[word doc]异丙酚对内毒素血症兔肠道的作用

[word doc]异丙酚对内毒素血症兔肠道的作用 异丙酚对内毒素血症兔肠道的作用 医学创新2010年8月第7鲞期!!!坐塑:::!: 异丙酚对内毒素血症兔肠道的作用 梅勇徐鑫荣 ? 23? ? 基础研究? 【摘要】目的探讨异丙酚对内毒素血症兔肠道的作用.方法连续静脉内注射内毒素复制内毒素血症模 型.新西兰大白兔40只,随机分为5组,每组8只.A组为空白对照组;B,C,D,E组均给予内毒素(600kg).C, D,E组均为内毒素注入后30min后予以异丙酚持续静脉泵入[C组5mr,/(kg?h),D组10mg/(kg’h),E组15ms/ (kg?h)].4h后测定血浆二胺氧化酶(DAO)的活性.测定小肠髓过氧化物酶(MPO)活性,超氧化物歧化酶 (SOD)活性,脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的含量.结果与B组相比C,D,E组均能不同程度的降低DAO的活 性,小肠MPO活性,增加小肠SOD活性,降低小肠MDA含量(P<0.05).结论异丙酚对内毒素血症兔肠道具有保 护作用,并非异丙酚剂量越大效果越好. 【关键词】内毒素血症;肠道;异丙酚 EffectsofpropofolonintestineofrabbitswithendotoxemiaMEIYong.XUXin—rong.People’sHospitalofJiangsuPrfJ一 ince,Nang210029,China 【Abstract】 ObjectiveTostudytheeffectsofpropofolindifferentdosesonintestineinrabbitswithendotoxemia. coillipo MethodsEndotoxemiawasreplicatedbycontinuousinfusionofE— p0lysaccharides(LPS)inrabbits.FoayNew Zealandrabbitswererandomlydividedinto5groups:A,normalcontrols(n=8);B,LPSgroup(n=8),receivingintravenous endotoxin(LPS600p.g/kg);C,low—dosegroup(n=8);D,medium—dosegr oup(n=8);E,high—dosegroup[n=8,re— ceivingpropofol5mg/(kg?h),10me,/(kg?h)and15mg/(kg?h)respectivelyandLPS600g/kg].Thespecimens werecollected4hourslater.Weobservedthefollowingchanges:plasmadiamineoxidase(DAO)activity,intestinetissuemy- eloperoxidase(MPO)activity,intestinetissuesuperoxidedismutase(SOD)activity,intestinetissuemalonaldehyde(MDA) content.ResultsDAO,MPOandMDAcontentingroupC,DandEdecreasedsignificantlycomparedwiththoseofgroupB (P<O.05).SODactivityingroupC,DandEincreasedmarkedlycompared withgroupB(P<0.05).ConclusionPropofol hasaprotectiveeffectonintestineinrabbitswithendotoxemia,whichisnotpo sitivelycorrelatedwiththedosage. 【Keywords】Endotoxemia;Intestine;Propofol 革兰阴性杆菌引起内毒素血症以及由其诱导的多器官 衰竭仍然是危重症患者死亡的最常见原因之一….内毒素 血症可造成肠道损害,加重肠道黏膜屏障功能损害以及肠源 性感染.近年研究显示,异丙酚有效抑制中性粒细胞参与炎 性反应的多个环节,具有拮抗机体过度炎性反应的效应J. 本实验通过对血浆DAO的活性及肠道酶学指标的检测,观 察不同剂量异丙酚对内毒素血症兔肠道的作用. l与方法 1.1材料内毒素(Sigma公司,美国);异丙酚(AstraZeneca UK);SOD试剂盒,MPO试剂盒,MDA试剂盒(南京建成生物 工程研究所提供);邻联茴香胺,尸胺二氢氯化物,辣根过氧 化物酶和DAO液(Sigma公司,美国). 1.2方法 1.2.1动物模型新西兰大白兔40只,雌雄不限,体重 2.50,2.70kg,江苏省农科院提供.实验前8h禁食,4h禁 饮.3%戊巴比妥钠按1ml/kg于兔耳缘静脉注射麻醉,动物 固定王.右股静脉置管给药,输液.以600kg连 作者单位:210029江苏省人民医院 通讯作者:梅勇 续静脉内注射LPS,LPS溶于50ml生理盐水.30min注射 完毕. 1.2.2实验分组随机分为5组,每组8只.分别为正常对 照组(A组);内毒素对照组(B组);小剂量治疗组(C组);中 等剂量治疗组(D组);大剂量治疗组(E组).A组以等容量 的生理盐水静脉泵入.B组以600g//kg连续静脉内注射 LPS,30min后予等容量的生理盐水静脉泵人.C,D,E三组 为LPS注入后30min,分别子异丙酚5mg/(kg?h),10mg/ (kg?h),15mr,/(kg?h)持续静脉泵入.c,D,E组均在异丙 酚泵入4h后处死.A,B组同时泵入等容量的生理盐水4h 后处死. 1.2.3标本的制备动物处死前,腹中线开腹,下腔静脉取 血5ml经低温离心后,保留血浆待测DAO活性.