新型淋球菌培养基分离培养淋球菌的研究

新型淋球菌培养基分离培养淋球菌的研究 摘 要 : [ 目的 ] 比较自制新型淋球菌培养基与进口 Thayer- Martin ( T- M) 淋球菌选择培养基分离培养淋球菌的性 能, 并观察其保存期长短。 [ 方法 ] 鉴定淋球菌, 接种两种淋球菌培养基分离培养, 比较各自阳性率; 接种不同保存 时间段的新型淋球菌培养基, 比较培养性能。 [ 结果 ] 两种培养基对淋球菌的分离阳性率一致, 差异无统计学意义。 不同时间段新型淋球菌培养基对淋球菌的培养性能一致, 差异无统计学意义。 [ 结论 ] 新型淋球菌培养基具有经济、 培养性能高等优点, 可以替代进口 T- M 培养基。 关 键 词 : 新型淋球菌培养基; Thayer- Martin 培养基; 淋球菌 RESEARCH ON THE GONOCOCCUS ISOLATED AND CULTURED BY A NEW TYPE OF GONOCOCCUS MEDIUMS MAI Tao, YONG Gang, YANG Xi, et al. ( Centre Laboratory, Skin Dis- ease and Venereal Disease Research Laboratory, Sichuan People’s Hospital, Chengdu 610031, China) Abstr act : [ Obje ctive ] To compare the function of self- made new style gonococcus mediums with the import gonococcus medium ( T- M) on isolating and culturing the gonococcus, and observe its preserving time. [ Me thods ] The gonococcus were identified, followed by inoculation of two kinds of gonococcus mediums to isolate and culture, finally their positive rates were compared. The gonococcus mediums were inoculated in different preserving periods, and their cultivative function was compared. [ Re s ults ] The isolated positive rate of two kinds of culture mediums for gonococcus showed to be coincident, no significant difference was found. The cultivative function of new style gonococcus medium for gonococcus in different preserving periods was still coincidence. [ Conclus ion ] The new style culture medium has the advantages of economy and high sensitivity and can be a substitution of T- M culture medium in isolating gonococcus. Key wor ds: Ne w s tyle gonococcus s e le ctive Me dium ; T- M s e le ctive Me dium ; Gonococcus 淋球菌是主要的性传播疾病—淋病的病原体, 它可引起人 1 材 料 与 方 法 类 生 殖 器 、 泌 尿 道 化 脓 性 感 染 。 目 前 有 许 多 新 技 术 如 ELISA 培养基1.1 [ , ] 12法, 荧光抗体法, 基因探针及分子杂交法 等, 但 培 养 法 一 T- M 培养基: 英国 OXIOD 公司进口散装品。 新型淋球菌 直是诊断淋病的金。只是其培养要求很高, 多依赖进口培 培 养 基 : 蛋 白 胨 1.5% , 玉 米 淀 粉 0.1% , KHPO0.4% , 24 养基, 如 Oxoid 公司生产的 Gc 培养基、T- M 培养基、美国生 KHPO0.1%, NaCl 0.5%, 琼脂 1%溶解于蒸馏水, 121?高压 24 15 min 后, 冷却到 60?左右, 无菌操作按比例加入适当虽然阳性率得到提高, 但定货费时, 灭菌 产的 New York 培养基等, 的营养成分和抑菌剂, 4?冰箱 但存在充分混匀后倾注一次性平皿。价格昂贵。我国基层医疗单位常用桂敏和 GC 培养基, [ 3] 培养性能不高等缺点, 如桂敏培养基较低的分离率等, 并不 保存备用, 接种前于孵箱预热。 适合在基层推广。因此, 国内外学者对淋球菌培养基做了很多 1.2 生化反应试剂仪器设备研究, 取得了一定成果, 但并不是十分满意。为适应性病防治 的 自配) 、葡萄糖发酵 氧化酶试验试剂( 购自 Sigma 公司, 需要, 我们将自制的一种简便、经济、有效、快速的新型淋 管、麦芽糖发酵管、蔗糖发酵管购自杭州天和微生物试剂有限 公司。 球菌培养基, 与英国产 T- M 培养基对临床菌株的分离效果进 1.3 标本的采集 行比较; 同时, 就其培养性能稳定效期进行了测试, 以便进一 采集涂片检查白细胞内外有 G- 肾形双球菌的疑似淋病患 步推广应用新型淋球菌培养基。结果报告如下。 者的尿道或宫颈分泌物。 