化淤通络胶囊对气虚血淤脑缺血大鼠血液流变学的影响

化淤通络胶囊对气虚血淤脑缺血大鼠血液流变学的影响 化淤通络胶囊对气虚血淤脑缺血大鼠血液 流变学的影响 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2011VOL.22NO.9时 珍国医国药2011年第22卷第9期 表6正交设计方差(完全随机模型) 变量兰立旦宦鏖望立堕堕 第1列214.382107.1983.5O0.O118 第2列57.10228.5522.250.0430 第3列0.6020.3010230.8096 第4列2.5621.28 误差2.5621.28 表7不同提取方法 对甘草酸溶出量影响的结果比较(i4-s) 酸提取方法甘草酸溶量 !: 传统煎煮处理45.67?3.51 蒸气爆破处理52.oo?4.00? 气爆+酶解处理67.91?1.47一? 与传统煎煮处理比较,P<0.05,一P<0.叭;与蒸气爆破处理比 较,?P<0.05,??P<0.01 4结论 提高原料有效成分的得率,是中药加工工艺的核心目的.本 文应用蒸气爆破方法,可使中药材组织结构中的纤维素结晶度提 高,聚合度下降,半纤维素部分降解,木质素软化,横向连结强度 下降.在充满压力蒸气的物料骤然减压时,孔隙中的气剧膨胀, 产生"爆破"效果,能够部分剥离木质素,将原料撕裂为细小纤 维J.在提取过程中,由于蒸气爆破后的甘草组织结构遭到充 分破坏,作为提取的主要障碍一细胞壁发生破裂,传质阻力大大 减少,因此,甘草能够在较短时间内溶出较多量的甘草酸,较未作 此处理直接进行煎煮提取的甘草粉,其甘草酸溶出量具有显着性 提高(P<0.05). 本文将蒸气爆破后的甘草粉末,再用纤维素酶和木质素纯酶 液进行酶解反应,更大程度的减弱或消除了纤维素,木质素对甘 草有效成分的结构阻隔作用,使得甘草酸等有效成分能够与 溶剂迅速,充分接触和溶解扩散,提高后者的传质速率,进一步加 ,气爆+酶解处理的甘草粉末,较未作 速了甘草酸的溶出.因此 处理直接进行煎煮提取的甘草粉末,其甘草酸溶出量具有极显着 的提高(P<0.01),较单纯蒸气爆破甘草粉的甘草酸溶出量也有 显着提高(P<0.05). 值得指出的是,本文应用物理一生物耦联方法,采用蒸气爆 破+微生物酶(纤维素酶和木质素酶)酶解新工艺进行中药成分 提取,只是破坏中药原料组织细胞结构中的纤维素和木质素等非 药学成分,对所处理中药原料有效成分的化学结构没有任何影 响.由于本提取方法没有化学溶剂参与,可有效规避环境污染和 对人体健康的潜在威胁;本方法还明显缩短中药传统煎煮提取所 需的时间,减少能耗.中草药种类繁多,有效成分结构复杂,提取 工艺远未完善,本文所采用的新工艺如能够在中药提取领域中推 广,将在充分利用中药宝贵资源,节约能源,清洁生产和环境保护 多方面发挥有益作用,有望成为进军中药现代化宏伟目标的有效 途径之一. 参考文献: [1]郝飞.甘草酸国外研究进展[J].中国药房,2001,12(8):500. 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ThethreeHuayutongluocapsulegroupsreallyhadremark~tblecontrolactionto hemorrheologyoftheischemiaapoplexy.? NonotabledifferencewasshownwhencomparingthegroupswiththeHuayutongluo capsuleofhighdose,moderatedose,lowdoseadministration,indicatingtheclinicalpracticebythesmalldosage(0.4g/kg.d)was suitable.ConclusionThetreatmentofpatientswithischemiaapoplexybyeliminatinghaemo stasisandfreeingchannelscapsuleis undoubtedly. Keywords:Ischemiaapoplexy;Hemorrheology;Eliminatinghaemostasisandfreeingchan nelscapsule 缺血性中风是一种发病率高,致残率高,危害性大的世界范 围的疾病,严重威胁着人类的健康.