【doc】HPLC法测定盐酸硫必利注射液的含量及其有关物质

【doc】HPLC法测定盐酸硫必利注射液的含量及其有关物质 HPLC法测定盐酸硫必利注射液的含量及 其有关物质 齐鲁药事?QiluPharmaceuticalAffairs2005Vo1.24.No.6 HPLC法测定盐酸硫必利注射液的含量及其有关物质 李洁,邵义红,崔新德 (山东齐都药业有限公司淄博255400) ? 349? 摘要:目的采用高效液相色谱法测定盐酸硫.必利注射液含量及其有关物质.方法 以c18柱为色谱柱(250×4.6ram. 5mn);O.005tool?L-1辛烷磺酸钠溶液一甲醇一乙腈(60:15:25)(用磷酸调pH值至 3.O)为流动相;流速1.0rnl?ml一;检测波长 235nm.结果该方法测定的线性范围为9.O,150~g?ml-1(r=1.oooo).结论该方法准 确,灵敏,快捷,适用于谊产品的 质量控制. 关键词:盐酸硫必利注射液含量有关物质HPLC 中图分类号:TO460,7文献标识码:A文章编号:1672—7738(2005)05—0349—03 DeterminationofTiaprideHydrochlorideInjectionandrelatedsubstancesbyHPLC LiJie,ShaoYi-hong,CuiXin-de (ShandongQiduPharmaceuticalLimitedCompany,Zibo,255400) Abstract:objectiveToestablishaHPLCmethodfordeterminationofTiaprideHydrochiodde Injectionanditsrelatedsub. stances.MethodsYwG— Cl8column(250X4.6mm,5m)wasused.Themobilephaseconsistedof0.005mol?L一 SDSsolution. methan')1.acetonitrile(60:15:25)(adjustedtOpH3.0byphosphateacid).Theflowratewas1. 0ml?rain,andthedetectivewa, Iengthwasat235Ril1.ResultsTheIinearrangeWasbetween9.0, 150Vg?ml-1(r=1.oooo).ConclusionThismethodisco1we. nientandaccurate.Itcanbeusedforthequalitycontrolofthisproduct. Keywords:TiaprideHydrochlorideInjection;content;relatedsubstance;HPLC 硫必利系含甲砜基的邻茴香酰胺衍生物,为一新型神经 精神安定药.具有抗精神运动行为障碍,镇痛,镇吐及兴奋胃 肠平滑肌等作用.临床主要用于神经系统及精神运动行为 障碍等病症.盐酸硫必利原料含量测定方法为非水滴定法, 注射液及片剂采用紫外分光光度法…;而由盐酸硫必利原料 药质控标准可知,原料中含有两种已知杂质,采用薄层色谱 法【2】控制.注射液无有关物质检查项【引.本文参考文献,经 试验建立HPLC法测定盐酸硫必利注射液的含量及其有关 物质.方法准确,灵敏度高,专属性强.可用于盐酸硫必利注 射液质量控制方法. 1仪器与试药 UV一2550型紫外分光光度计(岛津);Tsp一100高效液 相色谱仪(美国);紫外一可见检测器;甲醇,乙腈(色谱纯), 辛烷磺酸钠等(分析纯).盐酸硫必利氯化钠注射液(批号: 020511,020512,020513),盐酸硫必利,2一甲氧基一5一甲磺 酰基苯甲酸和2一甲氧基一5一甲磺酰基苯甲酸甲酯对照 品.均由江苏帝益药业有限公司提供. 2实验方法与结果 2.1色谱条件Phenomenexc18柱(250X4.6mm,5tn-n);流 动相:0.005tool?L-1辛烷磺酸钠溶液一甲醇一乙腈(60:15: 25)(用磷酸调pH值至3.O);检测波长为235nm;流速1.0ml ?mro 2.2色谱系统适用性试验分别精密称取盐酸硫必利对照 品2一甲氧基一5一甲磺酰基苯甲酸和2一甲氧基一5一甲磺 酰基苯甲酸甲酯两种杂质对照品适量,分别加水适量溶解后 用水稀释制成每lml中约含75g的溶液,精密量取上述三 种对照品溶液各lml,置100ml容量瓶中,用水稀释至刻度. 摇匀,作为供试品溶液,精密量取1O注入液相色谱仪,记 录色谱图,结果表明:两种杂质峰形良好,与主成分峰最小分 离度2.73.由工作站可知硫必利峰理论塔板数为,l= 17752,拖尾因子1.O4,结果见图1. 0I2,467sql0ll12I,14IS 时?日fm:_.I 图1盐酸硫必利与有关物质分离度图 2一甲氧基一5一甲磺酰基苯甲酸保留时同4.373min,2 ? 