【doc】不同年龄大鼠血中二甲基精氨酸和降钙素基因相关肽浓度的变化

【doc】不同年龄大鼠血中二甲基精氨酸和降钙素基因相关肽浓度的变化 不同年龄大鼠血中二甲基精氨酸和降钙素 基因相关肽浓度的变化 ? ? 中国实验动物学杂志2000年第10卷第4期 不同年龄大鼠血中二甲基精氨酸和降钙素 基因相关肽浓度的变化 汤百争谭斌鲁蓉李元建z (湖南医科大学动物学部,长沙410078) ? 217 【摘要】检测6月龄和2o月龄大鼠血中二甲基精氨酸和降钙素基因相关肽浓度的变化.结果发现, 2o月龄大鼠血清二甲基精氨酸浓度显着升高,而血浆降钙素基因相关肽浓度无明显变化.提示老龄大鼠 血中二甲基精氨酸浓度升高可能是促进血管内皮功能不全的重要原因. 【关键词】年龄;内皮功能不全;二甲基精氨酸;降钙素基因相关肽 EffectofAgeontheBloodContentofCalcitoninGene-relatedPeptideand AsymmetricalDimethylarginineinRats TANGBaizheng,TANBing,LURong,LIYuanJian (FacultyofLaboratoryAnimal,HunanMedicalUniversity,Changsha410078,China) [Abstract]Inthepresentstlldy,thebloodcontentofcalcitoningene—relatedpeptide(CGRP)andasymmetric dimethylarginine(ADMA)in6monthsoldratswasdetectedincomparisonwiththatof20mo nthsofrats.In20 monthsoldrats,theserumcontentofADMAwassignificantlyincreased,comparedwith6mo nthsofrats,butthere wasnosignificantdifferenceinplasmaconcentrationsofCGRPbetween6and20monthsofra ts.Theseresults suggestthatintheoldergroupofrats,theelevatedlevelofADMAmaybeacontributortovascu larendothelial dysfunction. [Keywords]Age;Endothelialdysfunction;Asymmetricdimethylarginine;Calcitoningene —relatedpeptide 流行病学调查研究明,年龄是心血管 疾病发生的一个独立危险因素,老年人心血管 疾病(如高血压,动脉粥样硬化和糖尿病心血 管并发症等)的发生率明显高于其他年龄阶 段.然而,老年性心血管疾病的发病原因尚未 完全明了.大量研究表明,内源性活性物质 (包括神经递质)的含量变化与心血管疾病的 发生发展密切相关.上述心血管疾病都伴有血 管内皮功能不全,而后者与内源性一氧化氮合 酶(NOS)抑制物含量升高有关[1-a]. 降钙素基因相关肽(CGRP)为感觉神经递 质,广泛分布于心血管组织,具有复杂的心血 管作用,并已证明高血压,糖尿病血中CGRP水 平显着降低I4-~1.文献报道,随着年龄增加,血 管内皮功能减退.这种内皮功能减退的年龄相 关变化是否与血中内源l生一氧化氮合酶抑制物 以及CGRP浓度变化有关,尚未见报道.因此, 本实验检测不同月龄大鼠血中内源性NOS抑制 物不对称二甲基精氨酸(ADMA)与CGRP浓度, 探讨其与年龄的关系. 1材料和方法 作者简介:汤百争,男,副主任,研究方向:动物细胞学 1郴州医专药理教研室;2湖南医科大学药理教研室1.1实验动物清洁级4月龄和 18月龄雄性 ? 218? sD大鼠各16只,购自上海实验动物中心,在 我校动物中心寄养,单笼饲养,自由摄食和饮 水,室温维持18,2017,喂养2个月后进行实 验.6月龄和2o月龄大鼠体重分别为(520? 33)g和(636?56)g. 1.2实验方法 ?血清ADMA测定大鼠戊巴比妥钠(45mg/ kg,ip)麻醉,颈动脉插管取血,放入低温冰 箱静置2h后,离心(3000r/min,10min, 417),收集血清,用高效液相色谱(HPLC)测 定ADMA含量. ?血浆CGRP测定采血方法同前,取血3ml (含EDTA3ol,抑肽酶40g1)离心(3000r/ 3讨论 中国实验动物学杂志2000年第1o卷第4期 min,20min,4?),收集血浆,用放免方 法测定CGRP含量. 1.3试剂ADMA品购自sigma公司,CGRP 放免药盒购自北京东亚免疫技术研究所. 1.4统计方法实验数据采用?S,不同月 龄组间,同一指标采用t检验. 2结果 本实验采用HPLC和放免方法分别测定6 月龄和2o月龄大鼠血中ADMA和CGRP浓度,2o 月龄大鼠血清ADMA的浓度明显高于6月龄组, 而血浆CGRP的浓度无明显改变(表1). 表1不同月龄大鼠血浆CGRP浓度和血清ADMA浓度 Tab.IBloodcontentofCGRPandADMAinrats 血管内皮细胞合成和释放的No能舒张血 管平滑肌,抑制平滑肌细胞增殖,抑制白细胞 和血小板粘附与聚集.其合成是以体内L一精 氨酸为底物,由NOS催化而成.机体内存在调 节N0合成的内源性机制,即精氨酸同类物 ADMA抑制NOS阻断No合成.动物实验与临床 研究证明,高脂血症,高血压病,慢性心功能 不全以及糖尿病时,血中ADMA含量显着升高, 并伴有血管内皮舒张功能降低n,.这些发 现提示,内源性ADMA升高可能是No合成减少 的重要原因,也是这些心血管疾病发生的重要 促进物. 