无论发达国家还是发展中国 家,缺血性中风的预防和治疗都是重大的问.现代医学认为其 发生与多种因素相关.中医对缺血性中风有独特的认识和治疗 效果,已成为预防和治疗缺血性中风不可或缺的手段. 1材料 1.1动物雄性健康大鼠Wistar种80只,体质量(300?20)g,均 为14月龄,一级动物(合格证号:JI』医2501115),由泸州医学院 实验动物科提供. 1.2药品及试剂化淤通络胶囊,泸州医学院附属第二医院制剂 室制备,批号:040326;电热恒温加热仪(FASCO—N型,重庆大学 维多生物工程研究所);低温离心机(LDZ4—0,8型,北京医用离 心机厂制造);全自动血流变快测仪(FASCO一3010型,重庆大学 维多生物工程研究所). 2方法 2.1动物分组将Wistar雄性大鼠6o只随机分为6组:正常组, 假手术组,模型组,化淤通络胶囊大剂量组,化淤通络胶囊中剂量 组,化淤通络胶囊小剂量组.每组1O只.. 2.2制作中医证候的动物模型根据中医"饥则损气""劳则气 耗""气虚则血淤"的理论.假手术组和模型组,化淤通络胶囊大 剂量组,化淤通络胶囊中剂量组,化淤通络胶囊小剂量组.动物 均采用饥饿,游泳,寒湿,高脂饮食喂养10d,室温保持17?.正 常组给予普通饲料,不做特殊处理. 2.3制作现代医学疾病动物模型中医理论造模后,实验的第 l1天,开始手术.模型组及用药组采用经右侧颈内动脉插线建 立大脑中动脉栓塞(MCAO)动物模型,假手术组分离出血管后, 不穿线.2h后用乙醚麻醉模型组及用药组大鼠,将栓线拔出5 mm左右. 2.4给药自造模之日起,各用药组每日定量灌胃给药1次连续 10d,剂量为:化淤通络胶囊大剂量组[3.6g/(kg?d)],化淤通 络胶囊中剂量组[1.8s/(kg?d)],化淤通络胶囊小剂量组[0.9 g/(kg?d)].正常对照组及模型组,假手术组每天定量灌服等 . 容生理盐水1次 2.5采血采用体外心脏采血法.于手术后第11天,开始采血 并收集实验标本.先将大鼠按照0.3ml/100g腹腔注射 1%戊巴比妥钠麻醉后,固定在手术台上.用手指触摸大鼠心尖 搏动最明显处,然后用碘酒,酒精消毒.用采血针插入心脏,见有 回血时将采血针另一头插进试管内,可见血液喷射而出.抗凝试 管内采血5ml.用做血液流变学检测. 2.6血液流变性指标采集的血液在4h以内做血液流变性检 测. 3结果 3.1宏观指标 3.1I1气虚症状倦怠嗜睡,精神萎顿,四肢蜷缩;活动性差,攻 击性,对抗性行为减少;不思饮食,粪便稀溏;毛发稀疏易脱落,干 燥枯黄无光泽. 3.1.2血瘀症状大鼠舌质较对照组明显绛紫暗淡;尾部自尖至 根出现不同程度的皮下瘀紫;眼球较对照组由鲜红转为暗红或淡 红. 3.1.3神经功能缺失评分0分:无神经损伤症状;1分:不能完 全伸直对侧前爪;2分:向对侧转圈;3分:向对侧倾倒;4分:不 能自发行走,意识丧失.1,4分表示模型成功. 3.2微观指标实验结果表明模型组大鼠的全血黏度(高,中,低 切),血浆黏度,红细胞压积,血沉与正常对照组比有显着性差异 (P<0.05,P<0.01),提示血液的高凝状态可能是血淤性血栓性 疾病的病理基础,这与中外文献报道一致.化淤通络胶囊大,中, 小剂量组与模型相比,全性黏度(高,中,低切),血浆黏度,红细 胞压积,血沉明显下降(P<0.05),提示化淤通络胶囊有改善血 液流变学的作用.结果见表1. 表1化淤通络胶囊对大鼠血液流变学的影响(x?) 与正常组比较,一P<0.O1;与模型组比较,P<0.05;与正常组比较,P>0.05 4讨论 所谓血液的流变学特性,也即血液流变性,是指血液及其有 形成分的流动及变形的特性,包括血液的黏弹性,触变性以及血 ? 2162? 细胞的变形,聚集以及与血管内皮细胞的相互作用等特性.一般 来说,血液流变性障碍包括血液粘度的增高和降低,但最有意义 的是血液黏度增高,因此,通常说的血液流变学障碍是指血液黏 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2011VOL.22NO.9时 珍国医国药2011年第22卷第9期 度的异常的增高. 