玄驹片中黑蚂蚁提取工艺的研究

玄驹片中黑蚂蚁提取工艺的研究 玄驹片中黑蚂蚁提取工艺的研究 1 1 1 黎 明,雷震鸣,蒋 林,谭珍媛 2 ()1 . 广西中医学院制药厂 ,广西 南宁 530023 ;2 . 广西中医学院 ,广西 南宁 530001 4 () 摘 要 : [ 目的 ]优选玄驹片中黑蚂蚁最佳提取工艺 。[ 方法 ]采用 L3正交试验 ,以蚂蚁膏得率和游离氨基酸的含量作 9 为评价指标 ,对玄驹片中黑蚂蚁的渗漉工艺进行研究 。[ 结果 ]最佳提取条件为 :用 40 %乙醇浸泡 24 h 后 ,以 4 ml/ min 的速度 渗漉 ,浓缩后用 60 ?的温度干燥 。[ 结论 ] 此提取工艺稳定 、经济 、合理 ,适合工业生产 。 关键词 :黑蚂蚁 ;玄驹片 ;正交设计 ;提取工艺 中图分类号 : R284 . 2 文献标识码 :A 文章编号 :1008 - 7486 (2009) 02 - 0050 - 03 Black ant Extract ion Process in Xu a nj u Ta blet 1 1 1 2L I Ming,L E I Zhen2ming,J IAN G Lin, TAN Zhen2yuan (1 . Phar maceutical Facto ry of Gu a n g x i Traditio nal Chinese Medical U niversity , N a n ni n g , Gu a n g x i , 530023 ; )2 . Gu a n g x i Traditio nal Chinese Medical U niversity , N a n ni n g , Gu a n g x i ,530001 4 ( ) Abstract :Ob jetive To o p timize black ant ext ractio n p rocess in X u anj u tablet . Met hods The L 3ort hogo nal test was 9 used , and t he f ree amino co ntent was tested as evaluatio n index to st udy t he black ant ext ractio n p rocess in X u anj u tablet . Result s Op timum ext ractio n co nditio ns : t he sil ky ant soaked wit h 40 % alco hol 24 h ; and 4ml/ min to diacolatio n , af ter co ncent rating , dried under t he temperat ure of 60 ?. Co nclusio ns The result show t hat t his o p timum ext ractio n p rocess co nditio n was stable , reaso nable and eco no mical , which could be used in indust rialized p roductio n. Key words :Black ant ; X u anJ u tablet ; Ort hogo nal test ; Ext ractio n p rocess 玄驹片是由黑蚂蚁加工制成的浸膏片 ,有滋补肝肾 ,通 2 方法与结果 1 痹止痛的作用 ,主要用于肝肾不足 ,风湿痹痛 ,腰膝 痛 ,类 2 . 1 游离氨基酸含量测定 参 照 2005 版 药 典 氮 测 定 法风湿关节炎 。据报道 ,大黑蚂蚁乙醇提取液能明显增强小鼠 () 测定 中国药典 2005 年版一部附录 IX L 第一法。取黑蚂 1 () 蚁浸膏适量 约相当于含氮量 25,30 mg,精密称定 。置于 的细胞免疫功能及单核 - 巨噬细胞吞噬功能,黑蚂蚁不仅 蛋白质含量高 ,且富含 18 种氨基酸和人体所需的维生素和 500 ml 凯氏烧瓶中 ;然后依次加入硫酸钾 10 g 和硫酸铜粉末 2 微量元素。现行玄驹片质量主要通过氮测定法测定 015 g ,再沿瓶壁缓缓加入 20 ml 硫酸 ; 在凯氏烧瓶口放一小 黑蚂蚁中所含氨基酸的量 ,从而对成品的质量进行控制 。但 漏斗并使凯氏烧瓶成 45?