水苏糖改善人体肠道菌群作用的人体试食研究

水苏糖改善人体肠道菌群作用的人体试食研究 水苏糖改善人体肠道菌群作用的人体试食研究,高新技术, 高 鹏 黄晓春 杨建武 张 朝 熊德鑫 王建勋 约3215字 摘要:【目的】研究水苏糖改善人体肠道菌群的作用，分析和总结水苏糖对人群的最佳日摄入量。【方法】采用自身和组间两种对照设计，从自愿参加的受试者中选250人均分为5组，分别给予每日服用水苏糖0克、0.5克、3克、5克、10克，连续试食60天，其中前30天观察其安全性及功效性指标，后30天观察其安全性指标。【结果】每日服用3克、5克、10克三组人群服用水苏糖30天后，肠道内的双歧杆菌数量明显增加，差异均有统计学意义(P<0.01);每日服用5克、10克两组人群服用水苏糖30天后，肠道内乳杆菌数量明显增加，差异有统计学意义(P<0.01);所有试食者肠道内的肠杆菌、肠球菌数量变化差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】水苏糖的日常摄入量为0.5克-5克，推荐日摄入量为3克，试食水苏糖对受试者健康无不良影响。 关键词:水苏糖;肠道菌群;人体试食实验;双歧杆菌;乳杆菌 水苏糖是天然存在的四糖，由果糖-葡萄糖-半乳糖-半乳糖构成，分子式C24H42O21 ，分子量666.59，具有如图1所示的结构。与该糖结构相类的有比水苏糖少一个半乳糖基的棉子糖(三糖)和多1个半乳糖基的毛蕊花糖(五糖)，均为低聚半乳糖。该类糖是优良的双歧因子，主要用作增殖肠道双歧杆菌，促进短链脂肪酸增加，使肠道酸性化，有抑制腐败产物生成，抑制胆固醇上升等阻毒、排毒、解毒和改善大便性状及提高钙、镁等微量元素吸收的功效。具防病，抗病，美容作用，并可开发作药物。 1 材料和方法 1.1 受试样品。水苏糖是从中国特有天然蔬菜地灵中采用传统提取分离技术精制而成的产品，产品形式为白色粉末，其中水苏糖含量为65%以上，由西安大鹏生物科技股份有限公司提供。 1.2受试人群的纳入和排除标准 ,(,(,受试者的纳入标准 A、一个月内未患过胃肠疾病者。B、一个月内未服用过抗生素者。 ,(,(,受试者的排除标准 A、年龄在70岁以上者，妊娠和哺乳期妇女，过敏体质者。B、合并有心血管、脑血管、肝、肾和造血系统等严重疾病及内分泌疾病，精神病患者。C、停服受试样品或中途加服其他药物，无法判断或资料不全者。D、短期内服用与受试功能相关的物品，影响到对试食结果的判断者。 1.3研究实验的观察指标 一般情况:包括精神、睡眠、饮食、大小便及血压等。 安全性指标:试食者在试食前进行胸透、心电图、腹部B超、肝、肾功能检查;试食者在试食后进行血常规、尿常规、便常规和血生化检测。 功效性指标:双歧杆菌、乳杆菌、肠球菌、肠杆菌。 1.4试验及分析方法 1.4.1受试水苏糖的服用剂量及服用方法 从自愿参加的受试者中选取250人均分为5组，年龄在20-70岁之间，分别为A、B、C、D、E组，分组时尽可能地考虑影响结果的主要因素如年龄、性别、饮食因素等，进行均衡性检验，以保证组间的可比性。 A、B、C、D、E五个组每人每日服用水苏糖的量分别是0克，0.5克，3克，5克，10克。受试者每人每日早晚各按每人每日的摄入量的一半服用，服用时将受试的水苏糖溶解于100毫升温水中服用，其中A组按时服用100毫升的温水。试验期间受试者不得改变原来的饮食习惯，应正常饮食。受试样品水苏糖采用同一批号，受试给予时间为60天。其中在试食者试 食30天时，按试验所需观察的指标全部进行观察以及检验，以确定试食的安全性及其功效;试食30天至60天，观察一般安全性指标，以确定试食对人体自身有无影响。 1.4.2试验步骤 在受试者受试之前，采用无菌取样方式采取受试者粪便1.0克，10倍稀释，选择合适的稀释度分别接种在各培养基上。