仔貂毛霉菌病继发沙门氏菌感染的病例初报

仔貂毛霉菌病继发沙门氏菌感染的病例初报 仔貂毛霉菌病继发沙门氏菌感染的病例初 报 中国动物检疫2008年第25卷第8期——42—— 目主持人:袁丽萍y1p652@h.mi1..m 仔貂毛霉菌病继发沙门氏菌感染的病例初报 龚微净,,倪柏锋z,陈立红,,杨昌达',詹信良' (1.舟山市畜牧兽医局.浙江舟山316000;2.浙江省畜牧兽医局,浙江杭州310020) 摘要:从患病仔貂的皮肤病灶及?心血分离病原,对病原茵进行形态学及生化鉴定,分别为毛霉菌和沙门氏茵. 药敏试验结果表明.分离获得的沙门氏茵对复方新诺明,环丙沙星素等抗茵药物敏感. 关键词:水貂;毛霉菌;沙门氏茵;药敏试验 中图分类号:$858.92文献标识码:B文章编号:1005—9MX(2008)08—0042—02 1发病情况 2007年6月.舟山市某水貂场饲 养的3000余只水貂中.有部分水貂 出现厌食,皮炎及拉稀症状,多发于 15日龄左右仔貂.死亡率5O%以上. 病初仔貂腹部,颌下及四肢皮肤出现 红色斑点,斑点呈圆形扩大,患病部 位被毛逐渐脱落,皮肤发红变硬.严 重者有脓液渗出.并形成结痂.一些 病貂还伴有拉稀等症状个别成年水 貂也有类似的皮肤病变.但发病和死 亡率低. 收检的2只发病仔貂的下颌,额 部,眼框,前后肢出现成片连块的皮 肤病变区域.可见皮毛脱落,渗出液, 皮屑.有的部位已结成黑色结痂.其 中1只仔貂腹部的三分之二区域皮 肤增厚呈红色.无毛.剖检见水貂肺 脏瘀血,心脏有出血点,其他脏器无 明显的眼观病变 2实验室诊断 2.1材料与方法 2.1.1设备和器材:生化培养箱,显 微镜,ATB细菌鉴定仪,灭菌锅,烤 箱,接种棒,酒精灯和载玻片等. 2.1-2试剂:PDA培养基,血平板,肠 杆菌科鉴定试条(ID32E),氧化酶试 剂等购自上海祥和公司.麦康凯培养 基,三糖铁,MH平板,药敏纸片等购 自杭州天和微生物试剂公司 2.2真菌学检查 2.2.1形态学检查 2.2.1.1取样将2只病仔貂处死. 置于白色搪瓷盘中.用手术刀背分别 刮取皮肤病变部位的皮屑及毛根.置 灭菌平皿备用 2.2.1.2镜检取少许上述病料置于 载玻片上.滴加适量1O%氢氧化钾溶 —1O分钟,在 液.覆以盖玻片后放置5 低倍或高倍镜下观察 2.2.1.3分离培养取貂1头部皮屑 及貂2前肢,后肢皮屑分别接种于沙 堡氏培养基.25~C培养3—5天.观察 结果. 2.3细菌学检查 2-3.1细菌分离无菌采集貂1,貂 2心血,肝脏,以四区划法分别接种于 血平板.37?培养24h后观察,可见 接种心血1,肝1的血平板上有较多 形态一致,灰白色中等大小的菌落生 长. 2.3.2形态学检查挑取心血1可 疑菌株?涂片作革兰氏染色后,在油 镜下观察为G一短小杆 2.33氧化酶试验用无菌滤纸条. 刮取少许可疑菌株?纯培养物.滴加 1滴氧化酶试剂于培养物上进行观 察.结果氧化酶试验为阴性. 2.3.4三糖铁试验将可疑菌株? 接种于三糖铁.37?培养24h后观 察.可见三糖铁的高层变黄色.并可 见黑色沉淀.斜面不变色. 23.5ATB细菌鉴定将可疑菌株 ?接种于ID32E鉴定试条,37~C培养 24h后进行ATB细菌鉴定.结果为沙 门氏菌属 2.4药敏试验 将可疑菌株?制成2个麦氏单 位菌悬液.均匀涂布于MH平板.将 环丙沙星,链霉素等药敏纸片贴在接 种物上.37?培养24h后观察结果. 2.5结果 2.5.1真菌鉴定结果 分离株在PDA培养基上生长快. 2d内菌落呈白色羊毛状.3d即可布 满平皿.后颜色逐渐变成黄灰色.菌 落背面深灰至黄绿色.气生菌丝高达 5mm以上(见图1).显微镜下可见在 匍匐菌丝上产生假根孢囊梗单生, 一 般不分枝.顶端形成球形或近球形 的孢子囊孢子囊孢子多呈球形,近 球形,有厚壁孢子(见图2).根据在 PDA培养基的生长特点及镜下形态 学检查.初步鉴定为毛霉科真菌. 2.5.2细菌学鉴定结果 根据形态学检查为G一短小杆菌, 图1分离真菌在PDA上生长情况 图2分离真菌镜下形态 氧化酶试验阴性,三糖铁试验符合沙 门氏菌属特点以及ATB细菌鉴定结 果(见表1),该可疑菌株?鉴定为沙 门氏菌. 2.5-3细菌药敏结果 该菌株对复方新诺明,环丙沙星 等药物敏感.对氨苄青霉素等药物耐 药(见表2). 3讨论 3.1Lindt曾报道毛霉属可感染人体 和动物.陈世平在国内首次报道1例 肺结核和糖尿病患者并发微小根毛 霉病f1J此后.李国勤以足样根霉 (Rhizopusrhizopodiformis)孢囊孢子 成功复制了猪毛霉菌病121.汪昭贤等 分别以微小根毛霉,足样根霉和伞枝 犁头霉对家兔,豚鼠,小白鼠,雏鸡, 猪和羊复制了毛霉病【. —— 43—.