350? 一 甲氧基一5一甲磺酰基苯甲酸甲酯保留时间8.615min,盐 酸硫必利保留时问10.048min. 2.3辅料干扰试验量取空白辅料液10注入液相色谱仪, 照1.2项下测定法测定.结果表明:在该色谱条件下,辅料 不干扰测定. 2.4最小检出量分别精密称取盐酸硫必利对照品和两种 杂质对照品适量.加水适量溶解后用水稀释制成每lml中约 含0.075~g的溶液,以信噪比为3:1时相应浓度的量确定检 出限,计算得盐酸硫必利的最小检出量为0.03ng,杂质(1) 为0.652ng.杂质(2)为0.644ng. 2.5工作曲线精密称取盐酸硫必利对照品适量,加水溶解 后稀释制成9,15,30,60,90,150t.tg?mlI1的系列浓度的溶 液,依法测定.以硫必利的浓度C对峰面积A作工作曲线. 得方程,C=22.1615A+4.02741.相关系数r=1.0000(rl =6).盐酸硫必利(按硫必利计)在9.0,150~g?ml-1浓度范 围内线性良好. 2.6回收率试验按处方量50.0%,100.0%,200%精密称 取盐酸硫必利注射液原辅料各三份,加水溶解后,稀释至相 应浓度测定硫必利含量.平均回收率100.O1%,RSD= 0.289%. 2.7稳定性试验取本品一瓶,精密吸取适量.加水稀释制 成硫必利30旭?mlI1浓度的溶液,分别于0,4,8,12,24h测 定,RSD=0.12%(,l=5),本样品溶液至少在24h内稳定 性好. 2.8精密度试验取回收率测定项下对照品溶液,连续进样 测定6次,RSD=0.12%(rl=6). 2.9专属性试验取lOOml容量瓶3个,编号,分别精密吸 取盐酸硫必利氯化钠注射液5ml置容量瓶中,1号瓶加 0.Itool?L-1的NaOH5ml,2号瓶加0.Itool?LI1的HCI5ml, 3号瓶加0.1%的高锰酸钾2ml.80?水浴2h,冷却至室温, 调pH至中性.定容,用0.45肿的滤膜过滤,取续滤液测定, 主要分解产物为2一甲氧基一5一甲磺酰基苯甲酸.保留时 问4.15rain,2一甲氧基一5一甲磺酰基苯甲酸甲酯.保留时 问8.5min.盐酸硫必利峰保留时问为9.8min.两杂质峰均与 主峰分离良好.另取样品分别置高温12012破坏2h.4500Lx 强光照射10d取样检测.样品无明显变化.表明本品性质稳 定.附高温和氧化破坏图谱. 图2高温破坏图谱 2一甲氧基一5一甲磺酰基苯甲酸甲酯保留时问 8.578rain;盐酸硫必利保留时问9.518min. 壹叁垫皇些!型丝rn2005Vo1.24,No.6 ? l;J%..- 0I234s''I?10lIl2l,?bl'"nl??2l曲叠 .|目l 图3氧化破坏图谱 2一甲氧基一5一甲磺酰基苯甲酸甲酯保留时问 8.598min;盐酸硫必利保留时问9.878min. 2.10样品含量测定精密吸取本品适量,加水稀释制成每 lrrd中约含硫必利30/~g的溶液.作为供试品溶液;另精密称 取干燥至恒重的盐酸硫必利对照品适量,加水溶解后稀释青I 成每lrrd中约含硫必利30/~g的溶液,作为对照品溶液.分 别取上述溶液各10进样测定,按外标法以峰面积计算含 量,同时与原标准的紫外分光光度法测定结果比较.见下表. 衰样品的吉量及有关物质测定结果 2.11有关物质测定取样品4批,分别精密吸取本品5ml.置 1ooTI1I容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液.精 密量取供试品溶液lml,置lOOml容量瓶中,用水稀释至刻度, 摇匀,作为对照溶液.照含量测定项下测定条件,分别取上述 溶液10注入液相色谱仪测定并计算,结果见表. 3讨论 3.1盐酸硫必利注射液制备过程中会带进原料杂质,放置过 程中也可能产生降解产物.两种已知杂质与原料的结构相 近,紫外吸收相近.用薄层色谱法测定影响因素多,重现性 差,因此有必要建立高效液相色谱法测定盐酸硫必利注射液 含量及其有关物质检查项. 3.2测定波长的选择盐酸硫必利在288,235,212rim波长 处有最大吸收峰.盐酸硫必利原料中已知杂质2一甲氧基一 5一甲磺酰基苯甲酸在291,241,212rim有最大吸收峰.2一 甲氧基一5一甲磺酰基苯甲酸甲酯[杂质(2)]在278,242, 204nm波长处有最大吸收峰.综合考虑各物质的紫外吸收特 征,盐酸硫必利原料及已知杂质均在235nm波长处有相近 吸收,确定235nm为含量和有关物质测定波长.经二极管 阵列检测各峰三维色谱图,主峰及杂质峰均为单一峰. 3.3流动相选择参照文献报道的色谱条件试验.峰形均有 不同程度的拖尾.柱效低.本实验方法对流动相[(5retool辛 烷磺酸钠):甲醇:乙腈]的组成和比例.设计了不同,试 验结果表明:在该色谱条件下主峰有良好的峰形,与相邻杂 质峰的分离度达到2.73.