肾阳虚大鼠垂体靶腺轴功能动态变化的研究

肾阳虚大鼠垂体靶腺轴功能动态变化的研究 肾阳虚大鼠垂体 靶腺轴功能动态变化的研究 肾阳虚大鼠垂体 靶腺轴功能动态变化的研究 作者:马娜，王建红 闵建新，王敏璋 【摘要】 目的研究肾阳虚 大鼠垂体-靶腺轴功能的动态变化，探讨肾阳虚证的动态变化 规律 。 方法60只SD大鼠，随机分为正常组和模型组。模型组用氢化可的松 注射液后肢肌肉注射，连续29 d。分别于第15，23，30天取大鼠血 清放射免疫法测定垂体-靶腺轴激素(TSH，T3，T4，FSH，LH，T，ACTH， CORT)的含量，同时取垂体和靶腺(甲状腺、肾上腺、睾丸)称取重量。 结果肾阳虚模型组第15，23，30天垂体-靶腺轴激素水平不断下降， 且垂体和靶腺激素下降程度一致;肾阳虚模型组在第15,30天出现 垂体-靶腺轴激素水平的降低，垂体、靶腺重量减轻;与模型组15天 比较，模型组中期(23天)垂体-肾上腺轴与垂体-性腺轴的波动幅度 较垂体-甲状腺轴明显。结论肾阳虚时，存在垂体-靶腺三轴功能的同 时低下，相对于垂体-甲状腺轴，垂体-性腺轴和垂体-肾上腺轴激素 水平变化更敏感。 【关键词】 肾阳虚大鼠; 垂体-靶腺轴; 功能; 动态变化 Abstract:ObjectiveTo observe the dynamic changes of function on the pituitary-target gland axises of the kidney-"yang" dificient rats,and to explore the change law of kidney "yang" dificient syndrome.MethodsThe rats were given hydrocortisone by intramuscular injection for 30 days to make dificient of kidney-"yang" models. Hormone contents(TSH,T3,T4,FSH,LH,T,ACTH,and cort)in serum of the pituitary-target gland axises were detected by radioimmunoassay on day 15,day 23 and day 30. Then pituitary, thyroid gland, adrenal gland and testis were measured.ResultsIn model group, from day 15 to day 30, the hormones of pituitary-target gland axises were decreased unceasingly, and the drop degree of pituitary and target glands was consistent. Descendent hormone of the pituitary-target gland axis,decreased target gland and deteriorated pathologic morphology in model group occurred from day 15 to day 30;compared with day 15,on day 23,the homones of pituitary-sex gland axis and pituitary-adrenal gland axis fluctuated at higher level than pituitary-thyroid gland axis.ConclusionThe study indicates that the dynamic hypofunction of pituitary-target gland axises arose in the kidney "yang" dificient rats, the hormone changes of pituitary-sex axis and pituitary-adrenal gland axis are more sensitive than those in pituitary-thyroid axis. Key words:Kidney-"yang" deficient rats; Pituitary-target gland axises; Function; Dynamic changes 自明清以来，中医一直认为肾为脏腑之本，十二经之根，先天之本在 于肾。肾阳主导一身之阳气，火衰其本则阳虚之证迭出。因此肾阳虚 证一直是中医的研究重点。研究证实，肾阳虚与 的神经内分泌系统 有关，肾阳虚证在下丘脑-垂体-靶腺(肾上腺皮质、甲状腺、性腺) 轴有不同环节、不同程度的功能紊乱。对于肾阳虚大鼠垂体-靶腺轴 的研究，我们具备良好的实验基础[2,5]。随着研究的深入，发现中 医的“证”是一种综合的功能态，既是相对稳定的，又是动态、可 、 可转化的。为了更全面研究肾阳虚时的病理变化，本文氢化可的松肌 肉注射这一常用方法复制大鼠肾阳虚模型，动态观察模型早期(15 天)，中期(23天)，晚期(30天)的垂体-靶腺轴激素以及靶腺形态学 变化。 1 材料 1.1 动物体重200,250 g的健康SD雄性大 鼠，合格证号:0022036，许可证号:SCXP(沪)2003-0002，由上海西 普尔-必凯实验动物有限公司提供，室温(20?2)?， 自然 光照，自 由进水进食。 1.2 试剂与药品 0.9%氯化钠注射液，上海长征富 民药业华中有限公司产品，产品批号:05062115;氢化可的松注射液， 天津金耀氨基酸有限公司产品，批准文号:国药准字H020886;促甲 状腺激素(thyroid-stimulating hormone，TSH)、三碘甲腺原氨酸 (3,5,3′-triiodothyronine，T3)、四碘甲腺原氨酸(thyroxine，T4)、 促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone ，ACTH)、皮质醇 ( cortisol ，CORT)、促卵泡激素(follicle stimulating hormone， FSH)、黄体生成素(lutnizing hormone，LH)、睾酮(testosterone， T)，放射免疫试剂药盒由北京北免东雅生物技术研究所提供。 2 方法 2.1 分组与造模 2.1.1 动物分组 取雄性SD大鼠60只，适应5 d，随机分为正常对照组，肾阳虚模型组，每组30只。 2.1.2 造模方法正常对照组:用生理盐水(0.9%的氯化钠溶液)0.3 ml后肢肌肉注射，每天1次，自由饮水、饮食，连续29 d;肾阳虚模型组:氢化可的松注射液充分混匀，按2.5 mg/100 g后肢肌肉注射，1次/d。自由饮水、饮食,连续29 d。 2.2 生物学指标的测试 为了获得可靠实验数据，对动物采取平行处理，两组动物分别在第15天(10只)，23天(10只)，30天(10只)处死，取动物血清用放射免疫分析法样品中TSH，T3，T4，FSH，LH，T，ACTH，CORT的含量。 2.3 学方法 各组数据均以?s表示,组间比较用t检验,在SPSS10.0上完成。 3 结果 不同时期动物出现不同程度的体重下降，活动减少，反应迟钝，喜扎堆，畏寒喜暖，体毛枯萎，肛周污染，采食量饮水量减少等症状。模型组15 d表现为轻度，23 d加重，30 d最严重。生物学指标测定结果见表1,4。表1 大鼠血清TSH，T3，T4的动态变化表2 大鼠血清FSH，LH，T的动态变化表3 大鼠血清ACTH，CORT的动态变化表4 垂体、睾丸、甲状腺与肾上腺重量的变化与正常组比较， **P0.01;与模型组15 d比较，??P0.01;与模型组23 d比较，??P0.01;n=10