SLE患者血清抗核小体抗体检测
[摘要]目的:研究抗核小体抗体(ANuA)检测对系统性红斑狼疮(SLE)、狼疮性肾病(LN)的诊断价值。方法:收集2005年1月至8月我院门诊和住院的186例SLE患者(其中141例合并LN)的血清,检测ANuA、抗ANA、ds-DNA和ENA(sm、RNP)抗体。结果:115例SLE活动期患者,99例ANuA阳性,其中93例为LN,ANuA阳性率86.1,;71例SLE缓解期患者,39例ANuA阳性,其中23例为LN,ANuA阳性率54.9,。ANuA检测对SLE的灵敏度为74.2,,对LN的灵敏度为82.3,。结论:ANuA可作为除抗ds-DNA和sm抗体外诊断和判断SLE活动性,尤其是诊断LN的一种新的抗体。
[关键词]抗核小体抗体;系统性红斑狼疮;狼疮性肾病;酶联免疫吸附试验
[中图分类号]11593.24 [文献标识码]B [文章编号]1671―7562(2007)05―0400―02
系统性红斑狼疮(SLE)是一种侵犯全身结缔组织和多个器官的炎症性自身免疫病,早期
现多种多样。狼疮性肾病(LN)是SLE最常见和最严重的内脏损害,约占SLE患者的60,,80,。肾脏损害可出现于本病任何阶段,以第1年最多,临床上肾外表现与。肾脏病变并无明显平行关系。近来研究发现,核小体在LN的发病过程中起着重要作用。本研
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究采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测186例SLE患者血清中抗核小体抗体(ANuA),分析ANuA对SLE、LN的诊断价值。
1 资料与方法
1(1 一般资料
血清标本来自于2005年1月至8月我院门诊和住院的186例SLE患者,其中女166例,男20例,年龄15,60岁,平均(32?10)岁。根据临床表现及实验室检查指标,参照SLE临床活动指数对SLE患者评分,其中SLE活动期115例,缓解期71例,合并LN141例。
1(2 方法
ELISA法检测血清ANuA,所需试剂购自德国欧蒙实验室免疫制品有限公司。微孔板用小牛胸腺纯化天然核小体包被,血清经1:200稀释后加入微孔板温育;洗涤后再加入过氧化物酶标记的兔抗人IgG温育;再洗涤,最后加入色原四甲基联苯胺和底物过氧化氢显色。以1mol?L-1磷酸作为终止液,用奥地利CB-128酶标仪450nm波长比色,用6份标准血清浓度和其吸光度作标准曲线,据标准曲线求出血清标本中抗核小体抗体浓度。SLE患者血清抗ANA、ds-DNA抗体用间接免疫荧光法检测,抗ENA(Sm、RNP)抗体用免疫印迹法测定,试剂盒均购自德国欧蒙实验室免疫制品有限公司。
1(3 统计学处理
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数据的比较采用x2检验,由SAS软件完成,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2(1 SLE活动期与缓解期患者血清ANuA比较
SLE活动期ANuA阳性率为86.1,,缓解期为54.9,,活动期高于缓解期,差异有统计学意义(P<0.01)。见表1。
2(2 SLE患者自身抗体检测结果
186例SLE患者ANuA阳性138例,其中116例为LN,ANuA检测对SLE的灵敏度为74.2,(138,186),对LN的灵敏度为82.3,(116,141)。ANuA检测对SLE的灵敏度高于抗ds-DNA、Sm、RNP抗体(均P<0.01)。见表2。
3 讨论
SLE是一种以多系统损害伴多种自身抗体为特征的免疫性疾病。SLE患者血清中常检测到大量的自身抗体,其中以抗ds-DNA抗体与发病关系最为密切。DNA与抗DNA抗体形成的可溶性免疫复合物沉积于肾小球基底膜及小血管内膜下,激活补体造成炎症反应,引起肾脏病变。虽然抗ds-DNA抗体特异性高,但临床阳性检出率低。Tax等认为这些抗体的产生与SLE患者淋巴细胞凋亡有关,细胞凋亡过程中所释放的核小体在ANuA的产生中具有重要意义。核小体作为自身隐蔽抗原或免疫性颗粒,诱发对核小体抗原特异的辅助性T细胞自身免疫耐受异常,从而激活B淋巴细胞产生ANuA、抗
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DNA抗体等。实验表明,在狼疮鼠中,核小体所刺激CD+Th细胞诱导抗ds-DNA抗体和抗组蛋白抗体的产生,但是ANuA仅对核小体起作用,并不与其成分中的DNA或组蛋白反应,且先于抗ds-DNA抗体和抗组蛋白抗体形成,ANuA的效价与疾病的活动性成正相关。本研究采用ELISA法检测了186例SLE患者血清ANuA,发现其阳性率为74.1,,141例LN患者中ANuA阳性率为82.3,。从本研究可见,SLE患者活动期与缓解期血清ANuA阳性率比较差异有统计学意义(P<0.01)。我们在实验中还发现,186例SLE患者中74例抗ds-DNA抗体阳性,伴ANuA阳性67例;而在抗ds-DNA抗体阴性的SLE患者中,有64例ANuA阳性,占57.1,,其中38例LN患者血清ANuA阳性,占33.9,,与国外报道相近。由于抗DNA抗体仅是ANuA谱中的一种亚型,因此,ANuA的检测对临床上抗ds-DNA抗体阴性的LN患者很有帮助。
SLE标志性抗体为抗ds-DNA和Sm抗体,这两种抗体对诊断SLE特异性高,但因其灵敏度低,故阳性率不高,抗ds―DNA抗体阳性率为30,,40,,抗Sm体抗阳性率也只有20,,30,,而ANuA的阳性率为74.1,,明显高于抗ds-DNA和Sm抗体阳性率(P<0.01);且在LN患者中,ANuA的阳性率高达82.3,,这就大大提高了SLE及LN诊断的敏感性,对早期的脏器损害诊断有极大的意义,国外也有文献报道ANuA的检测在SLE的诊断和疾病监测中有重要作用。关于LN患
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者肾活检结果与AnuN检查的关系,目前尚未见相关报道,
有待于我们临床实验进一步探讨。
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