肠康宁结肠靶向胶囊的研制

肠康宁结肠靶向胶囊的研制 分类号 :密级 : 硕 士 研 究 生 学 位 论 文论文题目 (中文 )肠康宁结肠靶向 胶囊的研制论文题目 (外文 ) The Study and Development of Chang kang ning capsule for Colon-specific Delivery 研 究 生 姓 名 罗 永 皎 学 科、专 业中 药 学 研 究 方 向 中药制剂工艺研究 导师姓名 、职称景明 教授 论 文 工 作 起 止 年 月 2010 年 6 月 至 2012 年 2 月论 文 提 交 日 期 2012 年 3 月 论 文 答 辩 日 期 2012 年 5 月 学 位 授 予 日 期 2012 年 6 月 肠康宁结肠靶向胶囊的研制 目 录 中文摘要. 1 ABSTRACT2 符号说明. 4 前 言. 5 立题依据. 6 一、溃疡性结肠炎研究进展6 1 溃疡性结肠炎的概念 6 2 西医对溃疡性结肠炎的病因、病理研究及诊断与治疗6 2.1 病因病理研究. 6 2.2 诊断方法 7 2.3 治疗方法 8 3 中医对溃疡性结肠炎的病因及病机阐述. 8 3.1 病因病机 8 3.2 治疗方法 9 3.3 作用机制. 11 4 溃疡性结肠炎的危害. 12 4.1 大量便血. 12 4.2 肠狭窄12 4.3 肠穿孔12 4.4 中毒性肠扩张12 4.5 结肠癌13 5 小结与展望13 二、口服结肠靶向给药系统研究进展13 1 口服结肠靶向给 药系统的概念 13 2 结肠靶向给药的特点. 13 3 结肠靶向给药系统的生理学基础14 4 口服结肠靶向给药系统研究现状14 4.1 时滞型释药系统. 14 1 肠康宁结肠靶向胶囊的研制 4.2 pH 依赖型释药系统. 14 4.3 酶触发型释药系统 15 4.4 压力依赖型释药系统15 5 中药结肠靶向给药系统研究. 15 正 文 16 第一章 藏药湿生扁蕾药材的质量研究. 18 一、藏药湿生扁蕾药材 RP-HPLC 指纹图谱的研究. 18 1 仪器与试药. 18 2 方法与结果. 18 2.1 色谱条件. 18 2.2 供试品溶液的制备 18 2.3 参照物溶液的 制备 18 2.4 方法学考察 18 2.5 样品指纹图谱测定 19 2.6 湿生扁蕾药材特征峰的标定19 2.7 不同产地湿生扁蕾药材指纹图谱相似度评价. 20 3 讨论20 3.1 提取方法的选择. 20 3.2 色谱条件的选择. 20 3.3 指纹图谱的评价. 20 二、不同产地藏药材湿生扁蕾中活性成分含量的研究. 21 1 仪器与试药21 2 方法与结果. 21 2.1 色谱条件. 21 2.2 对照品 溶液的制备 21 2.3 供试品溶液的制备 21 2.4 线性关系考察21 2.5 精密度试验 22 2.6 重复性试验 22 2.7 稳定性试验 22 2 肠康宁结肠靶向胶囊的研制 2.8 加样回收率试验 22 2.9 样品含量测定. 23 3 讨论26 三、不同产地藏药材湿生扁蕾中多糖的含量测定 26 1 仪器与试药. 26 2 方法与结果. 26 2.1 多糖的提取分离. 26 2.2 对照品溶液的制备 27 2.3 供试品溶液的制备 27 2.4 标准曲线的制备. 27 2.5 样品含量测定27 3 讨论28 第二章 湿生扁蕾的提取工艺研究29 一、药理效应法评价湿生扁蕾的提取工艺 29 1 材料29 1.1 仪器 29 1.2 药品与试剂 29 1.3 动物 29 1.4 导电胶的制备29 1.5 干酵母混悬液的制备29 1.6 湿生扁蕾提取物GTP 的制备 29 2 方法与结果30 2.1 GTP 对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响30 2.2 GTP 对小鼠热板法致痛的影响. 30 2.3 GTP 对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响. 31 2.4 GTP 对小鼠电刺激致痛的影响. 32 2.5 GTP 对干酵母致大鼠发热的影响 33 2.6 数据处理. 33 2.7 小结 33 二、湿生扁蕾提取工艺的优化34 3 肠康宁结肠靶向胶囊的研制 1 仪器和试剂34 1.1 仪器 34 1.2 试药 34 2 方法与结果34 2.1 药材吸醇率考察. 34 2.2 原料药筛选及前处理34 2.3 单因素考察乙醇浓度34 2.4 65% 乙醇提取工艺优选36 2.5 提取工艺验证试验 39 2.6 干燥工艺优选40 第三章 肠康宁结肠靶向胶囊的成型工艺研究 41 1 仪器与试药41 1.1 仪器 41 1.2 试 药 41 2 剂型选择 41 3 成型工艺研究. 41 3.1 浸膏粉的制备41 3.2 辅料品种的筛选. 41 3.3 辅料量的确定43 3.4 颗粒的制备 44 3.5 装胶囊46 4 中试研究 46 第四章 肠康宁结肠靶向胶囊的质量标准研究 48 1 仪器、试剂与材 料48 1.1 仪器 48 1.2 试剂 48 1.3 材料 48 2 方法与结果48 2.1 含量测定. 48 2.2 装量差异. 52 4 肠康宁结肠靶向胶囊的研制 2.3 体外释放度评价. 