资讯 http://www.cqvip.com 科技进展{Advances Science＆Technology) 2001年第7期-雹置圃 作用，并已用于糖尿病及其并发症的治疗．ti；能调节 内、外源性血脂代谢紊乱，具有抗氧化作用 ；还是一 种能使 HBsAg转阴且仅次于夏枯草的高效抑制 liBsAE的药物_3_4 J：但是，有关提取荔枝核药用有效 成分对 HBeAg的体外抑制作用研究迄今还未见详细 报道。本文采用 4种不同条件提取荔枝桉的药用有 效成分，应用 EL1SA法检测其对 HBsAg和 HBeAg的 体外抑制作用。结果报道如下。 Ⅱ 塞堕壑坌 1．1 实验 荔枝核购于广西玉林市医药公司，粉碎成粉末 状。 一淀粉酶，95％食用酒精，DA一201型大孔树脂 为上海医药工业院产 品。乙型肝炎两对半诊断试剂 (酶联免疫吸附实验，ELISA)，由上海科华生化试剂实 验所提 供。人乙型肝炎病毒感染 血清：HBcAg和 HBeAg阳性血清，由乙型肝炎患者提供。实验时用 PBS(磷酸缓冲液)配制成所需浓度的药液供实验用。 1．2 仪器 ZFQ85A旋转蒸发仪，SHZ—D(Ⅲ)循环水式真空 泵 ，LD4一 低速离心机。 1．3 方法 1．3．1 荔枝核药用有效成分的提取 荔枝核干粉 (500 g)分别 以水 、95％乙醇、50％乙 醇回流提取 3次(用水首次回流后需加入 a一淀粉 酶)。回收乙醇后用水稀释，离心分离。滤液经硅胶 柱层析，以80％乙醇洗脱，真空于燥，分别得到化合 物 A(10 g，得率 2％)，化合物 B(12．6 g，得率 1．4％) 和化合物 c(7 g，得率2．52％)= 荔枝核于粉(500 g)加入蒸馏水回流提取 3次， 离心分离，滤液经真空干燥，得到化合物 D(1 51．1 g， 30 28％)。 1．3．2 筛选 乙型肝炎血清 用 ELISA法测定 各血 清样品，选 择 HBsAg和 HBeAg滴度为 1：64的血清各3份。 1．3 3 检 测药物对 HBsAg和 HBeAg的体 外抑 制作 用 将药液 pH值诃至 7．4，用 PBS稀释为 4种不 同 浓度的药液。将不同浓度的药液分别与等容量的肝 炎血清混台 (肝炎血清中的药物浓度分别为 0．o4、 0 16、0．64和 2．56％)，用 PBS与肝炎血清混合作阳 性对照，PBS与阴性血清混合作阴性对照。置 370c水 浴中作用4 h，按 ELISA法测定各个血清样品的 OD 值[ 61。 目 结星量过 2．1 药物对 HBs如 具有显著的抑制作用 药物 A，B，C，D分别在 0 16，0．04，0 04，0．I6％ 以上浓度时对 HBsAg具有显著的抑制作用(表 1)，药 物 B对HBsAg的抑制作用最显著。Liu Yaguang将荔 枝核的乙醇提取物与齐敦果酸、苦瓜皂甙混台，作用 于 cck造成肝损伤的小鼠模型上，发现其能增强小 鼠肝脏蛋白质与RNA的合成- 。但郑民实等使用反 相被动血凝抑制试验(nPm)检测荔枝核水、乙醇提 取物对 HBsAg的抑制作用 ，结果发现 ：荔枝桉水提取 物具有高效抑制 HBsAg的作用；而乙醇提取物则无 效 。是否因检测方法不同而导致结果有异，有待进 一 步探讨 表 1 药物对 I4BsAg的体外抑制作用fx一±S OD 维普资讯 http://www.cqvip.com 科技进展《Advances Science＆Technology) 表2 药物对 HBeAg的体外抑制作用【x一±S OD 与阳性组比较 ：*P<0 05．**P(0．01 2．2 药物对 HBeAg具有显著的抑制作用 药物 A，B，C，D分别在 0．04，0 o4，0 16，0．o4％ 以上浓度时对 HBeAg具有显著的抑制作用(表2)，药 物 A对 HBeAg的抑制作用最显著。提示荔枝核中的 某些极性物质对 HBeAg的抑制作用。 圈 堕 适 乙型病毒性肝炎系由乙肝炎病毒(HBV)所致一 种常见的多发性传染病，本病患者与乙型肝炎病毒表 面抗原(HBsAg)携带者竟达 2亿人群，且常导致肝硬 化和肝癌_3 。目前临床上缺乏真正的有效制剂，故有 必要寻找新药。而荔枝核的水、乙醇提取物对 HBsAg 和HBeAg均有显著的抑制作用。荔枝核资源丰富， 价廉，毒性低，副作用小，如果能确定荔枝桉 中对 HBsAg和HBeAg有抑制作用的成分，必将有着广阔的 应用前景 参考文献 1 郑琳颖，韩超，谱竟锵 中医药学报，1998，5： 5l一53 2 潘竟锵，刘惠纯等 广东药学，1999，9(1)：47 ～ 5O 3 郑民实，张玉珍等．中西医结合杂志，1990，10 (9)：560—562 4 郑民实，郑有方 ．中医杂志，1989，11：47～48 5 黄仁彬，曹庆荣 ，黄轩清，林军，贾建生，甘俊 广西医学，1992，14(6)：392—393 6 黄仁彬，梁钢，戴马季，臧林泉，黄志明，刘元 广西中医药，1999，22(3)：46—49 7 Liu Yaguang．United States Patent 4985248， 1991，(1)：15 8 邦民实，李桦，韩漪萍．中草药，1987，18(1O)： 27 (收稿 日期 2001—05—28) Inhibition of semen litchi on hbsag and hbeag Yang Yan Yi Xianghui Chen Quanbing Tan Mingxiong (Depatrment of Chemistry and Chemical Industry ，Guangxi Norraal Universi叶 ，Guilin 541004： Department of Chemistry，Yulin Normal University Yulin 537000) Ab t朋d Th。pharmaceutical compositions of Semen Litchi are extracted by wate(silic0 l c0lufIlI1)，95％ethanol， 50％ ethanol，wa【er arid surveyed their inhibition on HBsAg and HBe The results w “ i B inhibiti0n 0n HBsAg and HBeAg． Keywords Semen litchi ， HBsAg，HBeAg，Inhibition 一 26 维普资讯 http://www.cqvip.com