粘停宁预防外科术后腹腔粘连的实验研究

粘停宁预防外科术后腹腔粘连的实验研究 中国康复理论与实践2006年7月第12卷第7期 ChinJRehabilTheoryPractice,Ju1.2006,Vo1.12,No.7 粘停宁预防外科术后腹腔粘连的实验研究 沈新,李孟彬,王为忠,施海 ? 581? ? 基础研究? [摘要]目的探讨粘停宁预防术后腹腔粘连的作用和机理.成年纯种家兔4O只构建粘连 动物模型,并随机分为盲肠 浆膜缺损组(A1组)和对照组(A2组),腹壁切口组(B1组)和对照组(B2组)共4组,每组1O只. 将粘停宁直接贴敷到A1组和B1 组可能出现粘连的手术部位,分别于术后1周和2周再次剖腹观察腹壁切口,盲肠粘连程度, 并按程度分级,切取标本行HE染色, 显微镜下观察.结果粘连动物模型切实可靠,A1组和B1组的粘连等级和炎症反应程度低于 A2组和B2组(P<O.05).结论 术中应用粘停宁有预防术后腹腔粘连作用. [关键词]外科;粘连;腹膜;粘停宁;术后并发症;家兔 ExperimentalStudyonPreventionofPost-surgicalAbdominalAdhesionsbyMedicalChitinDegradedMembraneSHENXin,LI Meng—bin,W_ANGWei—zhong,eta1.TheDepartmentofGastrointestinalSurgery,XijingHospital,theFourthMilitaryMedical University,Xi’an710033,Shaanxi,China Abstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectsofmedicalchitindegradedmembraneonpost—surgicalab dominaladhesions.Meth— odsFortyadultrabbitsweremadetoformabdominaladhesionsanddividedrandomlyintofourgroupsincludinggroupA1andits controlgroupA2,groupB1anditscontrolgroupsB2with10animalsineachgroup.Medicalchitindegradedmembranewasapplied inthegroupAandgroupBtothesurfacesofthepositionswherewouldbeadhered.Allanimalswerecutthebellyopenagainonthe 7th,14thpostoperativeday;theadhesionsaboutincisionandappendixweregradedaccordingtotheseverity,andtookonbioscopy. ResultsTheabdominaladhesionsmodelwassuccessfu1.TheseverityofadhesionsandinflammatoryreactionofthegroupA1and groupB1wassignificantlymilderthanthatofthegroupA2andgroupB2ineverydifferentperiods(P<0.05).ConclusionThe medicalchitindegradedmembraneusedintraoperative1ymighthavesomeefficacyinpreventingpost—surgicalabdominaladhesions. Keywords:surgery;adhesions;peritoneum;medicalchitindegradedmembrane;postoperativecompli cation;rabbit [中图分类号]R619[文献标识码]A[文章编号]1006—9771(2006)07—0581—02 [本文着录格式]沈新,李孟彬,王为忠,等.粘停宁预防外科术后腹腔粘连的实验研究I-J].中国 康复理论与实践,2006,12 (7):581—582. 术后腹腔粘连是外科腹部手术后的常见并发症,发生率极 高I1].粘连是机体对外来刺激的一种保护性机制,一方面可以 使腹腔炎症局限化,对缺血组织或器官提供侧枝循环和血运, 利于修复;但另一方面,在一定条件下,腹腔粘连可以发展成为 粘连性肠梗阻.目前,大多数研究者认为腹膜愈合的过程如 下:手术后48h在腹膜伤口处形成巨噬细胞层;间皮细胞由相 邻面迁移或由与伤口接触的上皮细胞产生,然后增生;伤口 修复,大约在7d间皮愈合;14,28d纤维蛋白粘连完全成熟. 尽管广大医务工作者已认识到手术操作轻柔,减少出血和异物 存留,避免粗糙创面出现,术后加强活动等可以减轻腹腔粘连, 但从粘连形成的原因看,采用上述方法并不能十分有效地预防 粘连,仍有7O,9O的剖腹探查患者发生腹膜粘连,因而使 用防粘连剂是非常必要的].目前,以壳聚糖及其多种衍生物 为代表的新型可降解吸收的高分子抗粘连剂在临床的应用成 为一大亮点.为探讨粘停宁(医用壳聚糖,可降解防术后粘连 膜)预防术后粘连的机理和效果,本研究以粘停宁为实验材料, 使用家兔粘连动物模型进行实验研究. 1材料与方法 1.1材料成年纯种家兔4O只,雌雄不限,质量2,2.5kg,二 级清洁动物,第四军医大学实验动物中心提供.粘停宁(6×9 cm/片)由烟台万利医用品有限公司生产,批号:40218030424. 