52 第五章 肠康宁结肠靶向胶囊的初步稳定性评价55 1 强光照射试验. 55 1.1 试验方法. 55 1.2 试验结果. 55 2 高温影响试验. 55 2.1 试验方法. 55 2.2 试验结果. 55 3 高湿度影响试验 56 3.1 试验方法. 56 3.2 试验结果. 56 结 语57 参考文献58 致 谢63 5 肠康宁结肠靶向胶囊的研制 中 文 摘 要 目的: 本课题以藏药湿 生扁蕾 为研究对象, 针对其具有抗炎、 镇痛和抑菌作用的有 效成份进行药学基础研究。 同时结合口服结肠靶向给药系统近年来的研究进展, 对中药 药材的提取、 分离纯化、 干燥、 制剂的成型以及制剂质量初步评价、 制剂稳定性进行系 统研究, 研制出具有抗炎、 镇痛、 止泻作用的结肠靶向缓释胶囊, 完成了课题设计的目 的。 方 法: 首先通过指纹图 谱及活性成分的研究对湿生扁蕾进行了质量研究, 然后采用 药理效应法评价湿生扁蕾的提取工艺, 选择适宜的提取方法。 运用正交实验设计的方法, 以木犀草素的含量、 干膏得率为评价指标, 对提取工艺进行优选。 根据辅料性质及制剂 质量要 求, 用单因素考察选择适宜的辅料, 以浸膏粉和辅料混合后的吸湿性为评价指标, 进行辅料筛选研究。 依拟定的制剂处方制粒后对颗粒的临界相对湿度、 休止角进行考察。 将颗粒装入 pH 依赖型胶囊,得到肠康宁结肠靶向胶囊。最后通过方法学考察建立以木 犀草素为评价指标的含量测定方法, 同时采用体外释放度试验考察胶囊在人工胃液、 人 工小肠液、人工结肠液的释放度, 并对制剂进行初步稳定性考察。 结 果: 根据实验结果确 定药物处方的提取方法为乙醇回流提取。 最佳醇提工艺为湿 生扁蕾药材, 加 8 倍量的65%乙醇回流 提取3 次, 每次1.0h ; 最佳干 燥工艺为微波 干燥, 功率 12.75KW,温度 53 ?。筛选辅料为微粉硅胶和微晶纤维素比例为 2:1,辅料总量 为干浸膏量的 30%。以 90%乙醇溶液作为粘合剂,湿法制粒得到颗粒后装胶囊,装量为 0.33g/个。 通过对肠康宁结肠靶向胶囊进行方法学考察表明精密度、 稳定性、 重现性以 及加样回收率均符合要求, 实验数据稳定可靠。 体外释放度试验结果表明, 木犀草素 在 人工胃液 2h 后未见释放 ,在人工小 肠液 4h 后未见释放,在人工结肠液 1h 后有一定的 释放,2h 后释放较高。由此可得该制剂能在结肠定位释药 。 结论: 由以上实验结果 可知处方提取工艺合理, 数据 可靠。 制备所得 结肠靶向胶囊 符合药典胶囊剂项下规定,体外释放度良好,能够达到结肠定位释药的目的。 关 键词 : 湿生扁蕾;木 犀草素;pH 依赖型;结肠靶向胶囊;体外释放度 1 肠康宁结肠靶向胶囊的研制 ABSTRACT Purpose: This topic was born in Gentianopsis paludosa Munro Ma as the research object. According to its effective of anti-inflammatory , analgesic and bacteriostasis ingredients for pharmaceutical research, and combine with the research of OCTDS in recent years, to study the extraction, purification, drying, preparation quality and its stability of traditional chinese medicine. Developed a colon-specific delivery capsule with the effect of anti-inflammatory, analgesic and antidiarrheal, and completed the study design purposeMethod: Firstly, through the fingerprint and the research of active ingredients to study the quality. Then the pharmacological effect method was used to evaluate the extractionprocess, and choose the appropriatest extraction method. With the content of luteolin and extract as evaluation indexes ,the extract methods were screened by adopting orthogonal experimental design. Secondly, according to materials properties and its quality requirements, auxiliary material was chose by single factor