中国动物检疫2008年第25卷第8期 动物源性大肠杆菌和金黄色葡萄球菌 的分离鉴定及耐药性分析 赵丽青,王树峰,雷质文,贾俊涛,刘云国,房保海 (山东出入境检验检疫局,山/j,青岛266002) 中图分类号:$859.84文献标识码:B文章编号:1005—944X(2008)08—0043—02 大肠杆菌和金黄色葡萄球菌是 医学和兽医临床上最常见的病原菌. 给人类的健康和畜牧业的发展造成 严重的损害.随着抗菌药物的广泛使 用.细菌耐药性问题日益突出[1】.20世 纪90年代前后所分离的致病性大肠 杆菌对抗生素的敏感菌株比例呈下 降趋势.中度敏感菌株比例先升后 降.耐药菌株比例逐步上升圈.金黄色 葡萄球菌对兽医临床常用的各种抗 菌药都已产生不同程度的耐药性.通 过对各种抗菌药物的耐药谱分析.大 多数金黄色葡萄球菌均呈现多重耐 药的特点随着近年来消费者对食品 安全的关注及国际贸易环境的要求. 食品安全问题得到了前所未有的重 视本试验通过对青岛市城阳区动物 源性食品的大肠杆菌和金黄色葡萄 球菌的分离鉴定.然后采用K—B法闭 对13种药物耐药性,研究本地 区现阶段动物源性食品微生物耐药 性高低.进而分析动物性饲料药物添 加剂量变化.并且对动物使用抗生素 药物对人类和环境带来的风险性分 析. 1材料与方法 1.1样品及供试菌株来源 1.1.1样品分三批购自青岛城阳商 品贸易城,主要有水产品,猪肉,羊 肉,牛肉,鸡肉以及动物性饲料,总共 84个样品 1.1.2菌株由聊城检验检疫局和龙 口检验检疫局赠送的从生鸡肉中分 离的5个大肠杆菌菌株和从水产品 中分离出的4个大肠杆菌菌株.4个 金黄色葡萄球菌菌株 1.2大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的 分离与鉴定 分离与鉴定的方法按照 SN0169—1992和SN0172—1992.部分 表1可疑菌株?AT8试条上反应结果 反应底物反应结果反应底物反应结果 乌氨酸脱羧酶(ODC)+N一乙酰一B葡萄糖甙酶(BNAG)一 精氨酸双水解酶(ADH)一B,半乳糖甙酶(BGAL)一 赖氨酸脱羧酶(LDC)一葡萄糖(GLU)+ 脲酶(LIKE)一蔗糖(SAC)一 L一阿拉伯糖醇(LARL)一L一阿拉伯糖(LARA)+ 半乳糖酸盐(GAT)一D,阿拉伯糖醇(DARL)一 5一酮基葡萄糖酸钠(5KG)+a一葡萄糖(aGLU)一 脂肪酶(LIP)一a,丰乳糖甙酶(aGAL)十 酚红(RP)+海藻糖(TKE)+ B一葡萄糖甙酶(pGLU)一鼠李糖(RHA)+ 甘露醇(MAN)十吲哚(IND)一 麦芽糖(MAL)+肌醇(INO)一 侧金盏花醇(ADO)一纤维二糖(CEL)一 PLE一山梨醇(SOR)+ p一葡萄糖酸酶(pGUR)一a,麦芽糖甙酶(a/VIAL)一 丙二酸(MNT)一L一天门冬素芳胺酶(ASPA)一 3.2水貂毛霉病国内尚未见报道,对 本病例分离获得的毛霉菌更详细的 鉴定及其对水貂的致病力和病理变 化的详尽研究尚待继续水貂沙门氏 菌病有较多报告.多由吃食了被污染 的饲料或消化道传染病而引发.此例 中.6月份在舟山地区空气湿度大,气 温一般在20?左右.很适宜真菌类病 原体的生长,再加上貂笼拥挤,仔貂 抗病能力弱等因素.容易感染真菌 病.病程延续又往往继发细菌性疾 病.分离到的沙门氏菌可能是主要的 菌株采用VIrEK一60自动微生物分 析仪(法国BioMerieux)鉴定. 1.3药敏试验 按照K—B法进行M—H培养基 由北京陆桥技术有限责任公司提供. 药敏纸片由北京天坛生物技术公司 提供,均在有效期内使用.按照K—B 法进行.操作按照NCCLS2006年标 准;"S"敏感,"I"中介,"R"耐药. 1.4质量控制 每周用大肠埃希菌ATCC25922, 金黄色葡萄球菌ATCC25923对所有 药敏纸片进行质控.均在NCCLS2006 允许范围之内 2结果 2.1大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的 分离鉴定 通过分三批从青岛市城阳商品 贸易城随机采购84个样品.经分离 鉴定出34株大肠杆菌和4株金黄色 表2分离菌对抗菌药物的敏感性 注:S一敏感,I一中敏,R一耐药. 继发病原 参考文献 『11陈世平,冯家熙,王茁,等.我国首例 肺小根毛霉病及其致病菌的分离和 培养fJ】.真菌,1990,9(3):226— 231. 『21李国勤,汪昭贤,秦晟,等.猪毛霉菌 病临床与病理学观察fJ1.畜牧兽医学 报,1995,26(5):462--467. 『3]P~N贤,秦晟,刘斌锋,等.实验动物 毛霉菌病临床与病理学观察西北 农业,1999,8(1):11—14. 『41汪昭贤,秦晟,赵献军,等.畜禽毛霉 病主要病原真菌形态及生化特性fJ1. 中国兽医,2000,20(4):375—378.