Brdu+Neun_免疫荧光双标标记

Brdu+Neun_免疫荧光双标标记 根据实验室现有的抗体，GFAP只能做红色568，为了和别的抗原区别，选择Brdu做绿色488，Neun 做647蓝色: Brdu+Neun 免疫荧光双标标记 前者绿色488后者蓝色647 1、2NHCI 漂洗 30m 2、PB 洗 6*5m 3、硼酸 洗 3*15m 、一抗加入 大鼠抗Brdu 和 小鼠抗Neun 的混合抗体液 4?C过夜 4 5、PB 洗 3*30m 6、二抗加入 羊抗大鼠—488 和羊抗小鼠—647的混合抗体液 常温避光4h或者4?C避光过夜 7、PB 洗 6*5m + 2*10m 8、快速裱片封片 ，荧光显微镜下观察照相 或者 6、二抗加入 带有生物素的羊抗小鼠 4?C过夜 7、PB 洗 3*30m 8、加入三抗SABC—647 避光1h 9、PB 洗 6*5m + 2*10m 10、加入 羊抗大鼠—488 常温避光4h或者4?C避光过夜 11、PB 洗 6*5m + 2*10m 尽量避光 12、快速裱片封片 ，荧光显微镜下观察照相 尽量避光 Brdu+GFAP 免疫荧光双标标记 前者绿色488后者红色568 1、2NHCI 漂洗 30m 2、PB 洗 6*5m 3、硼酸 洗 3*15m 4、一抗加入 大鼠抗Brdu 和 兔抗GFAP的混合抗体液 4?C过夜 5、PB 洗 3*30m 6、二抗加入 羊抗大鼠—488 和羊抗兔—568的混合抗体液 常温避光4h或者4?C避光过夜 7、PB 洗 6*5m + 2*10m 尽量避光 8、快速裱片封片 ，荧光显微镜下观察照相 尽量避光 或者单独加二抗三抗上同