investigation. Screening the auxiliary material with the hygroscopicity of mixture as evaluation indexes.Then explored the CRH and repose angle of granule. Then prilled and filled in capsules with the protocoled prescription and got the pH dependent colon-specific delivery capsule. Finally, through the analytical method validation to found the method of content determination. Thus study the stability and the drug release in artificial gastric fluid, intestinal juices, and colon juice of the pH dependent colon-specific delivery capsuleResult: According to the results of the experiment, it was determined that the extraction methods of prescription drugs used ethanol reflux extraction. The best ethanol-extraction process for Gentianopsis paludosa Munro Ma herbs was that added eight times amount of 65% ethanol and refluxed extraction 3 times, 1.0 h every time. The best drying technology was microwave drying, power 12.75 KW, at 53 ?. Screening auxiliary material were silicon dioxide and microcrystalline celluloseratio :2:1, auxiliary materials was 30% of total mixtures. With 90% ethanol solution as bond, got granule by wet granulation, capsule content is 0.26 g/a. In accordance to analytical method validation of the intestine corning colon-specific capsule , the results show that precision, stability, reproducibility and recovery rate all conform to the requirements, and the experimental data is stable and reliable. In vitro 2 肠康宁结肠靶向胶囊的研制 release degrees test results show that luteolin was no release in artificial gastric juice after 2h, and the same in artificial intestinal juices after 4h. It released in artificial colon juice after 1h and higher after 2 h. Thus the preparations can release drug positioning in the colonConclusion: The experimental results above demonstrate that prescription extraction technology is reasonable, and the data are reliable. Preparation income colon-specific capsule comply with pharmacopoeial capsule under a regulation, in vitro release degree good, and can achieve the purpose of colon positioning of drug releaseKEY WORDS: Gentianopsis paludosa Munro Ma; Luteolin; pH dependent; Colon-specific capsule; In vitro release degrees 3 肠康宁结肠靶向胶囊的研制 符 号 说明 缩略语 中文 ACTH 促肾上腺皮质激素 CRH 临 界 相 对 湿 度 g 克 h 小时 HPLC 高效液相色谱 Ig 免疫球蛋白文中指抗体 kg 千克 mg 毫克 mg/g 毫克每克 mg/ml 毫克每毫升 min分钟ml 毫升 mol/l 摩尔每升 OCTDS 口服结肠靶向给药系统 RSD 相 对 标 准 偏 差 SASP 水杨酸偶氮磺胺吡啶 UC 溃疡性结肠炎 μl 微升 μg 微克4 肠康宁结肠靶向胶囊的研制 前 言 溃疡性结肠炎Ulcerative Colitis ,UC是一种病因尚未明确的结肠炎症性疾病, 以结肠黏膜慢性炎症和溃疡的形成为主要病理特点。 