斜置 ,用直火缓缓加热 ,使溶液的温 按现有的提取方法 ,黑蚂蚁中所含蛋白质 、氨基酸的提取率 度保持在沸点以下 ,等泡沸停止 ,强热至沸腾 ,待溶液成澄明 比较低 ,且对蛋白质 、氨基酸等成分破坏较大 ,成品中氨基酸 的绿色后 ,继续加热 30 min ,放冷 。沿瓶壁缓缓加水 250ml , 的含量很不稳定 ,给质量控制带来很大困难 。为保证玄驹片 振摇使混合 。放冷后 ,加 40 %氢氧化钠溶液 75 ml ,使其沿壁 的质量稳定 ,节约生产成本 ,笔者采用正交设计法进行试验 , 流至瓶底 ,自成一液层 ,加锌粒数粒 。用氮气球将凯氏烧瓶 对玄驹片中黑蚂蚁提取工艺进行优选 ,确定玄驹片中黑蚂蚁 与冷凝管连接 ; 另取 2 %硼酸溶液 50 ml ,置 500 ml 锥形瓶 的最佳提取工艺 。 中 ,加甲基红 - 溴甲酚绿混合指示液 10 滴 ; 将冷凝管的下端 1 材料与仪器 插入硼酸溶液的液面下 ,轻轻摆动凯氏烧瓶 ,使溶液混合均 1 . 1 药材 黑蚂 蚁 , 由 南 宁 市 医 药 公 司 提 供 , 经 检 验 符 合 匀 ,加热蒸馏 ,至接收液的总体积约 250 ml 时 ,将冷凝管尖端 《广西中药材标准》1990 版标准 。 提出液面 ,使蒸气冲洗约 1 min ,用水淋洗尖端后停止蒸馏 ; 馏出液用硫酸滴定液 ( 0105 mol/ L ) 滴定至溶液由蓝绿色变 ( ) 1 . 2 仪器AM100 电 子 分 析 天 平 梅 特 勒 公 司 。 梅特 勒 为灰紫色 ,并将滴定液的结果用空白试验校正 。 1 . 3 试剂 所用试剂均为分析纯 。 2 . 2 渗漉工艺的优选 称取黑蚂蚁药材 9 份 ,每份 50 g ,以 收稿日期 :2008 - 08 - 31 ( )基金项目 :广西中医学院普通课题 P2006024 2009 年 第 12 卷 第 2 期广西中医学院学报 ?51 ? 浸泡时间 、渗漉速度 、乙醇浓度 、干燥温度为因素 ,每个因素 1 试验因素水平 表 选取 3 个水平 ,试验因素表见表 1 ,同等条件下重复做 2 次实 因素浸泡时间 渗漉速度 乙醇浓度 干燥温度 ( ) ( ) ( ) ( ) 水平hA ml/ minB %C ?D 验 。以黑蚂蚁浸膏得率和游离氨基酸的含量为考核指标 ,按 4 1 6 5 40 60 () L 3正交表进行浸泡提取 ,结果见表 2 、表 3 。 9 2 12 4 55 70 ( )干浸膏重 g ( ) ×100 %蚂蚁膏得率 %= 3 24 3 70 80 ( )黑蚂蚁投料量 g ( )氨基酸含量 g ( ) ×100 %游离氨基酸含量 %= ( )干浸膏重 g 表 2 正交试验安排与结果 ( )( )蚂蚁膏得膏率 % 游离氨基酸含量 % 因素 A B C D 组号 X X Y Y ?X?Y 1 2 1 2 1 1 1 1 1 21 . 57 23 . 11 44 . 68 40 . 79 39 . 47 80 . 26 2 1 2 2 2 23 . 90 24 . 91 48 . 81 34 . 03 35 . 16 69 . 19 3 1 3 3 3 13 . 53 12 . 46 25 . 99 26 . 74 25 . 34 52 . 08 4 2 1 2 3 14 . 83 16 . 14 30 . 97 29 . 45 28 . 21 57 . 66 5 2 2 3 1 26 . 03 27 . 33 53 . 36 42 . 41 43 . 21 85 . 62 6 2 3 1 2 28 . 33 30 . 57 58 . 90 35 . 16 36 . 55 71 . 71 7 3 1 3 2 17 . 87 16 . 19 34 . 06 38 . 22 37 . 41 75 . 63 8 3 2 1 3 25 . 37 22 . 63 48 . 00 31 . 27 32 . 45 63 . 72 9 3 3 2 1 29 . 47 31 . 94 61 . 41 47 . 17 46 . 24 93 . 41 浸 K 1119 . 48 109 . 71 151 . 58 159 . 45 膏 K 2143 . 23 150 . 17 141 . 19 141 . 77 得 率 K 3143 . 47 146 . 30 113 . 41 104 . 96 R 23 . 99 40 . 46 38 . 07 54 . 49 游酸 K 201 . 53 213 . 55 215 . 