缺血性脑血管疾病最常见的病因是血管的粥样硬化,狭窄致 使脑部血液供应障碍,缺血,缺氧引起脑组织坏死软化,血液流 变性障碍对此病发展确有促进作用.临床检测和实验研究均已 证实,这类患者的红细胞变形性降低和聚集性增高,血小板活性 增强,血液呈明显的高黏滞状态.这些物质可能与患者的血脂, 纤维蛋白含量增多,血细胞比容轻度升高以及血浆中血小板激活 物质增多有关. 化淤通络胶囊是在中医药理论指导下,在长期临床实践的基 础上结合大量文献研究形成的纯中药复方制剂.祖国医学认为, 缺血性中风好发年龄在本病好发年龄在40岁以上,尤以50—70 岁为多.因为中年以后随着年龄的增长,气血渐衰的体质特 点."元气既虚,必不能达于血管,血管无气,必停留血瘀". (《医林改错》),故气虚是病变的一个基本环节,血淤是核心, 血瘀贯穿疾病始终,气虚血淤是本病的病理机制.淤血阻滞脑 络,脑髓失养,可导致全身运动和感觉功能障碍,出现健忘,言蹇 舌强,半身不遂,麻木不仁等症状.因此气虚血淤是缺血性中 风病的最常见证型,该病机贯穿于中风病始终.根据本病的病 机,以"益气化淤通络"为法,经现代工艺提取形成纯中药制剂一 化淤通络胶囊. 方药组成:黄芪,水蛭,地龙,大血藤,桂枝等.黄芪擅长补 气,对于气虚血滞的麻木或半身不遂可补气以行滞.气为血之 帅,气行则血行;桂枝辛温,能散能行,能活血化瘀.如桃核承气 汤治疗"其人如狂,少腹急结"之蓄血证,以桂枝辛温,通经活血 为君,助桃仁破血行淤,共同完成祛淤之目的;地龙通行经络;水 蛭咸苦人血分,功擅破血逐淤;大血藤能活血通络.诸药合用,共 奏补气活血通络之功. 中药药理学研究发现:黄芪多糖可增强血管内皮细胞与白细 胞的黏附,并对IL一1,TNF—Ot促进内皮细胞与白细胞黏附有协 同作用.提示黄芪多糖通过增强淋巴细胞一血管内皮细胞黏附, 促进淋巴细胞穿越内皮细胞进行细胞再循环,以利于免疫细胞接 触外来抗原,从而扩大免疫反应,故黄芪多糖促进血管内皮细胞 与白细胞黏附,是其增强机体防御机能机制的一方面.黄芪能明 显抑制血小板的聚集其机理是通过抑制血小板钙调蛋白而使磷 酸二酯酶的活性下降,使血小板内cAMP含量增加所致.大血 藤水溶提取物能抑制血小板聚集,抑制血栓形成,提高血浆 CAMS水平,提高试验动物耐缺氧能力.路英华等以水提取, 盐析层析法从钼齿远蚓中制得蚯蚓纤溶酶,该酶具有纤溶及纤溶 酶原活剂活性,可直接溶解纤维蛋白及血凝块.蚯蚓酶十二指 肠给药(小鼠)50mg/kg,30min即可出现明显抗血栓作用.蚓激 酶是从蚯蚓中提取的蛋白组分,具有显着的抗凝,溶栓作用.体 外实验表明,蚓激酶能延长凝血时间和溶解血块,进一步实验尚 发现能直接降降解蛋白;体内实验同样也显示具有类凝血酶及类 纤溶酶样作用.对牛血管内皮细胞的实验表明,有刺激血管内皮 细胞释放t—PA的作用.现代医学研究证明水蛭含有多肽类,肝 素,抗血栓素以及溶血酶等主要成分,其中分离出的活性成分可 分为两大类:一类是直接作用于凝血系统的成分,包括凝血酶抑 制剂,以及其他抑制血液凝固的物质,如水蛭素(Hirudin),菲牛 蛭素(Bufrudin)等;第二类是其他蛋白酶抑制剂及其活性成分,如 溶纤素(Hirudin),待可森(Decorsin)等.水蛭素可抑制凝血酶 的促凝作用,使凝血过程减慢,其作用不需抗凝血酶一?和其他 辅因子的协助.水蛭素除了与血浆中游离的凝血酶结合外,也能 中和与纤维蛋白结合的凝血酶.其主要作用机制是抑制凝血酶 上凝血因子一I的结合位点,使凝血因子一I不能和凝血酶结 合,从而直接抑制了凝血过程.史小莲等实验研究证实,水 蛭素热提取物可减轻大鼠静脉血栓的湿重和干重,抑制静脉血栓 形成;延缓大鼠颈总动脉血栓形成时间(OT),抑制动脉血栓形 成,减轻大鼠血小板血栓的湿重,抑制血小板血栓的形成.水蛭 微粉还能使早期脑梗塞患者血浆内皮素(ET)含量降低".化 瘀通络胶囊是以传统及现代药理理论为立论依据,具备辨证论治 与辨病论治的组方优势,全方体现了治疗缺血性中风主病主证用 主方的特点. 参考文献: [1]候熙德.神经病学,第3版[M].北京:人民卫生出版社,2001. 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