主要症状为腹痛、 腹泻、 黏液脓血 便以及里急后重。 具有病程长、 容易复发、 难以治愈以及并发症多等特点。1859 年Wilks 首先对该病进行了描述,将其从慢性腹泻疾患中独立出来。1875 年 Wilks 及 Boas 将该 病定名为溃疡性结肠炎, 近百年来沿用此病名。 本病是目前医学界公认 的难治疾病, 由 于我国近年溃疡性结肠炎的发病率有增加的趋势,因此本病的治疗也愈来愈受到关注。 UC 研究已有百年左右的历史, 过去比较注意感染、 精神、 过敏与遗 传因素, 而近十 年的研究成果表明, 该病是易感基因、 环境和免疫系统之间复杂的交互作用所致, 这些 交互反应导致非特异性炎症细胞的激活, 炎性细胞因子及炎性递质的产生进而造成肠黏 膜的损伤。 对于 UC 的治疗, 西医多采用水杨酸类药物、 糖皮质激素及免疫抑制剂治疗, 必要时采取手术治疗, 但总体疗效尚不能令人满意。 中医药采用针灸, 灌肠等方法治疗 溃疡性结肠炎有一定优势。目前治疗 UC 的中药报道很多,以内服为主,辅以灌肠。但 内服药味多,质量不易控制,疗效得不到保证。 口服结肠靶向给药系统OCTDS 是通过药物传递技术,使药物口服后,在上消化道 不释放, 将药物运送到结肠才开始崩解并释放出来, 从而发挥局部或全身治疗作用。 该 系统的应用可以有针对地治疗结肠部位的疾病, 避免药物在胃和小肠的吸收, 降低毒副 作用,增加结肠部位的药物浓度,从而可提高疗效或降低用药剂量。 湿生扁蕾是龙胆科扁蕾属植物 Gentianopsis paludosa Munro Ma. 的干燥全草 , 在藏药属于藏茵陈类, 属蒂达系列机合斗 , 具有清热解毒、 镇痛止泻之功效 。 湿生扁蕾 目前在藏医中广泛用于治疗和预防急慢性肝炎, 所含的化学成分包括?吨酮类、 黄酮类、 三萜类、 三十烷醇、 胡萝卜苷及β- 谷甾醇等, 活性成分主要有齐墩果酸、 熊果酸、1,7- [1] 二羟基-3,8-二甲氧基?吨酮、木犀草素等 ,其中?吨酮类、黄酮类具有抗炎、镇痛、 [2] 解热、抗腹泻作用 。 本课题拟将湿生扁蕾的提取物制成结肠靶向胶囊, 使药物在病变区直接释放, 且可 以较高浓度分散于整个结肠,使中药治疗 UC 的优势得以体现。并对其制剂的质量标准 进行研究,分析方法简便易行,为控制其内在质量提供参考 依据。 5 肠康宁结肠靶向胶囊的研制 立 题 依据 一、溃 疡性结肠炎研究进 展 1 溃疡 性结肠 炎的 概念 溃疡性结肠炎Ulcerative Colitis ,UC又称慢性非特异性溃疡性结肠炎,是一种 病因尚未明确的结肠炎症性疾病。 以大肠直肠与结肠黏膜与黏膜下炎症为病变的主要 特 征 。 临 床 上 本病 以 腹泻 、 腹 痛 、 黏 液脓 血 便等 为 主 要 症 状 ,并 可 发生 严 重 的 局 部 肠 道本身 与 全 身性 并 发症 。 本 病 往 往 反复 发 作, 迁 延 数 月 , 乃至 数 十年 。 少 数 病 例 可 呈 现暴发型病例, 病情严重时甚至可危及生命。 该病近年已经成为我国消化系统的常见疾 [3] 病,是慢性腹泻的主要原因。世界卫生组织也把溃 疡性结肠炎列为现代难治病之一 。 2 西医 对溃疡 性结 肠炎的 病因 、病理 研究 及诊断 与治 疗方法 2.1 病因病 理研 究 溃 疡 性 结 肠 炎 是 以 结 肠 黏 膜 慢 性 炎 症 和 溃 疡 的 形 成 为 主 要 病 理 特 点 的 常 见 肠 道 疾 [4] 病。 其病因迄今仍未完 全明了,过去比较注意 感染、精神、过敏与遗 传因素 ,近十 年 的研究成果表明, 该病是易感基因、 环境和免疫系统之间复杂的交互反应导致非特异性 [5][6][7][8] 炎症细胞激活, 炎性细胞因子及炎性递质产生进而造成肠黏膜的损伤 。 感染因 素 中尚未发现任何病毒、细菌或原虫与本病有何特异性联系。具体有以下几种说法: [9] 2.1.1 自身免疫性疾病 1体液免疫。患者血清中可能存在多种自身抗体如:?抗结肠抗体,其抗原是 结 肠上皮细胞内的脂多糖, 能介导抗体依赖性细胞毒细胞, 发挥向导作用, 使细胞毒细胞 杀伤结肠上皮细胞; ?血清中还可能含有与结肠上皮细胞抗原起交叉反应的抗大肠杆菌 抗体。?血清中还常含有一种或一些抑制巨噬细胞移行的抑制因子。2细胞免疫。 将患者的淋巴细胞与正常成人或胎儿结肠上皮细胞共同培养, 会使结肠上皮受损, 说明 患者的淋巴细胞已被致敏,出现了细胞毒作用。3免疫复合物存在。患者结肠固有膜 中存在IgG、 补体 C3 以及S 表型和纤维蛋白沉积的免疫复合物。 