69 259 . 29 1离含 K 2214 . 99 218 . 53 220 . 26 216 . 53 氨量 基 K 3232 . 76 217 . 20 213 . 33 173 . 46 R 31 . 23 4 . 98 6 . 93 82 . 83 D > B > C > A ; 方差分析结果表明 ,工艺的因素作用主次为 表 3 得膏率方差分析表 ( ) A 、B 、C 、D 因素对渗漉工艺均有显著性影响 P < 0101。以 离均差 F 值显著性方差来源自由度方差 平方和 游离氨基酸含量为考察指标 ,表 2 极差 R 大小显示 ,影响渗 63 . 3133 2 31 . 6567 19 . 39 < 0 . 01 A 漉工艺的因素 作 用 主 次 为 D > A > C > B ; 方 差 分 析 结 果 表 B 2 83 . 0782 50 . 88 < 0 . 01 166. 1565 ( ) 明 ,因素 A 、D 对渗漉工艺有显著性影响 P < 0101,B 、C 因 C 129. 8127 2 64 . 9064 39 . 75 < 0 . 01 ( ) 素对渗漉工艺无显著性影响 P > 0105。综合考虑节约成本 D 257. 5955 2 128 . 7977 78 . 88 < 0 . 01 和生产中的实际需要 ,本方最佳提取工艺为 : A B C D ,即黑 3 2 1 1 误差 SSe2 9 1 . 6328 14 . 6956 蚂蚁用 40 %乙醇浸泡 24 h 后 ,以 4 ml/ min 的速度渗漉 ,浓缩 (2 ,9) (2 ,9) 注 : F= 4 . 26 , F= 8 . 02 0. 05 0. 01 后在 60 ?的温度下烤干 。 表 4 氨基酸含量方差分析表 3 讨 论 玄 驹 片 方 中 黑 蚂 蚁 的 主 要 成 分 为 蛋 白 质 , 其 含 量 为 离均差 方差来源自由度方差F 值显著性 平方和 46 . 8 % ,富含 18 种氨基酸 ,且人体必需的 8 种氨基酸种类齐 A 81 . 7921 2 40 . 8960 61 . 33 < 0 . 01 3。因此 ,本实验选用游离氨基酸含量测定作为成品的定全 B 2 . 2162 2 1 . 1081 1 . 66 量检测是合理的 。另外 ,选择黑蚂蚁浸膏得率 ,来评价黑蚂 C 4 . 1377 2 2 . 0388 3 . 10 蚁提取工艺的优劣也是较为客观 、合理的 ,具有较高的实用 2 306 . 9509 < 0 . 01 D 613. 9017 460 . 33 误差 SSe2 6 . 0012 性 。 9 0 . 6668 本试验在基于原生产工艺的前提下 ,通过正交试验法筛 (2 ,9) (2 ,9) 注 : F= 4 . 26 , F= 8 . 02 0. 05 0. 01 选了黑蚂蚁的最佳提取工艺条件 ,最终目的是为了使产品更 以得膏率为考察指标 ,表 2 极差 R 大小显示 ,影响渗漉 4 稳定和节约生产成本 。单卫华等报道蚂蚁制成胶囊及片 Journal of Guangxi Traditio nal Chinese Medical U niversity 2009 ,Vol112 No12 ?52 ? 剂等固体剂型时 ,采用水提取工艺游离氨基酸含量及提取浸375 . 宋悦华 ,赵 琳 . 不同溶剂浸泡大黑蚂蚁后蛋白质和 p H 2 膏得率较高 。下一步 ,笔者将会对该报道方法进行考察 ,并 值测定结果 J . 广西预防医学 ,1997 ,3 (4) :238 . 对相关项目作进一步的试验 ,为黑蚂蚁的开发利用做好基础 解国梁 , 刘敏捷 , 云吉应 . 拟黑多刺 蚂 蚁 营 养 成 分 分 析 3 研究 。 J . 中国公共卫生 ,1997 ,13 (2) :99 - 100 . 单卫华 , 梁瑞雪 , 尚立霞 ,等 . 黑蚂蚁提取工艺研究 J . 4 参考文献 中药新药与临床药理 ,2002 ,13 (2) :116 . 1 胡建文 , 吴小南 , 汪家梨 ,等 . 大黑蚂蚁提取液对小鼠免 ( ) (编辑 陈明伟) 疫功 能 的 影 响 J . 现 代 预 防 医 学 , 2002 , 29 3 : 373 - 复方扶芳藤合剂醇沉工艺合理性考察 1 1 2 1 姚 蓉,冯 军,覃洁萍,王丽丽,许晨1霞 ()1 . 广西中医学院在读研究生 ,广西 南宁 530001 ;2 . 