测定结果准确稳定. 参考文献. 壹鱼垫皇:型些盟!_nfAffairs2005v.24,No.6 [1]国家药品监督管理局国家药品标准(地标升国标)第5册:220. [2]国家药品监督管理局国家药品标准(地标升国标)第5册:218, ? 351? 2l9. E33国家药品监督管理局国家药品标准(新药转正标准)第33册:130 HPLC法测定去甲斑蝥素片的含量 王波,周维利,司淑媛 (山东省药品检检所济南250012;1.济南槐荫人民医院济南250021) 摘要:目的建立去甲宽蝥素片中去甲斑蝥素的HPLC含量测定方法.方法用B柱,流动相为0.020mo1.L一磷酸二 氢钾溶液一甲醇(70:30)(用磷酸调节pH值至3.1);检测波长为213nm.结果线性范Itt为0.068~0.340mg.ml一.去甲斑 蝥素的高,中,低三个加入量的回收率分别为98.9%(RSD=1.1%),98.4%(RSD=1.2%) 和99.5%(RSD=0.9%).结 论本法结果准确,重现性好. 关键词:HPLC去甲斑蝥素含量测定 中图分类号:TQZI6072文献标识码:A文章编号:1672—7738(2005)05—0351—02 DeterminationofDemethylcantharidinTabletsbyHPLC Wangt3o,ZhouWei—li,SiShu—yuan (ShandongInstituteforDrugControl,ji'nan,250012;1.HuaiyinPeople'SHospitalofji'nan,Ji 'nan,250021) Abstract:0bjectiveToestablishaHPLCmethodforthedeterminationofDemethylcantharidi ninDemethylcantharidin Tablets.MethodsDiamonsilTMcl8columnwasused.Themobilephasewas0.020mol?L_.p otassiumdihydrogenphosphdtesolution. methanol(70:30)(adjustedpHtO3.1byphosphoricacid).Thedetectivewavelengthwasat21 3nm.ResultsThelinearrangewas 0.0680.340mg'ml 一.Theaveragerecoveriesofthreeconcentrationwere98.9%(RSD=1.1%),98.4%(RSD=1. 2%)and 99.5%(RSD:0.9%)respectively.ConclusionThemethodwasaccurateandhadgoodreprodu cibilities. Keywords:HPLC;Demethylcantharidin;determination 去甲斑螯索为抗肿瘤药,用于肝癌,食道癌,胃和贲门癌 以及白血球低下症等,亦可用于术前用药或联合化疗中.国 家药品标准用酸碱滴定法测定其含量【ll,本文利用HPLC法 测定去甲斑蝥素的含量,取得满意效果. 1仪器和试药 Agilentl100.series高效液相色谱仪.去甲斑蝥素片和去 甲斑蝥素对照品(纯度为99.6%)均由山东某制药厂提供. 甲醇为色谱纯. 2方法和结果 2.1色谱条件色谱柱:Dian10r商ITMCI8柱(250×4.6mm, 5m);流动相:0.020mol?L-1磷酸二氢钾溶液一甲醇(70: 30)(用磷酸调节pH值至3.1);流速0.6ml?minI1;柱温 35?;检测波长213rim.在此色谱条件下色谱图为:(对照 品,样品HPLC图). 图对照儡(A)和样品(B) 2.2线性关系精密称取去甲斑瞀索对照品约40mg,置 25ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,精密量取1.0, 2.0,3.O,4.0,5.0ml,分别置25ml量瓶中.用流动相稀释至 刻度,分别进样2Oral,峰面积,峰面积(Y)对去甲斑蝥素 浓度(x)进行线性回归,得回归方程为:Y=549.05X一 1.345,r=0.9997.结果表明:去甲斑蝥素浓度与峰面积 具有良好的线性关系,线性范围为0.068~0.340mg?ml,. 2.3精密度试验取线性试验项下0.204g?ml的对照品溶 液,重复进样6次,记录峰面积,精密度良好,RSD为 0.72%. 2.4回收率试验取已知去甲斑蝥素含量的样品溶液,并加 入适当的对照品溶液,按样品测定法测定含量,计算回收率, 结果见表1. 表1回收率测定结果(n=5) 2.5重复性试验取同一批样品,精密称取5份,按样品测 定项下方法测定去甲斑蝥素的含量,结果表明本法重复性良 删幅m伯?,拈.