乐肝复方合剂对肝纤维化模型大鼠肝组织胶原合成的影响

乐肝复方合剂对肝纤维化模型大鼠肝组织胶原合成的影响 乐肝复方合剂对肝纤维化模型大鼠肝组织 胶原合成的影响 ? 256?JournalofMedicalScienceYanbianUniversityDee.2008Vo1.31No.4 乐肝复方合剂对肝纤维化模型大鼠肝组织胶原合成的影响 秦向征,李良昌 (延边大学基础医学院解剖学与组织胚胎学教研部,吉林延吉133000) [摘要][目的]观察乐肝复方合剂对肝纤维化模型大鼠肝组织胶原合成的影响,探讨乐肝复方合利的 抗肝纤维化作用.[]采用腹腔注射给予二甲基亚硝胺的方法制作肝纤维化大鼠模型,分别灌胃给 予大,中,小剂量乐肝复方合剂,通过透射电子显微镜观察肝组织内胶原沉积情况及病理学变化. [结果]灌胃给予大,中剂量乐肝复方合剂可明显降低肝纤维化大鼠肝组织胶原含量,改善肝组织病理 变化.[结论]乐肝复方合剂可抑制肝纤维化大鼠肝组织胶原合成,延缓肝纤维化进程. [关键词]肝硬化;胶原;植物,药用;大鼠 [中图分类号]R285.5[文献标识码]A[文章编号]1000—1824《2008)04—0256—02 Effects0ftheLegancompoundforsynthesisofcollagensinhepatic fibrosisofrats QINXiang-zheng,LILiang-chang (DepartmentofAnatomyandHistologyandEmbryology,YanbianUniversityCollegeofBas icMedicine,Yanji133000, J,?,China) ABSTRACT:oBJEcTlvEoobservetheinhibitoryeffectsandmechanismOltheLegancomp oundonthe synthesisofcollageninhepaticfibrosisofrats.METHODSThemodelsofhepaticfibrosisinratswere inducedbyinjectingt0abdominalcavitywithdimethynitrosamine.TheLegancompoundwasgivenby intragestricadministrationatalarge.middleandsmalldose,respectively.Thepathologicalchangesand thedepositionofcollageninliverwereobservedbytransmissionelectronmicroscopy.RESULTSTheLegan compoundoflargeandmiddledosesignificantlyreducedthecontentofcollagenandimprovedpathological changesofliverinhepaticfibrosisofrats.CoNCLUsloNTheLegancompoundcaninhibitthesynthesisof collagenanddelaytheprocessofhepaticfibrosis. Keywords:livercirrhosis;collagen;plants,medicinal;rats 肝纤维化是由各种原因引起的慢性肝损伤所共 有的细胞病理学过程,本质是以胶原为主的细胞外 基质合成增多,降解相对减少,两者失去动态平衡, 致过多的细胞外基质沉积于肝内引起肝纤维化.近 年来的研究结果表明,肝纤维化的病理过程是可逆 的,只要在肝纤维形成阶段给予合理的治疗,可达到 逆转肝纤维化进程,进而缓解乃至治愈肝纤维化的 目的].乐肝复方合剂由生牡蛎,瓦楞子,浙贝母及 [收稿日期]2008—09—25 [作者简介]秦向征(1977),男,讲师,医学硕士,研究方 向为细胞免疫学. 赤芍等中药组成.本实验通过建立肝纤维化大鼠模 型,探讨了乐肝复方合剂对肝纤维化大鼠胶原合成 的影响及抗肝纤维化的作用. 1材料与方法 1.1材料实验动物取成年Wistar雄性大鼠,体 重为1304150g,由延边大学医学部实验动物科提 供.乐肝复方合剂由延边大学药学院药物化学教研 室分离,提取,制备方法如下:取生牡蛎30g,瓦楞子 30g,浙贝母20g,赤芍40g,加蒸馏水煮沸1h,过 滤,滤出液备用,将原药再煮沸1h,过滤,混合第 1次和第2次滤出液浓缩至120mI即得.二甲基亚 延边大学医学2008年l2月第31卷第4期 硝胺为日本东京化成工业株式会社产品,东宝肝泰 片为中国通化东宝药业股份有限公司产品.实验所 用的仪器有瑞典LKB2088型超薄切片机及日本 JEM—l200EX型透射电子显微镜. 1.2方法肝纤维化大鼠模_型的制作:参照 Ala—Kokko等的方法,用生理盐水配制5g/I二甲 基亚硝胺稀释液备用,将其以2mI/kg的剂量进行 腹腔注射给予实验大鼠,每周连续3d,每日1次,共 4周.