载脂蛋白e基因多态性对高海拔区藏、汉、回族人群血脂的影响
载脂蛋白E基因多态性对高海拔区藏、汉、回族人群血脂的影响 载脂蛋白E基因多态性对高海拔区藏、汉、回族人群血脂的影响 作者:张卫泽 李星辉 陈永清 马凌 张明旭 乔燕 【摘要】 目的:
载脂蛋白E(Apo E)基因多态性并探讨其与高海拔区藏、汉、回族人群血脂水平之间的关系. 方法:藏族人0例,汉族人131例,回族人100例;采集静脉血,检测三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL c)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL c)等,提取DNA,以聚合酶链反应 限制性片段长度多态性方法(PCR RFLP)进行DNA多态性分析,电泳判断基因型. 结果:三民族携带E4等位基因者与携带E2, E3者相比具有TG, TC, LDL c逐渐增高的趋势,藏族人尤为明显(P0.01). 结论:高海拔区藏、汉、回族人群中,Apo E基因E4等位基因与高血脂相关. 【关键词】 载脂蛋白E 基因多态性 血脂 藏 汉 回族 0引言 载脂蛋白E(apolipoprotein E,
Apo E)是血浆脂蛋白的一个重要组成部分,是一种多态性蛋白. 流行病学资料
明Apo E基因多态性对血脂浓度有十分明显的影响,1,. 我们对高海拔区藏、汉、回三民族Apo E基因多态性进行了观察研究,旨在探讨Apo E基因多态性与这些人群血脂水平的关系. 1对象和方法 1.1对象2005 10/2006 04甘肃省甘南藏族自治州人民医院与藏医院门诊体检者351人,其中藏族人0(男73,女47)例,年龄(47.8?9.3)岁;汉族人131(男74,女57)例,年龄(48.1?11.2)岁;回族人100(男63,女37)例,年龄(44.3?10.5)岁. 以上样本之间无血缘关系,为世居高原地区相对隔离的遗传人群. 并进行有关检查排除了肝肾功能疾患、糖尿病等疾病. 1.2方法常规酚 氯仿法提取DNA,聚合酶链反应 限制性片段长度多态性(PCR RFLP)方法进行DNA多态性分析.
引物,上游(P1) 5′ AACAACTGACCCCGGTGGCG 3′,下游(P2) 5′ ATGGCGCTGAGGCCGCGCTC
3′;进行PCR. 扩增产物用Hha I 酶切;将酶切产物聚丙烯酰胺凝胶电泳,银染色,基因型判读. 检测到E2/2, E2/4, E3/3, E3/4, E4/4
五种基因型,电泳分离显示:E2/2为91 bp,83 bp,63 bp;E2/4为91 bp,83 bp,72 bp,63 bp;E3/3为91 bp,63 bp;E3/4为91 bp,72 bp,63 bp;E4/4为72 bp,63 bp. 所有人群采用日立
7170型全自动生化仪检测清晨空腹时静脉血甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL c)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL
c)等血液生化指标. 参照1997年全国血脂异常防治对策专
血脂测定的新参考值,2, . 统计学处理:所有计量资料以x?s表示,计数资料以频数表示,采用SPSS 10.0统计软件进行数据分析. 组间均数比较采用方差分析及两两比较,基因频率之间的比较采用四格表χ2检验. 2结果 2.1汉、藏、回族人血脂测定值见表1.表1三民族受试者血脂测定值 2.2汉、藏、回族Apo E基因型分布本实验我们检测到E2/2,E2/4,E3/3,E3/4,E4/4五种基因型,未检测到E2/3基因型. 汉、藏、回族之间有统计学差异(P0.01),汉族以E3/3常见,而藏、回族以E3/4常见(表2). 表2三民族Apo E基因型分布频率比较 2.3汉、藏、回族Apo E基因型与血脂水平的关系根据Apo E基因型将研究对象分为Apo E2携带者E2,X(E2,2+ E2,4), E3/3携带者和E4携带者E4,X (E4/4+ E3/4)三类. 发现TG值E4携带者高于E2携带者(P=0.019),藏族高于汉族(P=0.026);TC值E4, E3携带者高于E2携带者(P=0.010,P=0.023),藏族高于汉族与回族(P=0.019,P=0.039);LDL c值E4, E3携带者高于E2携带者(P=0.001,P=0.004),藏族高于汉族与回族(P=0.017,P=0.026)(表3). 3讨论 Apo E是血浆脂蛋白的组成成分之一,在脂蛋白代谢中起重要作用,3,. Apo E基因有三种主要的异构体Apo E2,Apo E3,Apo E4,人群中具有6种表型,即三种纯合子(E2/2,E3/3,E4/4)和三种杂合子(E2/3,E2/4,E4/3). Apo E基因多态性的分子基础源于在1位和118位上半胱氨酸(Cys)和精氨酸(Arg)单个氨基酸的相互取代,E3为1位上是Cys,158位上是Arg;E2则为1位和158位上均是Cys,E4则为1位和158位上均是Arg. 这种单个氨基酸不同造成的异构体就是由Apo E基因多态性决定的,4,.表3三民族Apo E基因型与血脂水平的比较(汉=131,藏=0,回=100,mmol/L,
x?s) Apo E调节血脂代谢,不同Apo E基因型可能会影响个体的血脂水平. 众多的研究结果已普遍认同:E4等位基因与高水平血TC和LDL c显着相关,而E2等位基因的作用恰恰相反. Apo E2人群血TC,LDL c水平最低,Apo E4人群血清TC,LDL c水平最
高,Apo E3人群位于二者之间,5,,Apo E2的“降胆固醇作用”是
Apo E4的“升胆固醇作用”的2,3倍,6, . 在整个人群中,E2,
2,E4,4,E2,4者的血浆TG明显高于E3,3者,提示E2,E4等位
基因均与血浆高TG浓度有关. 但有些学者认为E4对TG无明显影响
,7,. Apo E作为血浆脂蛋白的一个重要组成部分,直接参与脂蛋
白的构成、转化和代谢(其对血脂代谢的调节可能与各等位基因编码
的Apo E异构体与脂蛋白的受体的亲和性及其在体内的代谢不同有关
,8,. 我们测定了高海拔区汉、藏、回族共351名研究对象的
Apo E基因型,结果发现:汉族以E3/3常见,而藏、回族以E3/4常
见,三民族TG,TC和LDL c值E4携带者高于E2携带者,而藏族
明显高于汉族和回族. 高海拔区藏族群众在饮食上多以牛羊肉、奶
酪、酥油等高脂肪类食品为主,并其特殊的宗教信仰关系多禅坐诵经,
加之气候寒冷,较少室外运动,因此较汉、回族有血脂更紊乱的趋势,
这进一步证明了Apo E不同等位基因与血脂代谢的相关性. 总之,
本研究初步从分子基因水平对高海拔区汉、藏、回族Apo E基因与血
脂水平的关系进行了分析,更大样本量的研究可能会有更大意义的发
现. 综上针对高海拔区藏族群众更应当加强宣传和教育,提倡合理饮
食,坚持运动煅练等,并应有
、有重点的对这些人群予以Apo E
基因的检测,从而对预防、筛选及早期诊治这些人群血脂异常具有一
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