蜜环菌浓缩液生产工艺

蜜环菌浓缩液生产工艺 1、 菌种培养 1.1、 母种(试管种)培养 取蜜环菌Armillaria mellea(Vahl.ex Fr.)Quel.保藏菌株，用PDA培养基,马铃薯200g煮熟过滤～蔗糖20g～硫酸镁0.75g～磷酸二氢钾0.75g～琼脂20g～配置1000ml,培养。 灭菌条件:110?,0.1MP～灭菌30分钟。 培养温度26-28?～培养周期7-10天。 1.2、 摇床扩大培养(液体菌种培养) 取培养好的母种,试管种,～转接于三角瓶液体摇床培养～培养基为PDA培养基不加琼脂～500 ml三角瓶装量250-300ml。接种,母种,后于摇床上110n,m振荡培养。 灭菌条件:110?,0.1MP～灭菌30分钟。 培养温度26-28?～培养周期3-4天。 1.3、种子罐培养 培养好的三角瓶液体菌种转接于种子罐进行发酵培养～培养基同液体菌种培养基。 灭菌条件:110?,0.1MP～2小时。 培养温度26-28?～培养周期4-6天。 1.4、发酵 培养基:麦麸200 g～玉米粉10 g～蔗糖20 g～酵母粉10 g～水 1000 g。 将60%体积的培养基置发酵罐中～灭菌～将种子罐菌种转接于发酵罐内进行发酵培养～待发酵液变为紫褐色～由稠变稀～部分菌丝开始自溶～菌丝颗粒变碎～pH值降至5.2—5.6～罐内亮度开始减弱～即可出罐。 灭菌条件:121?,0.1MP～2小时。 培养温度26-28?～培养周期6-7天。 2、 滤过 培养好的发酵液～板框压滤。 3、 浓缩 将上述滤液置真空减压浓缩罐内～减压浓缩至相对密度1.18,20?,。 4、 检验。 4.1 性状 本品为棕褐色粘稠液体～味微酸、苦、微甜。,无发酵变质、长霉等现象, 4.2 鉴别 4.2.1 取本品2.0ml～加甲醇10ml～密塞～时时振摇～浸渍1小时～滤过～照薄层色谱法,中国药典2010年版一部附录? B,试验～吸取上述溶液5μl～点样于以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上～以正丁醇一乙酸乙酯,4:2,为展开剂～展开～取出～晾干～喷以10%磷钼酸乙醇溶液～在110?烘约10分钟～立即检视～应有蓝色斑点。 4.2.2 取本品约1.0ml～加水10ml～在水浴中加热溶解～过滤～取滤液2ml～加5%α-萘酚乙醇液数滴～摇匀～沿壁加入浓硫酸1ml～在两液面交界处即显紫红色环。 4.3 检查 相对密度 本品的相对密度,中国药典2010年版一部附 ,应不低于1.15,20?,。 录? A 5、 包装。 洁净塑料桶包装～规格:25kg/桶。 密环菌浓缩液工艺流程 培养基的配置?灭菌?接种?发酵培养?发酵菌丝体? 浸泡?过滤?真空浓缩?浓缩液 ? 排渣