因此血循环中的免疫复 合物,很可能是引起肠道外病变的因素。 2.1.2 精神神经因素 本病患者的病情复发或恶化, 常与精神紧张、 内心冲突和焦虑不安等情绪变化有关, 因此身心因素可能在本病的起始和延续中起到重要作用。 2.1.3 过敏因素 6 肠康宁结肠靶向胶囊的研制 特别是对食物过敏, 如牛乳等。 本病患者的肠粘膜中肥大细胞增多, 刺激后能释放 出大量组织胺等物质,均提示本病和过敏反应有关系。 2.1.4 溶菌酶学说 溶菌酶在溃疡性结肠炎病人体内大量增加, 而在痊愈时则降低, 故认为此酶在溃疡 性结肠炎病人体内过渡形成,使结肠失 去粘液保护作用。 2.1.5 遗传因素 欧美的家族发病率和种族间发病率有明显的差异,以及本病与某些 HLA 的关联性, 均支持和遗传因素有关。 2.2 诊断方 法 2.2.1 临床表现 包括与腹泻伴同的多关节疼痛、 结节性红斑、 脓皮症、 坏死性丘疹等; 眼部有虹膜 炎、 色素层炎、 葡萄膜炎等; 肝区不适或隐痛, 肝脏损害随病变程度和病变范围的变化 而呈平行关系。全身症状多见于急性期重型有,有发热,消瘦,水肿等。 2.2.2 影像诊断 钡灌肠对本病的诊断和鉴别有重要价值。 常规钡灌肠 X 线检查轻度溃疡性结肠炎患 者X 线检查呈阴性。 中度和重度患者则 具有典型表现: 可见结肠袋消失或变浅, 结肠僵 直缩短,甚至如水管样;充盈缺损,假息肉形成,少数病例因肠壁纤维化及息 肉增生, 可致肠腔变窄。由于微小溃疡及糜烂附着钡剂,钡斑点点,气钡双重造影显示雪花征; 肠壁边缘呈小锯齿状突出的钡影及铁轨样的皱襞相。 若直肠后间隙增大达 2cm 以上, 则 表示直肠与直肠后组织有严重炎症。 2.2.3 内窥镜检查 急性期轻度的症状为粘膜充血、 水肿、 分泌物增多, 密集分布的小出血点, 散在渗 血及出血。 中度则粘膜充血、 水肿明显。 重度患者粘膜充血、 水肿加重, 病变部位几乎 没有正常的粘膜, 粘膜呈粗细不等的颗粒 状及假性息肉。 慢性活动期的症状为正常粘膜 结构消失,肠壁僵硬,肠腔狭窄呈管状,有炎性息肉或溃疡。粘膜分泌增多,有充血、 水肿或渗血。静止期时粘膜炎症轻、苍白、出血少,肠壁正常结构消失显得干燥粗糙, 僵硬,肠腔狭窄呈管状,有多数假息肉形成。 。 2.2.4 粪便 粪便肉眼检查发现血、 粘液及脓液, 镜下则会发现大量红细胞、 白细胞、 脓细胞及 吞噬细胞。 7 肠康宁结肠靶向胶囊的研制 2.3 治疗方 法 2.3.1 日常调理治疗 休息、 饮食与营养相配合。 需食用富有营养且易于消化的食物, 疾病发作期间不要 吃粗纤维蔬菜、 水果及谷类, 不可饮酒, 不得食用过多的调味品。 要纠正 水、 电解质和 酸碱平衡紊乱。 2.3.2 抗菌药物治疗 治疗 UC 的 抗 菌 类 药 物 有 磺 胺 类 和 来 滴 灵 。 磺 胺 类 药 物 中 以 水 杨 酸 偶 氮 磺 胺 吡 啶 SASP 效果最佳。多用于轻型及中型病人。来滴灵临床应用未见有严重副作用的报告, 病程越短疗效越好。 2.3.3 激素治疗 糖皮激素和肾上腺皮质激素能抑制炎症和免疫反应, 缓解症状, 治疗初期期疗效较 好,还能增加病人食欲,改善病人情绪。 2.3.4 免疫抑制剂 如上述治疗方法效果不佳, 又无手术适应症, 可考虑选用免疫抑制剂治疗。 如硫唑 嘌呤和6-巯基嘌呤等免疫抑制药。但其疗效迄今尚未能肯定。 除此之外还有外科手术治疗以及物理治疗。 3 中医 对溃疡 性结 肠炎的 病因 及病机 阐述 溃疡性结肠炎Ulcerative Colitis ,UC在中医中属“泄泻”、“痢疾”等病症范 畴。 是一种累及直肠、 结肠黏膜的慢性非特异性炎症。 以腹痛、 腹泻 、 黏液血便、 里急 后重为主要临床表现。 病程长, 病情轻重不一, 常反复发作, 严重影响身体健康和生活 质量。 中医采用 辨 证 论 治 , 在辨证分型时, 还要抓住各证型的特殊症候,对症治疗。 常 用 的 治 疗 方 法 有 内 服 治 疗 , 灌肠治疗 和 针 灸 治 疗 。[10] 3.1 病因病 机 中医认为溃疡性结肠炎的病因多责之于先天禀赋不足, 脾胃功能失健, 在此基础上 外感时邪, 内伤饮食而发病。 发病机理主要为邪阻大肠, 传导失司, 气血壅滞, 脂络受 伤, 滞下脓血。 其病机主要为脏腑气血阴阳的失调, 常表现为脾虚失运, 肠腑失司; 或 因肝犯脾土, 肾虚不固, 中土失养, 运化失司; 其中以脾虚为病机根本。 病理性质有寒、 热之分,病理因素包括湿、热。 3.1.1 脾虚湿热夹瘀,寒热错杂,肝、脾、肾同病 [11] 著名老中医徐景藩 教 授根据溃疡性结肠炎的发病特点, 提出本病的主要病机是脾 8 肠康宁结肠靶向胶囊的研制 虚湿盛,病久可及肝肾,常兼有湿热血 瘀的观点。本病在脾虚的基础上感受湿热之邪, [12] 湿热是UC发病的重要病理 因素 , 同时血瘀也是重要病理因素之一。UC多为本虚标实之 证, 发时标实为主, 湿热血瘀气滞之象明显; 缓解期本虚为主, 主要是脾肾阳虚, 常兼 有湿热血瘀的临床表现; 迁延期本虚标实并重, 所以寒热错杂是本病的又一特点。 故病 久常肝、脾、肾互相影响,导致三脏同病,寒热错杂,病情迁延难愈。 