免疫化学法便隐血检测操作流程

免疫化学法便隐血检测操作流程 万华普曼生物有限公司 W.H.P.M BIORESEARCH & TECHNOLOGY CO., LTD 消康保便隐血双联半定量法检测试纸 标准操作规程 综述: 便隐血试验已被视为诊断各种原因引起的消化道出血及消化道恶性肿瘤的主要筛选方法。本产品是使用化学法和血红蛋白免疫法粪便隐血的检测法结合在一起。对上下消化道出血的阳性检出率均有显著的提高，被认为是对消化道出血筛查最适用的试验。 【名称】消康保便隐血双联半定量法检测试纸 【方法】血红蛋白胶体金检测法和化学联苯胺检测法二合一便隐血检测试纸 【原理】 该产品采用三明治双抗夹心免疫法检测原理研制。采用单克隆和多克 )，在不到五分钟的时间里，隆抗体，特异性地针对粪便样品中的人血红蛋白(Hb 可以检出最低量为0.2mg/mL的血红蛋白。本方法不受饮食的限制，能准确检测无症状、少量、持续，肉眼和显微镜下看不到的消化道出血，并且不受动物血等药物干扰。 【试剂组成和包装规格】 包装规格:1人份/条、1人份/板 条形:100人份/盒 50人份/盒 40人份/盒 25人份/盒 板形: 25人份/盒 【操作流程】 具体情况可根据不同试剂盒的说明操作。本规程操作适用于万华普曼生物工程有限公司产品。 在使用本产品前，请先查看盒中所有的物品。在未做好测试准备前，请不要提前撕开铝箔袋。条型配置:采便棒、小试管、说明书、检测试纸包装袋 1.用采便棒采集便样后(覆满远端螺旋杆)，将其放入装有缓冲液的小试管中，充分混匀便样; 2.撕开铝箔袋，取出试纸条(勿摸试纸中段白色部分); 3.将试纸标有MAX箭头的一端插入待测的样本中，待测的标本界面不得超过MAX线; 4.5分钟内判读免疫法结果，判读完免疫法结果后，将化学法检测液滴加到已被样品溶液浸湿的化学检测试纸片上，1分钟内判读化学法结果。在化学法结果阳性时，对比标准色卡，判定出血程度。 1 万华普曼生物工程有限公司 W.H.P.M BIORESEARCH & TECHNOLOGY CO., LTD 5.根据免疫法和化学法的结果判断隐血双联半定量法试纸的最终结果。 板型配置:采便器、说明书、检测试纸包装袋 1.用采便棒多点采取粪便(覆满远端螺旋杆)。 2.将采便棒放回采便容器内，将盖拧紧，与缓冲液充分混均。 3.撕开铝箔袋，取出检测试纸并平放桌面上; 4.将采便器顶端盖拧下，将3-4滴粪便混悬液滴入检测板加样孔(S)中; 5.5分钟内直接在观察孔中读取结果，5分钟后结果无效。 【检验结果的解释】 2 万华普曼生物工程有限公司 W.H.P.M BIORESEARCH & TECHNOLOGY CO., LTD 比色卡:(见包装盒内配置的比色卡) 免疫法结果判读: 与控制线(C)出现一条色带，明标本有隐性出血; 1.阳性:反应线(T) 2.阴性:在控制线(C)出现一条色带，在反应线(T)无色带出现，表明标本无隐性出血; 3.无效:在控制线(C)和反应线(T)均无色带出现，或在反应线(T)出现一条色带，则表明试验无效，应用新试纸重新测试。 化学法结果的判读: 1.阳性:在滴加化学检测液1分钟内试纸片从浅黄色变成蓝色，结果为阳性，同时对比标准色卡，判定出血程度。 2.阴性:1分钟内不变色，结果为阴性。 3.无效:若化学试纸片呈花色，则判断无效，请重新取试纸检测; 隐血双联半定量法试纸最终判定结果: 1.免疫法和化学法均显示阳性结果时，结果判定为阳性。化学法显示阳性，其试纸片的颜色可对照比色卡判断出血程度，以“，、，，、，，，、，，，，”表示; 2.免疫法呈现阳性结果，但是化学法呈现阴性时，判定样品中血红蛋白含量较低，结果为阳性; 3.