淫羊藿总黄酮的提取方法研究

淫羊藿总黄酮的提取方法研究 word格式论文 淫羊藿总黄酮的提取方法研究 【摘要】 目的,考察选择提取淫羊藿总黄酮的最佳 方法 , 研究 超声法、超临界萃取法、半仿生提取法、索氏提取法、回流法、水煎煮法六种提取方法提取淫羊藿中总黄酮的提取效率。方法,采用754分光光度计测定样品中总黄酮的含量。结果,用索氏提取法得的总黄酮含量最高。结论,超声提取法是合适的提取方法。 【关键词】 淫羊藿 总黄酮 提取 A study on the Extractive Technology of Total Flavone from Herba Epimedii word格式论文 【Abstract】Objective:To study four technological process,ultrasonic wave extraction,soxhlet’S extractor,circumfluence ,and water extraction,a better technological condition to extracting gogal flavone from Herba Epimedii was obtained.Methods:By using the 754 type’s UV spectrophotometer ,analyzing the content of total flavone of each sample.Results:Using soxhlet’s extractor ,the content of total flavone is the highest among four technological process.Concusion:A better technological condition to extracting total flavone from Herba Epimedii is ultrasonic wave extraction. 【Key words】Herba Epimedii total flavone extract 淫羊藿,Epimedium brvicornum Maxim,属小檗科植物,性温,味甘辛, 归肝、肾经,临床上常用于阳痿遗精,筋骨酸软,风湿痹痛,麻木拘挛及更年期 高血压[1]。 现代 化学成分研究显示,淫羊藿的主要有效成分是淫羊藿总黄酮 ,淫羊藿苷、淫羊藿次苷,和淫羊藿多糖,其总黄酮具有增加脑血流量和冠脉流 量、抗肿瘤、抗氧化和增强机体免疫力等功能[2]。为了选择确切的方法,我们 用70%乙醇进行了超声法、超临界萃取法、索氏提取法、回流法、半仿生提取 法的比较研究,同时进行了水煎煮法的对比实验,从中找出准确、简便、快速的 提取方法。 word格式论文 1 实验材料 1.1 仪器 754紫外光栅分光光度计,上海第三 分析 仪器厂,,TG328A,s,型分析天平,上海精科天平厂,,PHS-3C型精密酸度计,上海电光器件厂,,HA121-50-01超临界萃取装置,江苏南通华安超临界萃取有限公司,。 1.2 药品 淫羊藿,购于黄河药材市场,经甘肃中医学院生药教研室鉴定为植物淫羊藿,淫羊藿苷品,购于 中国 药品生物制品检定所,。 2 实验方法与结果 2.1 标准曲线制备 精密称取干燥至恒重的淫羊藿苷标准品4.6mg置25ml容量瓶中,以70%乙醇定容至刻度。再分别吸取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ml置于25ml容量瓶中,分别以70%乙醇定容至刻度。以70%乙醇为空白,在270nm处测吸收度,以吸收值,A,为纵坐标,浓度,C,为横坐标,绘制标准曲线。将所得数据进行统计处理,得回归方程,A=0.049270C，0.039796,r=0.9991,线性范围为3.7,18.4μg/ml。 word格式论文 2.2 提取方法 2.2.1 超声提取 取淫羊藿粗粉1g加70%乙醇20ml,超声提取1h,提取液过滤,置于25ml容量瓶中,并用70%乙醇定容至25ml容量瓶中,再吸取2ml到10ml容量瓶中,用70%乙醇定容至刻度,再吸取1ml至25ml容量瓶中,用70%乙醇定容至刻度,摇匀,供含量测定。 2.2.2 索氏提取 取淫羊藿粗粉1g,置于索氏提取器中,加70%乙醇100ml,抽提6h,加收乙醇至干,残渣用70%乙醇溶解,滤过后以70%乙醇定容至25ml容量瓶中,再吸取2ml到10ml容量瓶中,用70%乙醇定容至刻度,再吸取1ml到25ml容量瓶中,用70%乙醇定容至刻度,摇匀,供含量测定。 