1.4 方法 性病实验作 者 简 介 : 麦涛 ( 1975- ) , 男,硕士,检验师, 研究方向:1.4.1 鉴 定 初 步 鉴 定 : 菌 落 形 态 ( 成 圆 形 、 凸 形 , 湿 润 ) , 诊断 光滑, 半透明或者灰白色的菌落, 边缘呈花瓣状, 直径为 0.5, 通 讯 作 者 : 雍刚 ( 1964- ) , 男,本科,副研究员, 研究方向: 性病实1.0 mm, 用 白 金 耳 触 之 有 黏 性 , 符 合 上 述 特 性 , 氧 化 酶 试 验 验诊断, E- mail: sidv- lab@163.com G- 双 球 菌 。 最 后 鉴 定 : 发 酵 试 验 , 葡 萄 糖 ( + ) , 乳 糖 +) , ( 作 者 单 位 : 四川省医学科学院?四川省人民医院皮肤病性病研究所中 麦芽糖 ( - ) , 蔗糖 ( - ) , 22?及普通琼脂不生长, 可鉴 ( - ) , 心实验室, 成都, 610031 定为淋球菌阳性结果。 1.4.2 临床菌株分离阳性率比较 将采集的疑似淋病患者标本 本实验中, 新型淋球菌培养基检出阳性病例 329 人, 检出 置烛缸内, 点燃蜡烛, 盖密 373 例分别接种于两种培养基上, 率 88.2%; T- M 培养 基 检 出 阳 性 病 例 323 人 , 检 出 率 86.6% 。 见 1。 缸盖, 置培养箱内 35?,36?培养 24,28 h, 观察结果。 保存效期比较将淋球菌菌株 10 株接种于不同保存期 1.4.3 新型淋球菌培养基上, 置烛缸内, 点燃蜡烛, 盖密缸盖, 置培 观察结果。养箱内 35?,36?培养 24 h, 统计学分析1.5 2 采用 χ检验分析。 结 果 2 临床菌株分离阳性率比较 2.1 2.2 保存效期比较 近失效, 因为有效期只有 3 个月。这对于标本少的基层医院而 言, 必然意味着培养基利用效率不高, 浪费严重。如采用自己 配实验表明, 在 24 周时间内, 不同保存时间培养基上淋球 制的办法, 由于培养基配制过程繁琐, 不易质量控制, 不为 临床菌菌落数及菌落大小差异无统计学意义。见表 2。 所接受。而本实验结果表明, 采用该包装的新型淋球菌培 养基 3 讨 论在 4?条件下保存 6 个月后, 其培养效果仍同新配制的培 养淋球菌培养是诊断淋病的主要依据。常用 T- M 培养基由 基无差异 ( P，0.05) 。因此, 我们认为, 新型淋球菌培养基 于价格因素、效期等因素而不适用于人数较多的群体和基层检 保存期可以长达 6 个月。这对促进中小医疗单位采用培养法诊 测 , 需 制 作 简 单 、 成 本 低 、 原 材 料 易 得 和 培 养 效 果 好 的 培 养 断淋病起到积极作用。总之, 新型淋球菌培养基具有经济、简 基。本研究采用的新型淋球菌培养基系我院中心实验室自制 , 便、培养性能高等优点, 可以替代进口的 T- M 培养基在基层 成 本 低 、 原 材 料 易 获 得 。 在 本 实 验 中 就 其 培 养 性 能 同 常 用 的 医疗单位推广应用。 T- M 培养基进行了比较。在新型淋球菌培养基上, 淋球菌生长 良好, 24 h 培 养 可 见 中 小 菌 落 生 长 , 其 检 出 淋 球 菌 阳 性 率 为 88.2%, 与 T- M 培养基比较差异无统计学意义 ( P，0.05) , 表 明新型淋球菌培养基在培养性能方面可替代进口的 T- M 培养基。 参 考 文 献 : 此外, 培养法诊断淋病对淋病诊治单位而言, 必然带来淋 . PCR 法检测淋球菌的探讨 [ J] . 中华临床医学研究杂志, 丛佩青[ 1 ] 球菌培养基的储备问题。目前, 我国的淋病诊治单位包括了基 2007, 13 ( 4) : 552- 552. 础 医 院 、 诊 所 以 及 大 型 医 院 等 。 他 们 彼 此 的 淋 病 标 本 多 少 不 任万明, 高军. 两种检测淋球菌的方法比较 [ J] .中国现代实用医 2 ] [ 等, 相差很大。但是, 如前所述, 进口培养基价格较贵, 每人 份的学杂志, 2004, 3 ( 5) : 68- 69. 成本价在人民币 10 元左右, 即使是珠海进口分装的 MTM 选择张宁, 吴承龙. LB 和桂敏培养基分离培养淋球菌比较研究[ J] .贵 培养基也要 8 元 / 个; 且多采用大包装; 同时因受培养基 有效[ 3 ] 期和货物运输周期的影响, 从进口到用户手上, 一般都接 2000, 25 ( 4) : 411- 411. 阳医学院学报, ( 收 稿 日 期 : 2007- 10- 10) , apoptosis and differentiation [ J] . Nat Rev Immunol, proliferation( 上接第 2743 页) [ 2 ] Mllüer- Ladner U, Pap T, Gay RE, Neidhart M, Gay S. Mecha- 2005, 5 ( 9) : 688- 698. nisms of disease: the molecular and cellular basis of joint destruc- Li J, Shen W, Kong K, Liu Z. IL- 21 induces T cell activation [ 6 ] tion in rheumatoid arthritis [ J] . Nat Clin Pract Rhuematol, and proinflammatory cytokine secretion in rheumatoid arthritis [ J] . 2005, 1 ( 2) : 102- 110. Scand J Immunol, 2006, 64 ( 5) : 515- 522. 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