动物处死 后,取小肠回盲部10cm以的回肠组织,经冰盐水漂净,滤 纸吸干.小肠组织立即液氮冻存备用. 1.2.4DAO活性的测定按黎君友等分光光度法测定上 述制备的血浆DAO活性. 1.2.5MPO活性,SOD活性及MDA含量的测定2?, 4?冰浴的生理盐水中漂洗肠组织,滤纸吸水,干后称重,低 ? 24?匿堂剑堑Q生复Z鲞箜垫!里望va0nofChina,Aust.2010,Vo1.7No.23 温下肠组织匀浆,低温3500r/rain离心15min,保留上清液. 蛋白定量采用考马斯亮蓝法.严格按照试剂盒操作步骤,分 别测定各组小肠组织每毫克蛋白中MPO,SOD活性及MDA 含量. 1.3统计学处理计量资料采用以均数?标准差(?s) 示.用SPSS13.0统计软件进行单因素方差.做组间两 两比较采用q检验,P<0.05为差异有统计学意义. 2结果 2.1DAO活性B组应用内毒素后,DAO活性出现增高,与 A组差异有统计学意义(P<0.05).C组,D组和E组的 DAO活性均明显低于B组,差异均有统计学意义(P< 0.05).D组的DAO活性低于C组但差异没有统计学意义. 与A组差异有统计学意义(P<0.05).C组,D组和E组的 MDA含量均明显低于B组,差异均有统计学意义(P< 0.05).D组的MDA含量低于C组,差异有统计学意义(P< 0.05). 2.3MPO活性B组应用内毒素后,MPO活性出现增高,与 A组差异有统计学意义(P<0.05).C组,D组和E组的 MPO活性均明显低于B组,差异均有统计学意义(P< 0.05).E组的MPO活性低于c组和D组,差异有统计学意 义(P<0.05). 2.4SOD活性B组应用内毒素后,SOD活性出现降低,与 A组差异有统计学意义(P<0.05).C组,D组和E组的 SOD活性均明显高于B组,差异均有统计学意义(P<0.05). 2.2MDA含量B组应用内毒素后,MDA含量出现增高,D组的SOD活性高于C组,差异没有统计学意义. 表1血浆DAO活性,小肠MPO,SOD活性及MDA含量的比较(4-s) 注:与A组比较,P<0.05;与B组比较,P<0.05;与C组和D组比较,P<0.05;与C组比较,?P<O.05 3讨论 Wilmore将肠道称为”应激条件下的中心器官”_4J.肠道 的损害是内毒素血症的一个突出表现.LPS可引起肠道中性 粒细胞(PMN)聚集,激活.中性粒细胞激活后可产生呼吸暴 发,生成大量反应性氧簇,释放大量氧自由基. SOD是超氧阴离子自由基的特异性清除酶.SOD是生 物体内氧自由基清除系统的重要防线.SOD含量越高,则说 明抗氧化能力越强.MDA是脂质过氧化反应链中的终产物, 反映了氧自由基对细胞损伤的程度,临床上常被用作评价脂 质过氧化损害的指标.本实验显示B组应用内毒素后,肠组 织SOD活性降低,MDA含量升高.表明内毒素血症降低了 肠道组织内自由基清除能力.C组,D组,E组在异丙酚泵人 后肠组织SOD活性升高,MDA含量降低.说明异丙酚减轻 了内毒素对肠黏膜的损害,对内毒素血症大鼠肠道发挥了一 定的保护作用.这与异丙酚干扰了脂质过氧化的夺氢过程, 中断了脂质过氧化的链式反应有关. MPO是中性粒细胞特有的酶,其活性增高PMN’聚 集程度增加和大量氧自由基产生.本实验显示B组应用 内毒素后,肠组织MPO活性出现增高.C组,D组,E组在异 丙酚泵入后肠组织MPO降低.说明异丙酚可以抑制PMN聚 集,对内毒素血症大鼠肠道发挥了一定的保护作用.这与异 丙酚降低内毒素血症时血清TNF一,IL一6水平有关. DAO约95%存在于小肠黏膜绒毛.肠屏障功能受损时 可大量释放入血,使血中DAO活性随之升高,通过检测其活 性可反映肠黏膜的功能状态.本实验显示B组应用内毒素 后,血浆DAO明显升高.表明内毒素血症存在明显的肠道 损害.c组,D组,E组在异丙酚泵入后,血浆DAO明显降 低,表明异丙酚对内毒素血症肠道具有保护作用.但C组,D 组,E组之间差异无统计学意义,说明并非剂量越大越好.这 可能与本实验用的异丙酚以甘油,卵磷脂等脂贡成分作为赋 形剂有关.异丙酚的内脂成分在代谢过程中可以降低异丙 酚的抗氧化作用,并削弱其清除氧自由基的能力. 本实验显示异丙酚对内毒素血症兔肠道有保护作用,但 保护作用与其剂量并不呈正比关系.但确切分子机制尚待 进一步研究. 参考文献 [1]ParkerSJ,WatkinsPE.ExperimentalmodelsofGram—negativesep— 30. sis.BrJSurg.2001,88:22— [2]张银中,叶铁虎,玉芬,等.异丙酚对白介素一6所致中性粒细 胞调亡障碍的影响.中华麻醉学杂志,2002,22:329—331. [3]黎君友,于燕,郝军,等.分光光度法测定小肠和血二胺氧化酶活 性.氨基酸与生物资源.1996,18(4):18—30. [4]WilmoreDW,SmithRJ,O’DwyerST,eta1.Thegut:acentralorgan aftersurgicalstress.Surgery,1988,104(5):917—923. [5]MurphyPC.,MyersDS,DaviesMJ,eta1.Theantioxidantpotentialof propofol(2,6一dissopropylpheno1).BrJAnaesth,1992,68(6): 613—618. [6]NakaeH,EndoS,KikuchiM,eta1.Nitrie/nitrate(NOx)levels andhemodynamiesduringsepticshock.SurgToday,2000,30: 683—688. (收稿日期:2010—03—29) (本文编辑:尹虹娇)