培养后，以菌落形态，革兰氏染色镜检、生化反应等鉴定计数菌落，计算出每克湿便中的菌数，取对数后进行统计处理。最后一次给予水苏糖样品之后24小时，再次检测，方法同上。 1.4.3试验中肠道菌群的检验和培养方法: 双歧杆菌:BBL培养基37?48-72小时厌氧培养 乳杆菌:LBs培养基37?48小时培养 肠杆菌:EMB培养基 37?24小时培养 肠球菌:叠氮钠-结晶紫-七叶苷琼脂37?48小时培养 2 结果 2.1一般性情况及安全性指标:包括精神、睡眠、饮食、大小便及血压等，试验前受试者精神、睡眠、饮食、大小便及血压情况良好;血常规、便常规、血生化和肝、肾功能各项检测指标均在正常值范围内;胸透、心电图和腹部B超检查均正常。60天试食期间:A组试食者没任何变化;B组中有20人排便变规律，精神有所改善;C组人群全部排便规律，精神、睡眠、饮食、血压状况良好;D、E组全部试食者排便规律，精神、睡眠、饮食、血压状况正常，唯有E组中有4人在试食前两周有偶尔的溺便和排气现象，而在后期此现象又逐渐消失;未观察到试食对健康的不良反应，试食后试食者的血、尿和便常规指标无异常改变。 2.2肠道菌群检测的实验数据的处理:将人体试食实验结果30天的实验数据采用t检验，并用ststa软件进行统计和处理，结果见表1: 2.3结果分析 A、对照A组(空白)试食前后比较，试食者的各指标菌差异均无统计学意义(P>0.05)。B、与空白对照组A组比较，各组人群试食前的各指标菌差异均无统计学意义(P>0.05)。C、试食者服用水苏糖后，试食者肠道内的四种指标菌的数量发生了变化:B组试食者服用水苏糖后，双歧杆菌数量明显增加，差异有显著性(P,0.05);C组试食者服用水苏糖后，双歧杆菌数量明显增加，差异有极显著性(P,0.01)，乳杆菌数量明显增加，差异有显著性(P,0.05);D组和E组试食者服用水苏糖后，双歧杆菌和乳杆菌数量明显增加，差异有极显著性(P,0.01)。D、由于试食者试食前肠内菌群无明显差异，对C、D、E组试食后的各项指标菌进行了组间对比分析，发现双歧杆菌、乳杆菌数量随着日摄入量的增加有增大趋势，但其差异并无统计学意义(P>0.05);尤其是E组试食后的各项菌群指标与D组试食后的各项菌群指标基本一致。E、各试食组组内及组间肠道内的肠杆菌、肠球菌数量差异均无统计学意义(P>0.05)。 3 讨论与结论 通过选取了250名受试者分为五组，分别每日每人给予0克、0.5克、3克、5克、10克水苏糖，经过试食60日后，通过对一般性安全指标和试食30天功能性指标的结果分析，可得出以下结论:每日服用0.5克水苏糖，服用30日后，即可增殖肠道内的双歧杆菌;每日服用3克水苏糖，服用30日后，肠道内的双歧杆菌显著增加、乳杆菌增加;每日服用5克和10克水苏糖，服用30日后，肠道内的双歧杆菌、乳杆菌显著增加;每日服用10克与每日服用5克及3克进行服用30日的组间比较，肠道内双歧杆菌、乳杆菌增加不显著;所有试食者服用水苏糖60天对身体健康无不良影响。 通过以上结论，我们认为:水苏糖的最小有效剂量为0.5克/日，最大无作用量为10克/日，日常适宜摄取量为0.5-5.0克，日常推荐摄取量为3克。 参考文献 [1]卫生部.保健食品功能学评价程序与检验方法. [2]熊德鑫 《健康从肠内开始》上海科学技术出版社2005年1月第1版 [3]尤新.功能性低聚糖《中国食品添加剂》 2002， [4]陈瑞娟 肠内菌丛与健康长寿 《食品与发酵工业》1996，No.2 [5]张天成，郭书文，唐和平.水苏糖在乙肝便秘中的治疗与体会，《中国实验方剂学杂志》2003年10月 [6]康白.双歧杆菌的微生态学及临床意义，中华儿科杂志，1995，37(5):310-312