文献报道,随着年龄的增加,血管内皮功 能减退,而血管内皮功能减退可能与老年心血 管疾病的发生和发展有关.然而,年龄相关性 血管内皮功能减退的机制尚未明了.本实验结 果显示,老龄大鼠血中内源性ADMA含量显着 升高,提示内源性NOS抑制物升高可能是促老 ? ? 龄大鼠血管内皮功能减退的重要原因. CGRP是强效舒血管物质,并对心血管组 织具有保护作用.文献报道,CGRP对缺血心肌 和血管内皮具有保护作用j.在糖尿病大鼠,? 血浆CGRP含量明显减少,并伴有血管内皮依 赖性舒张功能降低j.本实验结果显示,6月 龄和2o月龄大鼠血浆CGRP浓度无明显变化. 这与早期文献报道的6月龄和2o月龄大鼠外 周血管组织中CGRP含量无明显变化一致,但 27月龄大鼠外周血管(肠系膜上动脉以及肾 动脉)组织CGRP含量显着降低l9I. 综上所述,老龄大鼠血中内源性ADMA浓 度升高,这一变化是否与老年血管内皮功能减 退有关,以及其升高的原因值得进一步研究. 参考文献 lYuXJ.LiYJ.XiongYIncreaseofallendogenousinhibitor ofnitricoxidesynthesisinserumofhighcholesterolfed rabbits,LifeSci,1994,54:753—758 ? ' 中国实验动物学杂志2000年第10卷第4期 2XiongY,LuR,LiYJ,eta1.Elevationofanendogenous inhibitorofnitricoxidesynthaseindiabeticratserumAeta Pha/'macoISin.1997,I8:5I1.5l4 3SurdackiA,NowickiM,SandmannJ,eta1.Reducedurinary excrectionofnitricoxidemetabolitesandincreasedplasma levelsofasymmetricdimethylarginineinmenwithessential hypertension.JCardiovascPharmacol,1999,33:652—658 4KawasakiH.SaitoA.Tal【asakiK.Age.relateddecreaseof calcitoningene-relatedpeptide-containingvasodilatorinner— vationintIlemesentricresistancevesseloftIlespontaneously hypertensiverat.CirRes,1990.67:733.743 5LuR,XiongY,LiYJ,eta1.Relationshipbetweencalcitonin gene-relatedpeptideandendothelium-dependent vasorelaxationinstreptozotocin.induceddiabeticrats.Chi. 219- neseJPharmacolToxico1.1997.11:168.170 6UsuiM,MatsuokaH,MiyazakiH,eta1.Increaseendog- enousnitric0xidesynthaseinhibitotinDatientswithconges— tiveheartfailure.LifeSci.1998,62:2425.2430 7KallnerGReleaseandeffectsofcalcitoningene-relatedpeP- tideinmyocardiaIischaemia.ScandCardiovascJ.1998.32 (Suppl491:1.35 8LiYJ,PengCF,LiNS,eta1.Calcitoningene-relatedpeptide protectsagainstendothelialcelldamageduetooxidisedlow- densitylipoprotein.MedSciRes,1995,23:253-254 9LiYJ.DUCklesSEEctofageonvascularcontentofcalcito- ningene-relatedpeptideandmesentericvasodilatornerve activityintIlerat.EurJPharmaco1.1993.236:373.378 (收稿日期:2000-06-08) 欢迎订阅《中国实验动物》 中国实验动物》是由中国实验动物学会主办并发行的国家级学术刊物,现已经开 始办理2001年征订手续. 本刊内容:刊载有关实验动物和动物实验的理论专着,科研成果{仑文.科学实验新 方法,新材料,实验动物新资源 开发,新的动物品系的培育和应用以及与实验动物有关的其它学科的科学论述.开 设栏目有:研究论着和研究快报. 读者对象:农牧渔业,医学,药学,环保,生物,体育,国防等的单位,科技工作者,教育工 作者,管理人员以及 有关的生产者,大专院校学生等.本刊竭诚为广大读者服务,欢迎踊跃订阅. 刊期及订价:中国实验动物》季刊,16开本,64页.每逢季月末出版. 每期订价1O元,全年4期,合计4O元. 订阅办法:剪下下面订单或向编辑部索取订单, 联系人:中国实验动物编辑部》 北京朝阳区潘家园南里5号(100021) 通过邮局汇款.(汇款简言注明用途) 吴漪丽 电话:010—67761337 中国实验动物编辑部 ———————————————————————————— (剪卜寄回)———————————————————————————— 2001年《中国实验动物》订单 订阅单位收件人 详细地址邮编 订阅数量套(4期/套)总金额一兀 备注编辑部收到款后随即寄收据 《中国实验动物》编辑部 ??