凉血解毒汤合达那唑对热毒型再障骨髓CD34^＋细胞增殖的影响

凉血解毒汤合达那唑对热毒型再障骨髓CD34^＋细胞增殖的影响 凉血解毒汤合达那唑对热毒型再障骨髓 CD34^，细胞增殖的影响 江西中医学院20O8年lO月第20卷第5期 JoURNALoFJiANGXlUNlvERSlTyoFTCM2OO8d.2qo.5 凉血解毒汤合达那唑对热毒型再障骨髓CD34+细胞 增殖的影响 ?王沁周红王寒(1.广东省中医院珠海医院珠海519015;2.广东省中医院广州5l0015;3.广 州中医药大学2008届硕士研究生广州5loo00) 摘要:目的:为了探讨凉血解毒汤对热毒型再障骨髓cD34细胞增殖作用.方法:通过临床随机对照研究,验证凉血解毒汤对 热毒型再障治疗前后临床疗效,I临床症状积分变化,骨髓cD34细胞数量和CD34细胞扩增倍率变化.结果:凉血解毒汤组 治疗热毒型再障的总有效率,症状平均积分,血象变化,骨髓增生度的变化与对照组比较有明显的统计学意义;对照组中有1 患者出现转氨酶轻度升高,凉血解毒汤组未发现不良反应;骨髓cD34细胞相对计数,cD34细胞扩增倍率变化比较凉血解 毒汤组升高较对照组明显.结论:凉血解毒汤联合达那唑可影响骨髓造血功能. 关键词:凉血解毒汤;再障;CD34细胞 中图分类号:R246.5文献标识码:A 再生障碍性贫血(简称再障)是一类由T淋巴 细胞功能亢进介导的造血功能衰竭性的自身免疫性 疾病,以全血细胞减少为主要现的一组疾病.近 年来,随着慢性再障基础和临床的研究进展,人们认 识到慢性再障因造血干细胞衰竭,免疫介导的造血 干细胞损伤及造血微环境的缺陷等因素引发的一类 疾病,但多数学者认为造血干细胞数量减少系再障 的发病基础.我们通过观察全国名老中医梁冰教授 经验方凉血解毒汤治疗热毒型再障患者的临床疗 效,临床症状积分,血象,骨髓增生程度,骨髓 CD34细胞的相对计数变化,了解凉血解毒汤对热 毒型再障造血能力的影响.现将研究结果如 下. l临床资料 1.1研究对象研究对象选自广东省中医院和广 东省中医院珠海医院血液科2o05年2月,2o08年 6月期间收治的住院及门诊再障患者,总计30例, 按随机数字表法分为治疗组20例,对照组10例. 1.2诊断…再障的诊断标准J:参照张之 南主编《血液病诊断及疗效标准》(第二版). 1.3纳入标准(1)具备任何2个以上(包括2 个)症状者:发热,出血,咽痛,口干多饮,大便于结, 小便黄短,舌红,苔黄,脉数.(2)年龄13周岁以 上,且愿意配合进行本研究.(3)非病情危笃的晚 期患者.(4)坚持治疗者. 1.4排除标准(1)具备任何2个以上(包括2 个)症状者:畏寒,四肢不温,大便稀溏,小便清长, 夜尿多,口淡乏味,舌淡,苔白,脉缓或沉迟.(2)同 时合并其他疾病者,如阵发性睡眠性血红蛋白尿,急 慢性白血病,骨髓增生异常综合征等.(3)治疗过 程中转化为上述诸病症者.(4)已接受抗胸腺细胞 球蛋白,抗淋巴细胞球蛋白等免疫抑制剂治疗者. (5)对试验药物有过敏史,或伴有严重心,肺,肝,肾 疾病者.(6)妊娠或哺乳期妇女.(7)患者依从性 差,未按规定用药,或疗程中加用治疗该病症的其它 药物及方法.(8)中途退出或失访者,但必须详细 记录原因.(9)治疗过程中发生严重不良事件,发 生并发症或原发病加重不宜继续接受试验者. 2研究方法 治疗组采用凉血解毒汤(羚羊角粉3g,牡丹皮 10g,生地黄20g,赤芍20g,茜草20g,黄芩l0g,板 蓝根15g,贯众15g,天门冬15g,熟地黄20g,黄柏 10g,苍耳子10g,辛夷1Og,三七粉3生龙牡各 3Og等)达那唑0.2g,每天3次. ? 