2.2.3 回流法 取淫羊藿粗粉1g,用20ml 70%乙醇回流提取2次,每次1h,合并药液,回收乙醇至干,用70%乙醇溶解,滤过后以70%乙醇定容至25ml容量瓶中,吸取2ml到10ml容量瓶中,用70%乙醇定容至刻度,从中吸取1ml到25ml容量瓶中,用70%乙醇定容至刻度,摇匀,供含量测定。 word格式论文 2.2.4 水煎煮法 取淫羊藿粗粉4g,加水80ml浸泡1.5h,煎煮2次,每次1h,滤过合并药液,水浴蒸干,残渣用70%乙醇溶解,滤过后定容到100ml容量瓶中,再吸取2ml到10ml容量瓶中,用70%乙醇定容至刻度,再吸取1ml到25ml容量瓶中,用70%乙醇定容至刻度,摇匀,供含量测定。 以上实验各重复3次, 计算 出总黄酮含量平均值。 2.2.5 半仿生提取 取淫羊藿粗粉按L9,34,正交,以淫羊藿苷含量为指标进行正交实验。滤过合并药液,水浴蒸干,残渣用70%乙醇溶解,滤过后定容到25ml容量瓶中,再吸取5ml到25ml容量瓶中,用70%乙醇定容至刻度,再吸取2ml到10ml容量瓶中,用70%乙醇定容至刻度,再吸取1ml到25ml容量瓶中,用70%乙醇定容至刻度摇匀,供含量测定。 2.2.6 超临界萃取 取淫羊藿细粉过三号筛并精密称量200g,按表4做实验,萃取物水浴蒸干,残渣用70%乙醇溶解,滤过后定容到100ml容量瓶中,再吸取0.5ml到25ml容量瓶中,用70%乙醇定容至刻度,再吸取2ml到10ml容量瓶中,用70%乙醇定容至刻度,再吸取1ml到25ml容量瓶中,用70%乙醇定容至刻度摇匀,供含量测定。 word格式论文 2.3各样品的含量测定 分别取上述提取液,以70%乙醇为空白,270nm为测定波长,测定各待测液压的吸收值。将测得的吸收值A代入回归方程,计算样品液的浓度,并换算成样品百分含量见表1。表1 不同提取 方法 的总黄酮含量注,半仿生提取与超临界提取的平均含量均取最高值。 2.4 半仿生提取法正交实验设计 理论 [3,6],在药材粒度、煎提温度、煎煮加水量、浓缩等 根据SBE法 条件相同的前提下,确定考察的主要因素及水平。选用L9,34,表安排实验方案,见表2、表3、表4。表2 因素——水平表注,三次煎煮时间比2:1: 1,加水量比20:12:12。 表3 正交实验L9,34,的结果 分析 表表4 方差分析表 注,提取时间1.5h,分离错误，未找到引用源。压力8Mp,分离错误，未找到引用源。压力4Mp,夹带剂为95%乙醇。 word格式论文 3 讨论 3.1 以淫羊藿苷含量为指标,由表3和表4可知,由于B因素R值极小,可作为误差项,A、C、D因素有极显著性差异,对淫羊藿苷含量 影响 因素主次因素为A,C,D,B。直观分析结果表明最佳提取工艺组成为A1C2D1B2。验证实验进一步表明该项工艺稳定可行。因此筛选得到的最佳提取工艺为,第一煎水PH值,2.00,,第二煎水PH值,7.00,,第三煎水PH值,8.50,,煎煮时间3h。 3.2 由表5可知,超临界萃取法的提取效率低,其原因可能与以下因素有关,实验周期短,实验经费有限等,故该项实验有待进一步优选实验条件。 3.3 从以上实验结果直观分析,在六种提取方法中。总黄酮含量由高到低依次为,索氏提取法,乙醇回流提取法,超声提取法,半仿生提取法,水煎煮法,超临界萃取法,提取时间由高到低依次为,索氏提取法,半仿生提取法,水煎煮法,乙醇回流提取法,超临界萃取法,超声提取法。 综上所述,超声提取法提取时间最短,总黄酮含量较高,提取效率高、简便、 word格式论文 快速,为最佳提取方法。 【 参考 文献 】 [1] 宋立人, 现代 中药学大辞典,上、下册,[M],北京,人民卫生出版社,2001,334, [2] 王昌林,李星,王粤新,淫羊藿及其有效成分的药理 研究 概况[J], 中国 中药杂志,1998,23,3,,183, [3] 张兆旺,孙秀梅,试论“半仿生提取法”制备中药口服制剂[J],中国中药杂志,1995,20,11,,670, [4] 张瑞亭,张兆旺,孙秀梅,思维方式的转换与中药“半仿生提取法”[J],中国中药杂志,1997,22,9,,542, [5] 张兆旺,孙秀梅,“半仿生提取法”的特点与 应用 [J],世界 科学 技术中药现代化,2000,2,1,,35, word格式论文 [6] 张兆旺,孙秀梅,中药方剂药效物质提取新技术——对“半仿生提取模 式”的探讨[J],世界科学技术中药现代化,2000,2,4,,53,