3.1.2 痰湿内盛,肺脾气虚同病 [13] 沈洪教授 在国内首次 提出从肺、脾论治溃疡性结肠炎的新观点,认为脾虚不运, 肺气失调是溃疡性结肠炎的发病基础; 痰湿久羁, 酿热生疡为溃疡性结肠炎的病机关键; 本虚标实, 气机失调, 大肠不固为溃疡性结肠炎的病 理表现。 本病属肺脾 同病, 除了既 [14] 往认知的湿、热病理因素外,痰也是本病的重要病理因素之一 。《 黄帝内经》中说: “逆之则伤肺, 冬为飧泄” , “肺脉小甚为泄” 。 《医门法律》 亦云: “肺移热于大肠, 久为肠?” , “泻痢皆由肺热所移” 。 由此可见, 肺病及肠, 肺气不调也是本病发生不 可忽视的病理基础。 脾胃虚弱, 肺气失调, 津液不能正常输布, 则聚而为湿、 凝而为痰。 “脾为生痰之源,肺为贮痰之器”。 3.1.3 湿热蕴肠 、正虚邪恋的分期辨证 溃疡性结肠炎在活动期和缓解期呈现不同的临床表现, 活动期多症见腹痛腹泻, 大 便中夹脓夹血, 或纯为血 便, 里急后重, 身热, 肛门灼热, 口苦口臭, 小便短赤, 舌红, 苔黄腻, 脉数或滑数, 属于实证, 以湿热蕴肠, 气血不调为主; 缓解期多症见五更泄泻, 久泻不愈, 腹痛隐隐, 腹胀肠鸣, 食减纳呆, 腰膝酸冷, 形寒肢冷, 少气懒言, 舌淡苔 白,脉沉细,属于虚实夹杂证,以正虚邪恋,运化失健为主。 [15][16] 3.2 治疗方 法 3.2.1 分期论治 [17] 李乾构 将本病分成 2 个期:急性活动期,多属于脾胃虚弱、大肠湿热证,治法: 健脾助运、 清化湿热, 方药: 自拟清化溃结汤; 缓解期, 多属于脾肾 俱虚、 湿邪留滞证, 治法:健脾补肾、除湿导滞,方药:自拟健脾溃结 汤。 3.2.2 分型论治 [18] 杨现彩等 将其分为三 型: 湿热型, 治则: 清 热燥湿、 活血化瘀, 方 用白头翁汤加 减; 寒热交杂型, 治则: 温中散寒、 兼清余热, 方用当归四逆汤加减; 脾肾两虚型, 治 [19] 则: 补脾益肾, 方用十 全大补汤加减。 梁郁贤等 将其分为六型: 湿 热内蕴型, 治宜清 热利湿, 理气止痛, 方 用芍药汤; 气滞血瘀型, 治宜活血化瘀, 理气 止痛, 方用桃红四 9 肠康宁结肠靶向胶囊的研制 物汤合失笑散;肝郁脾虚型,治宜舒肝行气,健脾和胃,方用痛泻要方;脾胃虚弱型, 治宜健脾益气,和胃止泻,方用参苓白术散;脾肾阳虚型,治宜温补脾肾,涩肠止泻, 方用四神丸合附子理中丸; 阴 血亏虚型, 治宜养阴补血, 益气固肠, 方用参苓白术散合 沙参麦冬汤。 3.2.3 保留灌肠法 [20] 苏娟萍等 用肠必安和 生理盐水保留灌肠,对照组用锡类散和生理盐水保留灌肠, [21] 总 有 效率 90.91% 。 张扬 等 予治 疗组 结肠 灵黄 柏 、白 芍、 地榆 等, 对 照组 用柳 氮 磺 胺吡啶,总有效率 92.13%。 3.2.4 内服和灌肠结合 [22] 黄月玲等 观察组采用 自拟中药内服, 药物组成: 党参、 茯苓、 白术 等, 灌肠用药: 槐花、 两面针、 黄柏等, 对照组服用氟哌酸胶囊, 另用地塞米松针和庆大霉素针保留灌 [23] 肠, 总有效率93% 。 杨 佳丽等 用自制珍珠散 珍珠、 儿茶、 白及等 保留灌肠, 并辨证 服用中药汤剂, 脾虚者服参苓白术散; 脾虚挟郁服参苓白术散加木香、 蒲黄等; 大肠湿 热服白头翁汤加减;脾肾阳虚用真人养脏汤加减;肠风下血用槐花散加味。 3.2.5 专方专药治疗 [24] 赵保健等 以张东岳经 验方为主治疗, 分 UC1 号方和 UC2 号方。1 号方用于泄泻日 行数次、腹痛腹胀者;2 号方用于病程短,病情轻者,便于长期服用,以达巩固疗效。 [25] 治疗126 例, 总有效率为 95.8%, 复发率 17.3%。 冯宗清等 自拟肠疡宁 方治疗 UC30 例, [26] 总有效率为 86.67% 。杜荣年 用健脾解郁汤 治疗 38 例 UC,总有效 率为 97.37% 。陈治 [27] 水 自制健脾灵片治疗 UC300 例,总有效率为 97%。 3.2.6 针灸治疗 [28] 于荣 以针刺百会穴为 主, 配合合谷、 足三里 、 中脘、 天枢, 针刺百 会时向前横刺 1.5 寸,施捻转手法,得气后留针,总有效率为 91.3%。 3.2.7 局部中药治疗 电子结肠镜检查示结肠黏膜出血、水肿,局部表浅溃疡或糜烂为本病的病理特征 , [29] 因此局部的中药治疗方法扮演着比较重要的角色。 王璐等 在常规治疗 的同时加用中药 [30] 脐疗方治疗UC30 例, 结果有效率为 93.3%, 近期治愈率为 63.3%。 郭松河 采用大黄 胶 囊经结肠镜送至患处治疗 UC190 例,总有效率为 90.8%。 3.2.8 穴位埋线法 [31] 李玉琴等 通过穴位埋 线法治疗慢性结肠炎 1190 例 ,其中溃疡结肠炎 100 例 ,慢 10 肠康宁结肠靶向胶囊的研制 性过敏性结肠炎 1090 例,总有效率 97.6%。 3.2.9 中西医结合治疗 溃疡性结肠炎在发作期间, 主要采取对症治疗, 控制合并症等处理。 缓解期治疗则 基于力争和保持缓解状态。 当暴发型、 危重病证以及较为严重的并发症, 宜采用西药治 [32] 疗以及激素治疗,待病情平稳时,可结合中医药治疗。陈守平等 报 道口服健脾益气、 疏肝化瘀中药,给合庆大霉素、地塞米松混悬液保留灌 肠治疗 UC56 例,治疗组显效率 55.36% ,单纯西药组显效率为 33.33% 。 