动物分组及给药方法:将60只大鼠随机分为 正常对照组,模型对照组,药物对照组及乐肝复方合 剂大,中,小剂量组,每组各为1O只,在模型制作的 同时每日灌胃给予药物对照组大鼠D.8g/kg东宝 肝泰片,每日分别灌胃给予乐肝复方合剂大,中,小 剂量组大鼠20,10,5g/kg乐肝复方合剂,灌胃给予 正常对照组和模型对照组大鼠等容积生理盐水,实 验周期为6周.所有大鼠在末次灌胃后,禁食24h, 断头处死.剖取肝左叶相同部位.肝组织经戊二醛一 锇酸双重固定,系列丙酮脱水,以Epon812.815混 合树酯包埋,切片,行醋酸铀一柠檬酸铅双重染,用透 ? 257? 射电子显微镜观察,并拍片分析. 2结果 2.1肝脏病理变化的肉眼观察正常对照组大鼠 肝脏颜色呈鲜红色,表面光滑,质脆柔软.模型对照 组大鼠肝脏体积缩小,质地较韧,边缘较钝,颜色呈 暗红色,表面粗糙.乐肝复方合剂大,中剂量组及药 物对照组大鼠肝脏在色泽,质地,大小及表面光滑方 面较模型对照组均有明显改善,而乐肝复方合剂小 剂量组则未见明显改善. 2.2透射电子显微镜观察正常对照组大鼠肝窦 周隙内偶尔可见少量的胶原纤维束(图1A);模型 对照组大鼠肝窦周隙内出现大量的胶原纤维束,且 可见肝细胞和线粒体肿胀,嵴断裂,内质网扩张 (图1B);药物对照组(图1C)及乐肝复方合剂大, 中剂量组(图1D,E)大鼠肝窦周隙内胶原纤维束明 显减少;乐肝复方合剂小剂量组大鼠肝窦隙内胶原 纤维束含量与模型对照组相比较无明显差异 (图1F). A:正常对照组;B:模型对照组;C:药物对照组;D:乐肝复方合剂大剂量组;E:乐肝复 方合剂中剂量组;F:乐肝 复方合剂小剂量组 图l各组大鼠肝细胞及肝窦周隙观察所见×10000 3讨论巨噬细胞分泌多种细胞因子,肝细胞,血小板和血窦 内皮细胞等分泌的细胞因子,脂质过氧化产物等化 目前认为肝纤维化是由各种损伤肝脏因子引起学递质共同作用于肝窦周隙内的 肝星状细胞,使之 肝细胞损伤,坏死,凋亡及肝组织炎症反应,激活肝激活,合成大量的胶原所致.随着 对肝纤维化发生 ? 258?JournalofMedicalScienceYanbianUniversityDec.2008Vo1.31No.4 机制研究的深入,证实肝纤维化可以逆转,早期的治 疗不仅可以逆转肝纤维化,而且可有效地防止肝硬 化的发生l4刮.本实验结果表明,乐肝复方合剂可明… 显抑制肝组织内胶原的合成,延缓肝纤维化进程.前 期研究结果表明,乐肝复方合剂对四氯化碳损伤体[4] 外培养大鼠肝细胞具有保护作用,而肝细胞损伤是 肝纤维化的重要启动因素,肝细胞损伤通过多种途 径激活邻近的肝星状细胞[7],合成大量的胶原.乐肝 复方合剂的抗肝纤维化作用可能是通过保护肝细 胞,抑制肝星状细胞激活,从而抑制肝组织内胶原的 合成而实现. E6] [参考文献] [1]方承康.中西医抗肝纤维化的研究现状与展望[J].新 中医,2001,33(10):72.[7] [2]Ala—KokkoI,PihlajaniemiT,MyersJC,eta1..Gene . '屯.5止.;'LI_L.j^L—止址.'lL expressionsoftypeI,?andIVcollagensinhepatic fibrosisinducedbydimethytnitrosamineintherat[J]. BiochemJ,1987,244(1):75. 姜慧卿,晓岚.肝纤维化的发生机制[J].世界华人消化 杂志,2000,8(6):687. 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[关键词]马齿苋;抗炎剂(中药);镇痛药 [中图分类号]R285.5[文献标识码]A[文章编号]1000—1824(2008)04—0258—03 Study0nanti—inflammationandtheanalgesiceffects0fthePurslane extract JINYing-zi.ZHANGHong-ying2.FULiu-jing? (1.DepartmentofExperimentalAnimalBranch,YanbianUniversityHealthScienceCenter; 2.TeachingCenteroj'Functional Ea'perimentalScience,YanbianUniversityCollegeofBasicMedicine:Yanji133000.Jilin, China) ?延边大学医学部2004级麻醉学专业学生 [收稿日期]2008—10—23 *[通讯作者]张红英(1952一),女,高级实验师,研究方向 为心血管与抗衰老药理. ? ABSTRACT:OBJECTIVETostudythe anti—inflammationandtheanalgesiceffectsof Purslaneextract.METHODSTheauricle inflammationmodelsweremadewithxyleneand crotonoiltoinvestigatetheeffectsofPurslane