4O? 对照组采用单用达那唑,0.2g,每天3次.治 疗组和对照组均接受常规支持疗法,均连续服药3 个月以上评价临床疗效,临床症状积分,骨髓 CD34细胞数量,CD34细胞扩增倍率. 3观察指标 3.1临床疗效判断标准治疗3个月以上并随访, 按l987年中华血液学会第四届全国再生障碍性贫 血学术会议制定的标准评定,分基本治愈,缓解,明 显进步,无效. 3.2临床症状积分治疗3个月以上并随访,由临 床医师在治疗前后对患者的症状记分.其标准如 下:1分(无出血;登楼或体力劳动后出现心慌气短; 易疲倦,可坚持轻体力劳动;偶有头晕;口唇泛白;偶 见手足心热;食欲差,食量减少1/2以下).2分(无 出血;行路或一般体力劳动后出现心慌气短;倦怠较 甚,勉强支持日常劳动;经常头晕,活动后明显;口唇 泛白无华;手足心热,不欲衣被;食欲差,食量减少 l/2,2/3).3分(有出血;静息时出现心慌气短;四 肢无力,不能坚持日常活动;频繁头晕,静息时也发 作;口唇苍白;手欲握冷物则舒;无食欲,食量减少 2/3以上). 3.3骨髓CD34细胞数量治疗前和治疗3个月 后分别采集所有研究对象骨髓3,5ml,用肝素抗 凝,单核细胞分离液(相对密度1.077)梯度离心25 min,收集界面层单个核细胞(MNc),经PBS洗涤3 次后,用免疫磁珠法从M(:怂液IfJ进行分离和纯化 阳性CD34细胞(抗(:1)34川眦l抗HPCA一2为 北京基因公司产品,操按UJI;进行),经流式细 胞仪检测,CD34细胞计数}‰{1染的细胞总数. 3.4骨髓cD34细胞体外扩增倍率经流式细胞 仪检测,分离的cD34细胞,对CD34细胞体外增 殖分别取培养24,48和72h的骨髓cD34细胞计 数台盼蓝拒染的细胞总数和用流式细胞仪测定 CD34细胞百分比并据此计算CD34细胞的扩增 倍率. 4统计学分析 计数资料采用x检验;计量资料采用单因素方 差分析及检验;等级资料比较采用Ridit分析.均 以面?s(均数?标准差)表示. 5治疗结果 5.1总疗效比较治疗组19例,基本治愈5例,缓 解7例,明显进步3例,无效4例,总有效率 79.OO%;对照组l1例,相应为2,2,2,4例, 6O.00%.经Ridit分析,两组间有差异,说明治疗组 与对照组疗效比较有统计学意义. 王沁等:凉血解毒汤合达那唑 对热毒型再障骨髓cD34细胞增殖的整堕 5.2症状平均积分比较见表1. 表1两组症状平均积分比较 由表2可见,治疗前治疗组与对照组相比无显 着性差异.治疗后,治疗组,对照组均较治疗前有非 常显着性差异(P<0.01);治疗组与对照组相比有 非常显着性差异(P<0.O1). 5.3血象变化比较见表2. 表2两组血象变化比较 由表2可见,两组患者外周血wBC,Hb,P治 疗后明显升高,与治疗前比较有显着性差异(P<0. 01). 5.4骨髓增生度的变化比较见表3. 表3两组骨髓增生度的变化比较 由表3可见,经x检验,两组治疗后骨髓增生 情况较治疗前改善,治疗组有非常显着性差异(P< 0.01). 5.5骨髓CD34细胞相对计数变化见表4. 表4两组骨髓CD34细胞相对计数变化 由表4可见,治疗后,治疗组,对照组均较治疗 前有进步,但治疗组进步明显(P<O.O1). 5.6骨髓CD34细胞体外扩增倍率比较见表5. 表5两组骨髓cD34细胞体外扩增倍率比较 注:P<O.05.$P<O.01. 由表5可见,培养24,48和72h的骨髓CD34 细胞体外扩增倍率均随作用时间延长而有升高,但 ? 41? 江西中医学院2008年第20卷第5期 治疗组升高较明显(P<0.01). 