3.3 作用机 制 免疫系统在溃疡性结肠炎的病因和发病机制中所起的作用尤为重要 , 中医药治疗本 病的研究也主要集中于此。 3.3.1 对T 淋巴细胞的影响 [33] 郭颂铭等 观察中药组 方对实验型动物结肠炎的免疫指标的影响。 结果表明该方能 有效的抑制其异常增高的体液免疫IgG ,提高功能低下的细胞免疫Ea2RFC、Et2RFC、 LTR ,纠正比例失调的 CD4/CD8 水平,疗效明显高于柳氮磺胺吡啶。 3.3.2 对细胞因子cytokines,CK 的影响 [34] 朱聋聋等 采用肠安胶 囊治疗 IL22 降低,TNF2α水平异常增高的 IUC 大鼠 , 实验 结果表明 :肠安胶囊可明显升高 IL22 活性, 降低 TNF2α ,并且还具有增强细胞免疫、 体液免疫和加强单核巨噬细胞吞噬功能的作用。 3.3.3 对粘附分子的影响 [35] 郑红斌等 以免疫组化 法观察清肠栓马齿觉、参三七、青黛等对 UC 大鼠模型肠 组织细胞间粘附分子ICAM21表达的影响。结果显示清肠栓对 ICAM21 的表达有抑制作 用, 且随剂量的增加抑制作用增强。 3.3.4 对氧自由基的清除作用 [36] 王少华等 制作UC 大鼠 模型, 其肠粘膜组织中超氧化物歧化酶SOD活性显著低于 正常 , 而丙二醛MDA含量则显著增高。应用复方丹参注射液治疗后 , 结肠粘膜中 SOD 活性明显升高 ,MDA 含量明显降低, 而且随着治疗时间的延长变化更加显著 ,SOD 活性 和MDA 含量均趋向正常。 3.3.5 调节一氧化氮NO异常 [37] 顾立刚等 研究显示, 溃 疡性结肠炎肝郁脾虚证用疏肝健脾方药治疗后其结肠粘膜 NO 含量明显下降 ,髓过氧化物酶MPO 含量明显升高。 11 肠康宁结肠靶向胶囊的研制 3.3.6 对血小板功能的影响 [38] 刘同亭等 测定溃疡性 结肠炎病人血小板 a 颗粒膜糖蛋白CD62p、溶酶体膜糖蛋 2 白CD63 和 血 小 板 膜 糖蛋 白CD41a 的含量 , 并观察菊花煎灌肠治疗前后的变化。总有 [39] 效率为93.75%。 周晓东等 测定34 例UC 患者 血清内源性血小板生成素TPO , 并与50 [40] 例健康者作对照 , 结果 UC 患者血清 TPO 水平为145.1?110.1μg/ml。 许丽莉等 通过 对 32 例活动期 UC 血小板聚集率的检测 ,证实了活动期 UC 患者体内存在血小板激活 , [41] 抗血小板激活药物可能对 UC 有一定治疗价值。 林群莲等 对59 例慢 性UC 患者血液流 变学6 项指标的检测,结果显示血浆黏度、 凝血因子?、 血细 胞比容均增高,为判断慢性 [42] UC 是否存在 “血瘀证” 提供实验室依据。 郑洁 应用RIA 免疫法测 定30 例 UC 患者血 浆血栓素 B2TXB2 和 6-酮-PGF1α水平, 并与健康者对照。结果 UC 患者血浆 TXB2 和 TXB2/6-酮-PGF1 α比值明显高于对照组,而 6-酮- PGF1α与对照组比较无统计学意义。 提示 UC 患 者 血 液流 变性 异 常, 机 体 相对 处 于高 凝 状 态, 其 血小 板 功能 较 为 亢 进, 导致 血 小板释放更多的炎症因子,从而加重UC 病情的发展,尤其是血栓性并发症的发生,为活血 化瘀治疗本病提供了客观依据。 4 溃疡 性结肠 炎的 危害 4.1 大量便 血 便血是本病的主要临床表现之一, 也是常见的危害之一, 便血的多少也是衡量病情 轻重的指标。 这里所说的大量便血是指短时间内大量肠出血, 伴有脉搏增快, 血压下降 及血色素降低,需要输血治疗。 4.2 肠狭窄 此症状多发生在病变广泛、 病程持续长达 5~25 年以上的病例, 其部位多见于左半 结肠, 乙状结肠或直肠。 临床上一般无症状, 严重时可引起肠阻塞, 在本 病出现肠狭窄 时,要警惕肿瘤,鉴别良性恶性。 4.3 肠穿孔 多为中毒性肠扩张的并发症, 也可出现严重型, 多发生于左半结肠, 皮质激素的应 用被认为是肠穿孔的一个危险因素 。 4.4 中毒性 肠扩 张 这是本病的一个严重并发症,多发生在全结肠炎的病人,死亡率可高达 44%,临床 表现为病情迅速恶化, 中毒症状明显, 伴有腹泻、 腹部压痛和反跳痛, 肠鸣音减弱或消 失,白细胞数增多,易并发肠穿孔。 12 肠康宁结肠靶向胶囊的研制 4.5 结肠癌 溃疡性结肠炎病例中约 5%病例发生癌变, 多见于病变累及全结肠, 幼年起病和病史 超过10 年者。 5 小结 与展望 溃疡性结肠炎是目前医学界公认的难治疾病, 已被世界卫生组织列为现代难治病之 [43] 一 。 我国近年溃疡性结肠炎的发病率有增加的趋势, 因此对本病的治疗愈 来愈受到关 注。 西医在治疗上主要是对症治疗, 目 前主要治疗药物为水杨酸制剂、 糖皮质激素和免 疫抑制剂。 其治疗对控制急性发作有一定优势, 但其忽略整体调节, 且其药物的毒副作 用往往让患者难以坚持, 因而难以根治, 反复发作。 