广西中医学院 ,广西 南宁 530001 摘 要 : [ 目的 ]考察复方扶芳藤合剂现有水提醇沉工艺的合理性 。[ 方法 ] 选用 HPL C 法 ,以卫矛醇为评价指标 ,分别测 定醇沉后滤液和药渣中卫矛醇的含量 。[ 结果 ]醇沉后滤液中卫矛醇含量比药渣中的卫矛醇含量高 ,但药渣中卫矛醇含量仍 占两部分总量的 2213 %,3216 % 。[ 结论 ] 为减少卫矛醇的损失 ,水提醇沉工艺需进一步优化 。 关键词 :复方扶芳藤合剂 ;卫矛醇 ;提取工艺 () 中图分类号 : R28411 文献标识码 :A 文章编号 :1008 - 7486 200902 - 0052 - 03 Rat ional ity2exa minat ion of Alcohol Prec ipitat ion Technol ogy of F uf a ng F uf a ngteng Mixture 1 1 2 1 1YAO Ro ng, F EN G J un, Q IN J ie2ping,WAN G Li2li, XU Chen2xia (1 . Po st graduate st udent of Gu a n g x i Traditio nal Chinese Medical U niversity , N a n ni n g , Gu a n g x i , 530001 ; )2 . Gu a n g x i Traditio nal Chinese Medical U niversity , N a n ni n g , Gu a n g x i , 530001 Abstract :Ob jetive To test t he ratio nalit y of water ext ractio n and alco hol p recipitatio n technology of Fuf an g Fuf an gteng Mix2 t ure. Met hods HPL C was ado p ted and dulcitol was used as evaluatio n index to test t he co ntent of dulcitol in filt rate and dregs. Result s The co ntent of dulcitol in filt rate was hi gher t han t hat in dregs , but t he co ntent of dulcitol in dregs occupied 2213 %, 3216 % of t he total . Co nclusio n In order to decrease t he loss of dulcitol , t he water ext ractio n and alco hol p recipitatio n technology of Fuf an g Fuf an gteng Mixt ure must be op timized. Key words : Fuf an g Fuf an gten g Mixt ure ; Dulcitol ; Ext ractio n technology 复方扶芳藤合剂由红参 、黄芪 、扶芳藤等补益中药组成 ,,以卫矛醇含量为指标 ,分别测的水提醇沉工艺进行了考察 具益气补血 、健脾养心等功效 ,用于气血不足 、心脾两虚 ,症 定了醇沉后在滤液和药渣中卫矛醇的含量 ,以考察其水提醇 1 见气短胸闷 、少气懒言 、神疲乏力等症沉工艺的合理性 。 。扶芳藤为方中君 1 仪器与试药 药 ,现代药理研究表明 ,中药扶芳藤的水提液和醇提液具有 2 25 111 仪器 Agilent 1100 Series 高效液相色谱仪 ,含在线真 抗菌 、预防血栓形成 、止血 、镇静 、提高机体免疫等作用。 ( ( ) ) 空脱气机 G21322A、高压四元梯度泵 G21311A、标准自动 卫矛醇是扶芳藤的主要有效成分之一 ,为使该方更好地发挥 ( ( ) ) 进样器 G21313A、智能化柱温箱 G21316A; 检测器为 PL2 疗效 ,最大限度地保留有效成分 ,本实验对复方扶芳藤合剂 收稿日期 :2009 - 02 - 27 ()基金项目 :广西科学研究与技术开发计划项目 桂科攻 0992003A - 10 () 通讯作者 :覃洁萍 1962 - ,女 ,教授 ,广西南宁市人 ,主要从事中药分析与质量控制研究