5.7安全性指标结果分析对两组的安全性指 进行统计学处理,结果对照组中有1位患者出现 氨酶轻度升高,加用保肝药后,肝功能恢复正常, 本没有影响再障的治疗.治疗组未发现不良反应 6讨论 再障是以骨髓造血功能衰竭为特征,以血细 减少为主要表现的一组疾病.造血干细胞数量减 和功能异常系再障的发病基础.cD34细胞主要 达于早期造血干细胞,祖细胞,可能在造血干细雕 祖细胞于骨髓的粘附和归巢过程中起作用 sc0pes等报道再障患者骨髓cD34细胞较正 显着减少.Manz等用流式细胞仪测定接受抗' 巴细胞球蛋白(ATG)治疗后造血仍持续异常的 患者CD34细胞,结果表明所有再障患者的CD3 CD38一早期造血细胞几乎完全消失. l中医对再障的诊治或从毒论治,或从虚论从毒论治者认为该病乃因热毒致虚,致 病.系热. l置内陷,灼血阻络,伤精耗髓,致精髓枯竭,血生乏溺 I露如韩氏认为急性再障病因乃外感毒邪,毒邪入伤髓,造成髓不生血.在治疗上提 出以驱毒为主, : 邪驱除,髓无所害,才能恢复骨髓化生精血之功饿 I l梁氏将急性再障贫血归属于"急性血劳"范畴,:iI 驯搬两刑.蛊执黯枯刑木刑用干舌症直f 的感染,治宜清热解毒,凉血救阴,少佐益气养血,施 以清瘟败毒饮加减,益气用西洋参或太子参;?阴亏 髓枯,阴不敛阳,迫血外溢型,见于急性再障贫血严 重,且以出血为主,治宜镇阴潜阳,清肝止血,施以苍 玉潜龙汤加减. 梁冰为国家第二,三,四批名老中医,潜心钻研 中医药治疗血液病近40载,独创凉血解毒法施予热 毒型再障治疗,屡获佳效.对于再障之病因,梁老认 为该病乃因外感温热邪毒,内陷营血,侵及骨髓所 致,全身造血组织迅速而广泛地遭到破坏,呈现造血 之源肾髓急性枯竭,即为急劳髓枯之证.以苍耳子 散疏散风热邪毒,犀角地黄汤清热凉血,三才封髓丹 加味补.肾降火,三方加味施治以凉血止血,散风清 热,滋阴补肾,组成了独具特色的凉血解毒汤,乃扶 正祛邪,标本兼治的新法,与传统的一味温补.阳, 滋补肾阴之观念截然不同. 本研究采用随机对照的临床研究方法,在热毒 型再障治疗中应用凉血解毒汤,客观评价该中药复 方辨证治疗再障的临床疗效,临床症状积分,cD34 细胞数量和cD34细胞扩增倍率的影响,有助于了 解该中药复方是否有促进热毒型再障患者骨髓造血 的作用,有助于系统整理梁冰教授中医治疗血液病 的临床经验具有实际的指导价值.研究结果显示凉 血解毒汤组治疗热毒型再障的总有效率,症状平均 积分比较,血象变化比较,骨髓增生度的变化比较, 与对照组比较有明显的统计学意义;两组患者的安 全性指标进行统计学处理,结果对照组中有l位患 者出现转氨酶轻度升高,加用保肝药后,肝功恢复正 常,基本没有影响再障的治疗,凉血解毒汤组患者未 发现不良反应;丽组骨髓cD34细胞相对计数的比 较,凉血解毒汤组与对照组均较治疗前有进步,但凉 血解毒汤组进步明显(尸<0.01);cD34细胞扩增 倍率变化比较治疗组升高较对照组明显.研究结果 表明,凉血解毒汤联合达那唑或达那唑治疗再障患 者均可影响骨髓造血功能,但综合分析,凉血解毒汤 联合达那唑治疗热毒型再障疗效更佳,副作用相对 较少.通过该课题的研究,客观地验证了凉血解毒 汤对热毒型再障治疗效果,为临床广泛使用凉血解 毒汤治疗热毒型再障提供了依据;为临床治疗热毒 型再障提供新策略;为发掘和继承全国名老中医临 床经验提供一个有效的尝试. 参考文献 [1]张之南,沈悌.血液病诊断及疗效标准[M].第2版.北京:科学 技术出版,1998.33—38.4. 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