健脑灵口服液提取工艺研究

健脑灵口服液提取工艺研究 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第34卷第3期2003年3月?233? 脂分离银杏酚酸的方法,采用吸附树脂精制银杏酚 酸,工艺较简单,成本低,产率高,不存在重金属,有 机溶剂毒性残留的问.通过对大孔吸附树脂吸附 银杏酚酸性能的筛选,确定出性能较佳的D4020树 脂.得到最优的吸附一解吸实验条件为:D4020树脂 上柱,吸附流速为2mL/min,原液过柱吸附两次, 用9O乙醇洗脱,所得产物的银杏酚酸含量和得率 都较高. References: [1]NiXW,WuMC.Theextractionandapplicationofginkgolic acidsfromGinkgobiloba[J].JHubeiCoilTraditChinMed (湖北中医学院),2001(4):22—24. E2]LuJ,XuQ,ZongzM,eta1.Progressinstudieson alkylphenolicacidsinGinkgobilobapreparation[J].Chin Trad~HerbDrugs(中草药),2001,32(1):85—87. [3]GellermanJL.Methodsforisolationanddetermination ofanacardicacids[J].AnalChem,1968,40(4):739—743. [4]ItokawaH,TotsukaN,Nakahareeta1.K.Antitumor principlesfromGinkgobilobaL.[J].ChemPharmBull, 1987,35(7):3016-3020. [5]IrieJ.Glycerol-3一phosphatedehydrogenaseinhibitors,ana— cardicacids,fromGinkgo&'loba[J].BiotechBiochem,1996, 6O(2):240—243. [6]ShizQ,ShiRF,FanYG,eta1.Applicationofpolymer adsorbentinextractionofmedicalherbs[J].ChinTradit HerbDrugs(中草药),2001,32(7):660—662. 健脑灵口服液提取工艺研究 尹一子,李子健H,高越,刘宁. (1.吉林大学第一医院药剂科,吉林长春130021;2.吉林大学生命科学技术研究所, 吉林长春130023) 健脑灵口服液主要由淫羊藿,益智,甘草等中药 组成,具有补肾扶阳,益精生髓,健脑益智,主要用于 记忆减退,智力障碍,老年性痴呆.实验发现本方提 取工艺对疗效影响显着,本处方中大多数有效成分 为水溶性成分,故工艺上采用水煎煮法,采用正交设 计试验,以淫羊藿中有效成分淫羊藿苷含量为考核 指标,对水煎煮法提取工艺进行了优选.同时,对益 智中挥发油的提取及乙醇沉淀的浓度进行了考察. 1仪器,试剂与药品 岛津LC一1OAT高效液相色谱仪(日本); CLASS—LC10色谱工作站,甲醇为色谱纯,其他试 剂均为分析纯.淫羊藿苷对照品购自中国药品生物 制品检定所.淫羊藿EpimediumkoreanumNakai, 甘草GlycyrrhizauralensisFisch.药材购于吉林省 药材公司. 2方法与结果 2.1挥发油提取时间的确定:本处方中益智含有大 量挥发性成分,采取水蒸气蒸馏法提取挥发油,蒸馏 时间对收油率影响很大,故考察蒸馏时间. 取益智500g,加3.5倍量水,浸泡1,2h,充分 浸透后开始蒸馏,并在规定时间内量取.结果见表1. 由表1可见,5h内大部分挥发油被提取出来, 为节约能源,降低成本,将提取挥发油时间定为5h. 表1益智中挥发油提取时间与收油率关系(n一3) Table1Relationshipbetweenoilyieldand extracfi0ndurati0nofvolatileoil inFructusAlpiniaeOxyphyllae(n一3) 提取时间/h收油量/mL O.9l 2.89 4.1O 4.93 5.06 5.18 2.2水煎煮条件的优化 2.2.1正交试验:本处方中淫羊藿,甘草,益智 等主药均含有大量水溶性成分,故工艺上采用了水 煎煮法,加水量,煎煮时间,煎煮次数是影响煎煮效 果的主要因素,因此采用这3个因素为考察对象,以 淫羊藿中有效成分淫羊藿苷含量为考核指标,进行 正交试验优化(表2). 2.2.2色谱条件L】]:色谱柱:Shim—packCLC—ODS (150mm×6.0mm);流动相:甲醇一水(64:46);柱 温:30'C;流速:1mL/min;检测波长:270nm;理论 板数按淫羊藿苷峰计算应不低于4000. 