高效液相色谱法测定洁安洗液中蛇床子素的含量
高效液相色谱法测定洁安洗液中蛇床子素的
含量
作者:肖引,陈江,强烈应,刘凯
【关键词】高效液相色谱法;洁安洗液;蛇床子素
1实验资料
高效液相色谱仪(美国Shimadzu公司),色谱泵LC10ATVP,检测器SPDM10AVP,CR6A数据处理机.蛇床子素
品(中国药品生物制品检定所),甲醇(美国Fisher公司),水为自制三蒸水,其余试剂均为分析纯.洁安洗液(本院制剂,批号:000209,000325,000509).
ODS柱150.0mm×4.6mm;检测波长322nm;流动相:甲醇水体积比(70?30);流速:0.8mL・min-1;进样量5μL,在此色谱条件下,蛇床子素的保留时间为10.5min.理论塔板数按蛇床子素峰计算不低于3500.精密称取蛇床子素的对照品,加甲醇制成每25mg・L-1的溶液(避光放置),即得.精密量取蛇床子药材煎煮液20mL,加氯仿振摇提取6次,每次30mL,合并氯仿提取液,水浴蒸干,加甲醇溶解并定容至5mL量瓶中,滤过,精密量取续滤液1mL,置10mL量瓶中,用甲醇稀释至刻度,即得.精密称取蛇床子素的对照品,加甲醇制成每70mg・L-1的对照品溶液,取1,2,3,4和5μL,按上述色谱条件测定峰面积,以峰面积(A)对浓度(C)列表,并进行线性回归.得线性回归方程A,957064C,4261.5,r=0.9998
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(n=5).表明蛇床子素在浓度7,35μg范围内与峰面积线性关系良好,取对照品溶液(70mg・L-1)重复进样6次,每次2μL,测定峰面积,计算RSD为0.48%,精密度良好.
取批号为000209样品,按含量测定法测定,重复6次测定含量,计算RSD为0.46%,重现性良好.取已知含量的批号为000325样品,精密吸取各10mL,加入0.8mg蛇床子素对照品,按含量测定方测定,表明本回收率良好(96.5%),
可行.按处方量制备不含蛇床子素的样品,照含量测定方法,取空白样品溶液注入高效液相色谱仪,(在蛇床子素相应位置无干扰收峰),结果表明空白无干扰.取三批样品供试品各20mL,用氯仿提取后,蒸干,用甲醇溶解并定容至5mL,再精密吸取滤液1mL,置10mL量瓶中,加甲醇至刻度,作为供试品溶液.另取含蛇床子素25mol・L-1的对照品溶液,各吸取5μL,注入高效液相色谱仪,按外标法计算含量,三批样品含量(n=3)分别为0.058,0.059和59mg・L-1;RSD分别为2.99%,2.30%,2.49%.
2讨论
选用ODS柱,甲醇,水作为流动相,主峰与杂峰能达到基线分离,效果满意.经样品含量测定提取次数考察,供试品处理时用氯仿提取6次,可使蛇床子素基本提取完全,1-4,.采用HPLC法测定洁安洗液中蛇床子素的含量,方法准确、快速、简便、重现性好,5-8,.
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