免疫法显示阴性结果，化学法显示阳性结果时，可能为血红蛋白含量过高导致抗原过剩，建议将样本高倍数稀释后再用免疫法检测一次，如果显示为阳性，可判定结果为阳性。或采用生产商提供的转铁蛋白检测试纸复检，以确认检测结果; 4.免疫胶体金法和化学法均显示阴性结果时，可判定结果为阴性。 5.当免疫胶体金试纸出现无效结果时，或者化学法试纸片出现花色时，判定整体结果无效，重新测试。 【质量控制】 每批测定都使用阳性和阴性质控品做质量控制，具体请参照不同试剂盒质控品操作规程。 每个工作日或每隔两个工作日在开始当日检测样本之前应对所使用的试剂进行质量控制。 1) 试纸稳定性:4?-30?避光保存，不得冻存，有效期24个月，打开包装后 须立即使用。 2) 阳性质控品稳定性:未开瓶的试剂于4?保存可稳定至有效期，开瓶后于4? 保存可稳定7天。 3) 阴性质控品稳定性:未开瓶的试剂于4?保存可稳定至有效期，开瓶后请尽 快使用完，不宜反复开启使用。 4) 阳性质控品符合率:取高浓度和低浓度质控液，按照正常操作步骤分别检测 1人份试剂，1-5分钟内观察结果。检测结果应为阳性，即试剂的控制线C 和反应线T均有红色色带出现。 5) 阴性质控品符合率:取阴性质控品，按照正常操作步骤检测1人份试剂，1-5 分钟内观察结果。检测结果应为阴性，即仅在试剂的控制线C出现一条色带。 3 万华普曼生物工程有限公司 W.H.P.M BIORESEARCH & TECHNOLOGY CO., LTD 6) 试剂更换批号后，用同样方法验证新批号试剂的可靠性，并填写每批试剂的 质控表。 7) 7. 免疫胶体金试纸出现无效结果时，或化学法试纸片出现花色时，可能是 试纸或试剂实效，应更换新的批号试纸重新测试。 【临床意义】 1) 消化道出血时，如溃疡病、恶性肿瘤、肠结核、伤寒、钩虫病等，本试验可 为阳性。 2) 消化道恶性肿瘤时，一般粪便隐血可持续阳性，溃疡病时呈间断性阳性，本 法对消化道恶性肿瘤的早期检出率约30%,40%，进行期约为60%,70%，如 果连续检查3天，阳性率可提高10,15%。 【附注】 1.在粪便形成的过程中，少量的消化道出血不一定与之混合均匀，而且消化道出血具有间断性，所以需要连查三次以获得更准确结果，只要有一次结果为阳性，就可认为有隐性出血存在。 2.免疫法便隐血检测的结果呈阳性，也可能由于以下干扰情况导致的:例如牙龈、口鼻腔出血，痔疮出血，月经期出血或某些药物(如阿司匹林等)刺激胃肠道造成的出血，应该提醒临床医生予以注意。 3.化学法检测结果呈阳性，也可能是由于以下干扰情况导致的:如被检者在3日内食用了肉类、动物内脏类食物或生食含有铁质的食物和蔬菜均可使试验结果呈阳性，应在判断结果时注意。 4.由于被检测的样本中可能存在干扰检测结果的物质，或者实际操作中可能存在失误，使得试验结果有可能出现错误。因此对于可疑的检测结果应进行复检或使用不同的便隐血检 测方法联合检测，以明确试验结果。 5.化学检测液需要在2?-8?下密封避光保存，打开使用后必须立即密封，有效期为3个月。 【注意事项】 1(本试剂为一次性使用，请在有效期内使用。 2(注意采集粪便时不要结块，深挖或将采集的样本装满整个采便器或小试杯。 3(由于被检测的样本中可能存在干扰检测结果的物质，或者实际操作可能存在失误，使得试验结果有可能出现错误。因此对于可疑的检测结果应进行复检或者使用不同的便隐血检测方法联合检测，以明确试验结果。 本规程每两年复审一次。 编写日期:2010年11月20日 规程编写者:万华普曼生物工程有限公司，仅供医院检验科参考使用。 参考文件:《全国临床检验操作规程》第三版 4