尽管运用中医药治疗溃疡性结肠炎 取得了一定的疗效, 但也存在下面几个缺点: 中医界关于溃疡性结肠炎的证的本质, 认 识不清, 因而在病例入组时的纳入标准显得不够严谨; 缺乏统一的诊断、 分型标准, 仅 仅是以症状改善作为评判标准, 所以其疗效的可靠性值得怀疑; 同时盲目夸大疗效, 忽 略毒副作用也是不可取的; 给药剂型单一, 缺乏剂型改良。 而目前的给药剂型的效果不 好。因此新剂型 的研发显得迫在眉睫。 二、口 服结肠靶向给药系 统研究进展 [44][45] 1 口服 结肠靶 向给 药系统 的概 念 口服结肠靶向给药系统oral colon targeting-drug delivery system ,OCTDS, 又称口服结肠定位给药系统,是上世纪 90 年代后期发展起来的新型给药方 式。它是通 过药物传递技术, 使药物口服后, 在上消化道内不释放, 将药物运送到人体结肠部位后 开始崩解并释放出来, 提高药物在结肠部位的局部浓度, 充分发挥药物的治疗作用, 从 而使药物发挥局部或全身治疗作用。 目前 OCTDS 已发展出不同原理的多 种结肠靶向给药 系统,包括基于消化道恒定的转运时间的时滞型释药系统;基于胃肠道逐渐升高的 pH 值, 选择pH 敏感材料制备的 pH 依赖型释药系统; 基于结肠细菌所产生独特酶系, 制备 能被结肠菌酶特异性降解的酶触发型释药系统; 另外还有对压力依赖型释药系统、 有机 酸诱导型释药系统、脉冲式释药系统等。 2 结肠 靶向给 药的 特点 结肠靶向给药可以有针对地治疗结肠部位的疾病, 如结肠炎、 结肠癌等。 避免药物 在胃和小肠的吸收, 增加结肠部位的药物浓度, 同时降低毒副作用, 从而达到增效减毒 的目的并且降低用药剂量。 结肠内的蛋白酶活性比胃和小肠内的低得 多, 结肠壁对大分 13 肠康宁结肠靶向胶囊的研制 子的穿透阻力也比小肠壁小, 因此对在胃肠道内容易被破坏的蛋白类药物, 经结肠定位 [46][47] 给药后吸收,可以避免蛋白类药物在胃和小肠内被蛋白酶的降解,极具临床价值 。 食物在人体结肠部位滞留时间为 1~3 天,结肠定位给药系统的研究还有助于某些在结 肠有缓慢吸收的缓控释制剂的开发。 同时口服结肠靶向给药系统与灌肠给药相比, 有利 于减轻病人痛苦,提高其顺应性。 [48][49] 3 结肠 靶向给 药系 统的生 理学 基础 结肠靶向给药的生理学基础主要有: 一是胃肠道的 pH 梯度, 从胃到直肠 pH 值逐渐 增大,到结肠约为 7.4。二是药物在 小肠内相对稳定的转运时间,一般为 224 ?55min。 三是高浓度的肠道微生物。结肠中的微生物浓度相当于胃肠道中的 5 个数量级;另外, 结肠中还存在着大量细菌酶、 偶氮还原酶与多糖酶或糖苷酶。 四是结肠中水分少, 内容 物稠度高,所受压力大。 [50][51][52] 4 口服 结肠靶 向给 药系统 研究 现状 根据以上所述的治疗需求及人体胃肠道的生理学特点, 现已有多种类型的口服结肠 定位释放系统, 包括: 时滞型释药系统、pH 依赖型释药系统、 酶触发型释药系统和压力 依赖型释药系统。 [53] 4.1 时滞型 释药 系统 药物通过小肠的时间相对较固定, 而药物经 口服吸收依次经胃、 小肠到达结肠需时 间约6 小时。 如利用控制药物释放技术使其在胃、 小肠不释放, 而到达结肠开始释放从 而达到结肠靶向给药的目的。 但这和胃的排空时间和胃中食物的类型、 药物颗粒的大小 有关,变异较大。 4.2 pH 依赖 型释药 系统 人体胃肠道 pH 由低到高逐渐递增,结肠 pH 相对较高,这是结肠靶向给药中 pH 依 赖型释药系统的生理基础。pH 依赖型释药系统主要通过用 pH 敏感 材料进行包衣的方法 来实现。作为理想的结肠靶向包衣材料,必须具备以下条件:1能耐 受 酸 性 而 在 胃 液 中不溶解。2 在中性或弱碱性条件下开始溶解或蚀解 。pH 依赖型释药系统的结肠靶向 性受材料溶解度、衣膜的厚度以及制剂在胃肠各段停留时间的影响。材料在不同 pH 中 的溶解性对制剂的靶向性有较大的影响。 所以该制剂具有较大的个体差异, 这也是该给 药系统面临的主要问题。 由于它具有成本低、 配置方便的优点, 所以现今它是结肠定位 最简单的方法之一, 。 14 肠康宁结肠靶向胶囊的研制 4.3 酶触发 型释 药系统 结肠细菌能产生许多类型的独特的酶系, 许多高分子材料在结肠中能够被这些酶所 降解,而这些高分子材料作为药物载体在胃、肠道中由于相应酶的缺乏而不能被降解, 这就保证药物在胃肠不释放。 目前, 偶氮降解酶和多糖酶被广泛应用 于结肠靶向酶降解 系统中,由此开发了一系列偶氮聚合物和多糖类聚合物。 4.4 压力依 赖型 释药系统 人体胃肠道因蠕动而产生压力, 在胃和小肠中, 因为有大量的消化液存在, 缓冲了 物体所受到的压力。但在结肠中,水分被大量吸收,肠蠕动能够对物体产生直 接压力, 从而使物体破裂,这就是压力依赖型结肠靶向释药系统的释药原理。 5 中药 结肠靶 向给 药系统 研究 虽然以西药为原料的结肠靶向制剂生产上市品种仍然有限,但研究现已相当普遍。 而以中药为原料的结肠靶向制剂的研究尚处于起步阶段。 为了提升中药制剂水平, 进入 世界先进的制剂研究领域, 通过工艺 、 剂型与疗效的相关性研究, 开拓中药 OCTDS 这一 研究新领域刻不容缓。 中药结肠靶向给药不但可以解决普通制剂口服后在到达结肠或直 肠前已被吸收或降解的问题, 使药物以高浓度