药学论文-龙血竭胶囊中龙血素B的含量测定及比较

药学论文-龙血竭胶囊中龙血素B的含量测定及比较 【关键词】 龙血竭胶囊;,,龙血素B;,,高效液相色谱法 摘要:目的用HPLC法测定龙血竭胶囊中龙血素B的含量,简化前处理,并 对市售不同品牌的龙血竭胶囊中龙血素B的含量进行比较。方法选用色谱柱 Eclipse XDB-C18(5 μm,4.6 mm×150 mm,Agilent) ,乙腈0.4%磷酸溶液:35? ?,检测波长275 nm。结果龙血素B65:为流动相,流速为1 ml/min,柱温30 在6.2,31.5 μg/ml范围内与峰面积线性关系良好:r=0.999 99,n=5:,龙血 素B的加样回收率99.66%:RSD=1.48%:。 结论该方法简便,准确,可靠,便 于日常生产时制剂的含量控制,且市售中不同品牌的龙血竭胶囊中龙血素B的含 量均符合国家标准:不低于0.6 mg/粒:。 关键词:龙血竭胶囊; 龙血素B; 高效液相色谱法 Abstract:ObjectiveTo establish an HPLC method for determination of Loureirin B in dragon blood capsules, and make a comparison of loureirin B in dragon blood capsules of different brands.MethodsThe chromatographic column of Eclipse XDB-C18 was used. The mobile phase was composed of acetonitrile-0.4% phosphoric acid(35?64) and the flow rate was 1 ml/min. The detection wavelength was 275 nm.ResultsThe standard curve of Loureirin B was linear in the concentration range of 6.2~31.5 μg/ml, r=0.999 99. The average recovery was 99.66%,RSD 1.48%.ConclusionThe method was simple and reliable for determination of Loureirin B. The content of Loureirin B in dragon blood capsules of different brands all matched a national standard. Key words:Dragon's blood capsules; Loureirin B; HPLC “龙血竭”系百合科龙血树属植物剑叶龙血树Dracaenacochinchinensis (Lour.) S.C.Chen的含脂木材经提取得到的树脂,具有活血散淤、定痛止血、敛疮生肌等功效,用于跌打损伤,淤血作痛,妇女气血凝滞,外伤出血,臁疮久不收口,1,。特别是在外科跌打损伤方面有比较肯定的疗效,但在临床上一直把它作为一种配方辅佐。现已研究出单方的龙血竭胶囊,在临床上口服用于治疗复发性口腔溃疡、软组织挫伤、月经过多,子宫肌瘤,急性心肌梗塞等均有较好的疗效。龙血竭中主要成分为龙血素A:loureirin A:、龙血素B:loureirin B:,但由于极性相似,不易分离,而文献中大多报道的方法是用于测定龙血竭原料药的,因此在用于制剂时效果均不好,且前处理方法都比较繁琐。本实验运用HPLC法测定龙血竭胶囊中龙血素B的含量,并对市售不同品牌的产品中龙血素B的含量进行了比较。现将结果报道如下。 1 仪器与试药 Agilent 1100高效液相色谱仪,龙血素B对照品:111558200303,供含量测定用,中国药品生物制品检定所:,“云杉”龙血竭胶囊:云南云河药业有限公司:,“柬龙”龙血竭胶囊:中国医学科学院版纳名盛制药厂:,“三金”龙血竭胶囊:南宁三金制药有限责任公司:。乙腈为色谱醇;其它试剂均为纯;水为纯净水。 2 方法 2.1 色谱条件色谱柱Eclipse XDBC18:5 μm,4.6 mm×150 mm,Agilent:,乙腈 0.4%磷酸溶液:35?65:为流动相,流速为1 ml/min,柱温30?,检测波长275 nm。在上述条件下能使龙血素B产生较好分离。理论塔板数以龙血素B峰计算不低于8 000,分离度大于1.5。龙血素B对照品、龙血竭胶囊色谱图见图1,2。 图1 龙血素B对照品图谱:略: 图2 龙血竭胶囊图谱:略: 2.2 对照品溶液制备精密称取龙血素B对照品适量,用甲醇溶解,制成每毫升中含0.124 mg的龙血素B对照品溶液。 2.3 供试品溶液的制备取各批号胶囊10粒内容物,置研钵中研匀,精密称取0.1 g于25 ml容瓶中,甲醇超声溶解,定容作为供试品溶液。 3 结果 3.1 线性关系的考察精密量取对照品溶液1,2,3,4,5 ml用甲醇稀释到20 ml,制成每毫升含6.2,12.4, 18.6, 24.8, 31.05 μg的对照品溶液,经微孔滤膜过滤器:0.45 μm:过滤,在上述色谱条件下5 μl进样,记录色谱图,以龙血素B的浓度:μg/ml:为横坐标,峰面积为坐标进行线性回归,得回归方程Y=33.32X-2.18,r=0.999 99 (n=5) 。 3.2 检测限调节对照品浓度,按“色谱条件”测定,进样5 μl,求得最低检测限为3.86 ng/ml。 3.3 精密度取同一样品溶液,重复进样5次,5 μl/次,以龙血素B的峰面积,RSD为1.01%。 3.4 加样回收率实验结果见1。 表1 加样回收实验测定结果:略: 3.5 样品测定结果将供试品溶液经微孔滤膜过滤器:0.45 μm:过滤,按照上述色谱条件测定了不同市售龙血竭胶囊中龙血素B的含量。结果见表2。 4 讨论 龙血素B:4-羟基2,4,6三甲氧基二氢查耳酮:是龙血竭中的主要有效成分,现有的文献报道中大多测定的是药材中龙血素B的含量,2,,在流动相的选择上我们根据报道比较了甲醇水系统,甲醇1%冰醋酸系统,甲醇0.4%磷酸系统;乙腈水系统,3,,乙腈1%冰醋酸系统,4,,乙腈0.4%磷酸系统;色谱柱比较了依利特:C18 5 μm,150 mm×4.6 mm:,迪马:C18 5 μm 250 mm×4.6 mm:,Eclipse XDBC18(5 μm,4.6 mm×150 mm,Agilent),乙腈0.4%磷酸的条件对制剂中龙血素B的分离效果最佳,且本文样品的前处理方法极为简单,便于日常生产时制剂的含量控制。针对市售3种不同品牌的龙血竭胶囊中龙血素B的含量进行了比较,其中龙血素B的含量均符合国家药品标准:不低于0.6 mg/粒:。 表2 样品中龙血素B含量测定结果:略: 参考文献: ,1, 文东旭.龙血竭的研究进展,J,.中草药,2001,32:11::1053. ,2, 孙胜利,宓鹤鸣,娄子洋.反相高效液相色谱法测定国产血竭中龙血素A和B的含量,J,.第二军医大学学报,2002,23:12::1366. ,3, 文东旭,刘伟林,陈 骞,等.反相高效液相色谱法测定龙血竭中剑叶龙血素C的含量,J,.广西科学,2003,10:4::279. ,4, 胡迎庆,宗 宁,刘岱琳.反相高效液相色谱法测定龙血竭中紫檀芪的含量,J,.药物分析杂志,2002,22:6::428.