2.2.3标准曲线的绘制:精密吸取淫羊藿苷对照品 收稿日期:200211一O8 作者简介:尹一子(1962),女(朝鲜族),吉林延吉人,副主任医师,理学硕士,1984年毕 业于沈阳药科大学药学系,2000年吉林大学生 命科学学院研究生毕业,1991年赴El本北理大学研修,现为中华医院管理学会药 事管理专业委员会委员,吉林省药学会理 事,主要从事新药研制与开发及药代动力学研究.Tel:(0431)5612573 *通讯作者一 -1 ?234?中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第34卷第3期2003年3月 溶液(0.04164mg/mL)1,5,10,15,20L进样,以 对照品峰面积积分值对对照品的量进行线性处理, 回归方程为y一2549496.530X+7169.438.,r一 0.9997.结果表明,淫羊藿苷在0.04,0.83g与峰 面积呈良好的线性关系. 表2各因素及水平设计 Table2Designforfactorsandlevelsindecoctionproccss 2.2.4样品的制备:依据处方量称取淫羊藿,甘草, 益智等药,按L.(3)正交表对样品进行提取,得正交 试验各组样品,以0.45/.Lm滤膜过滤,备用. 2.2.5结果:正交试验测定结果见表3,方差分析 见表4.可见,各因素对有效成分淫羊藿苷收率的影 响程度依次为C>B>A,各因素的最佳水平为 A.B.C.,即加8倍量水,煎煮3次,每次1.5h. 表3L,(3.)正交试验及结果分析 Table3ResultsofL.(3.)orthogonalexperiment 实验号ABCD淫羊藿苷/(mg?mL) 表4方差分析 Table4Resultsofvarianceanalysis 方差来源离均差平方和自由度方差F值显着性 005(2'Z)一19.0''001(Z,Z)=99.0 2.3乙醇沉淀浓度的确定:为尽可能除去淀粉,蛋 白质等无效成分,提高药液澄明度,对水提取药液进 行醇沉处理.并对醇沉浓度进行了筛选. 取淫羊藿500g,甘草500g,益智500g等量3 份按上述条件水提取样品溶液,按不同浓度进行醇 沉处理,并按工艺回收乙醇,再分别加水稀释制成样 品.置4?冰箱中放置1周.测定样品中淫羊藿苷 的含量,并观察样品外观性状,以此为考察指标,选 择醇沉浓度. 表5醇沉浓度的筛选(^一3) Table5Selectionforc0ncentrati0n0fEtoH inprecipitationprocess(^一3) 试验结果表明,当乙醇浓度达到70时,淫羊 藿苷含量为4.41mg/mL,药液澄明,有少量振摇可 分散的沉淀,考虑到有效成分的损失等情况,选择 709,6乙醇沉淀. 2.4中试产品考察结果:按制备工艺中的处方量扩 大1O倍,依照优选的制备工艺制备样品,并对出油 率,出成品率及含量进行测定. 表63批中试水平试验结果 Table6Resultsofthreeparallelmiddle-scaletests 3讨论 3.1在正交设计中采用以淫羊藿中有效成分淫羊 藿苷含量为考核指标,是因为淫羊藿为本方中的君 药,具有补益肝肾,添精宜髓之功能.其主要有效成 分淫羊藿苷已有测定其含量的大量报道,实验条件 成熟,故选用其作为正交设计中的考核指标. 3.2实验中正交设计是根据参考文献[zI引,主药特 性及预试验结果综合考虑确定的. 3.3本方中益智含挥发性成分,采用先提取挥发 油,再与淫羊藿等药材水提醇沉工艺,使有效成分得 到充分提取. 3.4经中试产品进一步验证此制法的可信性和工 艺稳定性,中试产品符合质量标准中各项规定. References: [13ShiWZ,ZhuL,XuDR,a1.Determinationoficariinin MiguCapsulebyHPLCEJ].ChinTraditHerbDrugs(中草 药),2000,31(5):341—342. XiXR,ChenQ.StudiesonprocedureprocessofGlycyrrhiza ?alensisbyorthogonaltestEJ3.ChinaJChinMaterivied(中 国中药杂志),2001,26(7):460—462. [3]HeQ,GuoGH,GuoY,eta1.Studiesonextractionprocess forpreparationofShizhenSprayEJ].ChinTraditHerbDrugs (中草药),2001,32(6):503—506. 19l0 545O 6122 l2331223l9O0O II OOOO 6725 0456 12323l3l2O271 lOO6 7621 34Z6 l23l23l237O2l I【 OOO6 2671 4695 11122233399OO 【 123456789h毛R