作者单位:第四军医大学西京医院胃肠外科,陕西西安市710033. 作者简介:沈新(1978一),男,山东济南市人,硕士研究生,主要研究方向: 移植基础.通讯作者:王为忠. 速眠新(又名846合剂)II注射液,1.5ml/支,由长春军需大学 兽医研究所生产. 1.2方法 1.2.1分组把4O只家兔随机分为盲肠浆膜缺损组(A1组) 和其对照组(A2组),腹壁切口组(B1组)和其对照组(B2组)共 4组,每组1O只. 1.2.2动物准备]全部动物术前均禁食(不禁水)12h,速眠 新?注射液(2ml/kg)肌肉注射麻醉.麻醉后仰卧位固定,剪毛 消毒铺单,无菌操作下取腹正中切口,长约4cm.A组打开腹 腔后找出盲肠,用组织钳取出盲肠,用显微尖镊于肠系膜对侧 沿纵轴方向剥离约5×2cm大小浆膜,B组打开腹腔后用显微 尖镊剥离刀口两侧各约3×0.5cm大小浆膜. 1.2.3处理A1组:将粘停宁(6×2.5cm)贴于盲肠的浆膜缺 失区后,将盲肠放回腹腔,以7号丝线关闭腹腔.A2组:不贴 粘停宁,将盲肠放回腹腔后关腹.B1组:关腹,在仅剩1cm时 向刀口浆膜缺失处贴粘停宁(3.5×1.5cm).B2组:仅关腹不 贴粘停宁.术后动物禁食12h,分笼饲养,饲料为全价营养家 兔颗粒饲料. 1.3观察项目 1.3.1目视判断评分术后第7天和第14天再次打开腹腔, 肉眼观察并评定盲肠盲端经处理过的部位同周围肠管,系膜及 腹壁的粘连情况,在实验期间死亡的家兔也做剖腹检查.沿腹 旁线围绕原切口作一”n”形切口,根据Evans制定的分级标 准[4]对腹腔粘连进行评估,同时拍照结果.0级:无粘连; I级:轻度粘连,易分离;II级:中度粘连,不易分离,但分离时 ? 582?中国康复理论与实践2006年7月第12卷第7期 ChinJRehabilTheoryPractice,Ju1.2006,Vo1.12,No.7 不致撕裂肠管;III级:高度粘连,不能分离,施行分离可撕裂肠 管.’ 1.3.2病理学检查切取粘连处的盲肠组织,生理盐水洗净内 容物后立即用福尔马林固定,常规石蜡切片,苏木精一伊红染色, 光镜下观察局部肠壁的病理改变.根据炎性细胞多少,成纤维 细胞与间质细胞增生程度,有无纤维蛋白存在,间皮细胞与胶 原纤维排列,毛细血管增生等情况,判断粘连程度. 1.4统计学处理应用SPSS13.0统计软件对各组粘连程度 的分级差异进行完全随机设计的多组等级资料比较的秩和检 验. 2结果 2.1一般情况各组家兔麻醉清醒后即可活动,精神,进食良 好,伤口愈合好.术后第4天B2组动物死亡1只,剖腹探查, 死因为广泛肠粘连致绞窄性肠梗阻.术后7d左右部分动物出 现精神萎糜,食欲下降,活动减少等症状. 2.2肉眼观察所有存活家兔皮肤切口均为甲级愈合,术后7 d及14d均未见腹腔内有明显的感染存在,盲肠未见有穿孔, 实验组术后腹腔中未见有明显的粘停宁贴膜残留,B2组粘连最 重,其次为A2,B1组,A1组最轻. 2.3腹膜粘连程度术后第7天和第14天,A1组和B1组的 盲肠和腹壁粘连分级均优于A2组和B2组(P<O.05),见表 1. 表1各组术后7d和14d的粘连分级(n) 组别n 术后7d术后14d I级 1 3 2 O A1组 A2组 B1组 B2组 注:a:与A2组比较,P<0.05;b:与A2组比较,P< 0.01;e:与B2组比较,P<O.05. 2.4病理学检查光镜下,A2组的盲肠和B2组的腹壁术后7 d有大量成纤维细胞和炎性细胞浸润,组织水肿明显;术后14 d,处理侧浆膜面纤维组织增生明显,纤维粘连严重,浆膜层有 淋巴细胞散在浸润;A1组和B1组术后7d无或仅有少许成纤 维细胞和炎性细胞浸润,水肿程度轻微,浆膜面有内皮及上皮 细胞增生;术后14d浆膜面光滑平整,胶原纤维疏松,无纤维粘 连(封三彩图2.1,2.4). 3讨论 腹部手术后粘连发生的机理以损伤炎症学说较流行_5],即 手术创伤,细菌感染,局部血循环障碍,异物存留,温热与干燥 刺激等导致炎性渗出,引起血管通透性增加,纤维蛋白原渗出, 形成纤维蛋白性粘连.正常情况下,浆膜间皮及间皮下血管中 存在纤溶酶原激活因子,能使纤维蛋白的形成和水解处于动态 平衡,以维持浆膜的光滑].当腹部手术或炎症刺激时,炎性 细胞和受伤的间皮细胞产生纤溶酶原激活抑制物,导致纤维蛋 白溶解降低],而成纤维细胞增生,分泌胶原纤维,多种因素造 成永久性纤维粘连. 粘停宁是以壳聚糖为原料制成的薄膜.壳聚糖,也称几丁 聚糖,是一种纯天然高分子多糖体,具有很强的生物亲和性,容 易被消化道,皮肤吸收,能活化免疫细胞,提高人体自身的修复 能力.粘停宁预防术后粘连的机理是:?膜状物敷于手术创伤 面首先对创伤口起到生物屏障作用,由于壳聚糖具有良好的生 物相容性,不易引发炎症反应,不被排斥,随后逐渐降解成液 态物质,随着器官的蠕动而漫布于整个腹腔,起到润滑作用,最 终降解为对人体有益的氨基葡萄糖单体被吸收,无毒副作 用.;?具有选择性促进上皮细胞,内皮细胞增生,抑制成纤维 细胞生长的双重作用?],从而促使组织生理性修复,减少胶原 纤维合成;?具有局部止血作用及抑制血纤维蛋白束形成,减 少因血肿机化而造成的组织粘连”];?具有广谱杀菌和抑菌作 用,对革兰氏阳性菌尤为明显. 本实验结果显示,使用粘停宁的动物术后粘连的程度比未 使用粘停宁的对照组减轻,且光镜观察可见炎症反应轻,浆膜 面有单层间皮细胞,光滑平整,达到生理性修复,表明具有特有 理化性质及生物学特性的粘停宁预防术后腹腔粘连的效果良 好. 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